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1、临床医学检验临床免疫技术:酶免疫技术考点巩固1、单选E1.lSA板包被后,最常用的封闭物质是OA人白蛋白B.人球蛋白C.牛血清白蛋白D.牛血清球蛋白E.鼠白蛋白正确答案:C参考解析:将抗原或抗体固相化的过程(江南博哥)称为包被。由于载体的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯E1.lSA板为载体,通常将抗原或抗体溶于缓冲液(最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液)中,加于E1.lSA板孔中在4过夜,经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低,固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖,其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面,最后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下,如在
2、包被后再用1%5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除这种干扰。这一过程称为封闭。包被好的E1.ISA板在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。考点:免疫吸附剂2、单选关于斑点-E1.ISA说法哪一项不正确OA.以吸附蛋白能力很强的硝酸纤维膜为载体B.底物经酶反应后形成有色沉淀,使固相膜染色C.斑点-E1.lSA灵敏度高,测得效价常高于常规E1.ISAD.操作简便E.斑点-E1.ISA可同时获得对多种疾病的诊断结果正确答案:C参考解析:斑点-E1.lSA的原理与常规E1.lSA相同,不同之处在于斑点-E1.lSA采用的固相载体为对蛋白质具有很强吸附力的硝酸纤维素膜,故检测灵敏度高,是普通E1.ISA
3、的68倍。如果膜上同定多种抗原,可同时检测多种抗体。3、单选酶扩大免疫测定技术是最早取得实际应用的何种酶免疫测定方法OA.均相酶免疫测定B.异相酶免疫测定C.固相酶免疫测定D.液相酶免疫测定E.固相一液相酶免疫测定正确答案:A4、单选下列哪项不是血药浓度免疫学测定的技术OA.化学发光免疫测定B.免疫电泳法C.放射免疫法D.荧光免疫法E.酶免疫法正确答案:B参考解析:药物多数分子量很小,为半抗原。免疫电泳的方法不够灵敏,不适于测定半抗原。5、单选用E1.ISA双抗体夹心法检测抗原A时,固相载体的包被物是OA.酶标记A抗体B.未标记的抗A抗体C.未标记抗原AD.酶标抗球蛋白抗体E.酶标记抗原A正确
4、答案:B参考解析:E1.ISA法中双抗体夹心法的固相载体包被物是未标记的抗待测抗原的抗体。6、单选在双位点E1.lSA实验时,造成抗原测值低于实际含量的常见原因是O.固相抗体过多B.反应时间不够C.标记抗体过多D.待测物过浓E.酶的活性过高正确答案:D参考解析:钩状效应是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象,其中抗体过量叫做前带效应,抗原过量叫做后带效应。抗原抗体特异性反应时,生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体,均可发现只有在两者分子比例合适时才出现最强的抗原一抗体反应。7、单选酶联免疫吸附试验(E1.lSA)中应用最
5、多的底物是OA邻苯二胺(OPD.B.四甲基联苯胺(TMB.C.ABTSD.对硝基苯磷酸酯(p-NPP)E.以上都不是正确答案:B参考解析:邻苯二胺灵敏度高,比色方便,是E1.lSA中应用最早的底物,但稳定性差,反应过程需要避光,还具有致癌性;四甲基联苯胺稳定性好,反应无需避光,没有致突变作用,是目前应用最广泛的底物,但是水溶性差。8、单选E1.lSA试验中将HRP酶结合到抗原或抗体的方法是OA.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.戊二醛交联E.共价结合正确答案:D9、单选ABC法中的桥是指OA.生物素B.亲和素C.生物素化的抗体D.与生物素结合的酶E.三抗正确答案:B10、单选患者HBSA
6、g(+)、HBeAg(+)、抗一Hbe(一)、抗一HBCIgM(+)、抗一HBs(一),正确的判断是OA.急性乙型肝炎B.慢性乙型肝炎C.慢性迁延性肝炎D.乙肝恢复期E.慢性活动性肝炎正确答案:A11、单选均相酶免疫测定的优点不包括()A.多用于小分子激素和半抗原的测定B.勿需分离游离的酶标抗原C.易于自动化分析D.不易受样品中非特异的内源酶的干扰E.灵敏度可达10-9mol1.正确答案:D12、单选酶标板用抗原包被后要进行封闭的主要原因是OA.使抗原固化到聚苯乙烯板上B.增加酶标板的稳定性C.保护包被抗原的免疫活性D.防止非特异反应E.使酶的工作浓度最佳正确答案:D13、单选关于E1.ISA
7、的固相载体论述有误的是OA.最常用的是聚苯乙烯微量反应板B.每一批号的聚苯乙烯在使用前需检查其性能C.聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯低D.阳性和阴性标本测定结果差别最大者是最适用载体E.微孔滤膜也可作固相载体正确答案:C14、单选酶增强免疫测定技术是最早取得实际应用的OA.均相酶免疫测定B.异相酶免疫测定C.固相酶免疫测定D.液相酶免疫测定E.固相一液相酶免疫测定正确答案:A参考解析:均相酶免疫测定方法有酶增强免疫测定技术(EMIT)和克隆酶供体免疫分析方法。其中,酶增强免疫测定技术是最早取得实际应用的酶免疫测定方法。考点:均相酶免疫测定15、单选酶免疫技术中的酶结合物指的是OA.酶标记
8、抗体B.酶标记抗原C.酶标记抗原或抗体D.结合在固相载体上的酶E.酶与底物的结合正确答案:C16、单选利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体的方法,通常称为()A.双抗体夹心法B.双位点一步法C.间接法D.竞争法E.捕获法正确答案:C参考解析:间接法是检测抗体最常用的方法,其原理是利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,只要更换不同的固相抗原,就可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。17、单选患者,男,36岁。HBSAg阳性5年,A1.T反复增高2年,经治疗可恢复。近2个月来乏力、食欲减退。体检:巩膜无黄染,未见肝掌及蜘蛛痣。肝于肋缘下1cm,脾侧位可及。实验室检查:1
9、.T420U1.,HBsAg(+)。诊断:慢性乙型肝炎。患者接受干扰素治疗。选择以下观察疗效的最佳指标()A.HBeAg(一)、HBV-DNA(+)B. HBeAg(一)、HBV-DNA(一)C. HBeAg(+)、HBV-DNA(一)D. HBsAg(+)、抗-HBe(+)E. HBsAg(+)、抗-HBc(+)正确答案:B参考解析:乙型肝炎病程超过半年,体征及肝功能异常符合慢性乙型肝炎诊断。HBeAg及HBV-DNA转阴或明显减少为治疗有效。18、单选E1.lSA试验中最常用的标记酶是()A. ASTB. HRPC. ACPD. 1.DHE. A1.T正确答案:B参考解析:在E1.ISA中
10、,常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)o应用AP系统,其敏感性一般高于应用。HRP系统,空白值也较低。但由于AP较难得到高纯度制剂,稳定性较HRP低,价格较HRP高,制备酶结合物时得率较HRP低等原因,国内在E1.lSA中一般均采用HRP。考点:酶和酶作用的底物19、单选关于E1.lSA竞争法正确的是()A.用于检测抗原B.被检测物与酶标记物的免疫活性各不相同C.被测物多则标记物被结合的机会少D.测定管的颜色比对照管的淡表示被测物量少E.只用于检测抗体正确答案:C20、单选一个亲和素分子可以结合几个生物素分子()A. 1个B.2个C.3个D.4个E5个正确答案:D21、单选酶
11、免疫技术用于样品中物质的定量测定(ElA)是基于OA.酶标记物参与免疫反应B.酶催化免疫反应,复合物中酶活性与样品测值呈正比C.含酶标记物的免疫复合物中的酶可催化底物成色,其色泽与待测物量相关D.固相化技术的应用,使结合和游离的酶标记物能有效的分离E.酶与抗原或抗体的特异结合正确答案:C参考解析:酶免疫技术是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析22、单选E1.ISA试验时易造成空白值增高的原因主要来自于OA.保温时间短B.加样不准C.洗涤不彻底D.比色误差E.包被不好正确
12、答案:C23、单选与双抗体夹心法相比,E1.ISA间接法的主要优点是OA.有较大的放大作用B.减少了操作步骤C.减少了冲洗次数D.可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体E.缩短反应时间正确答案:D24、单选可用免疫渗滤试验和免疫层析试验检测的项目没有()A.抗HCVB. HIVC. HCGD. HBsAgE. HAV正确答案:E参考解析:免疫渗滤试验和免疫层析试验具有简便、快速、单份测定、可立等结果等优点,无需任何仪器设备,试剂稳定,因此多用于急诊检验。这类试验不能准确定量,所以主要限于检测正常体液中不存在的物质以及正常含量极低而在特殊情况下异常升高的物质。目前临床检验中已开展的项目有HC
13、G、抗HCV和抗HIV、HBSAg等,新项目正在不断发展中。考点:酶免疫测定的应用25、单选均相酶免疫测定不具有的特点是OA.常用于半抗原和小分子的检测B.操作简便,易于自动化C.不易受样品中的内源性酶的干扰D.酶与抗原结合后仍保留酶和抗原的活性E.灵敏度不及异相酶免测定正确答案:C参考解析:均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与晦结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。均相酶免疫测定操作简便、快速、适合于自动化,应用广泛,不仅可检测药物、激素、毒品、兴奋剂等半抗原或小分子抗原,也可测定大分子蛋白质、病毒及细胞性抗原成分。最大缺点是
14、易受样品中非特异的内源性酶、酶抑制药及交叉反应物的干扰,而且由于采用竞争性结合分析原理,灵敏度不及异相酶免测定。考点:均相酶免疫测定26、单选下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的OA.可测定产物生成量B.可测定底物消耗量C.需最适pHD.需最适温度E.与底物浓度无关正确答案:E参考解析:酶促反应中需要最适pH、温度及过量的底物,反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消耗量来反映。27、单选以下哪一种复合物的形成属于间接法E1.lSA免疫反应结果OA.固相抗原-抗体-酶标二抗B.固相抗体-抗原-酶标抗体C.固相二抗TgM抗原-酶标抗体D.固相抗体-酶标抗原E.固相抗体-抗原-抗体-酶标抗
15、体正确答案:A参考解析:间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。28、单选最常用于IgM测定的E1.lSA方法是OA.双抗体夹心法B.间接法C.竞争法D.捕获法E.dotE1.ISA法正确答案:D29、单选选择E1.ISA的标记用酶,下面哪一项特性是不需要的OA.具有可与抗原、抗体结合的基团B.标记抗原后,酶活性保持稳定C.当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制D.酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好E.酶的稳定性、可溶性好正确答案:C参考解析:选择E1.lSA的标记用酶,保证标记抗原后,酶活性保持稳定。30、单选E1.lSA法检测抗-HBc,其操作原理为()A.双抗体夹心法B.双位点一步法