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1、血液和血液成分的细菌污染现状及对策(一)1血液和血液成分细菌污染现状1941年美国报导了由于输入细菌污染的血液成分而死亡的病例。之后，此类输血事件不断发生。20世纪80年代，在室温条件下保存的血小板细菌污染的报导也随之增加。尽管改善了无菌采血技术，但污染的血液成分造成的菌血症仍保持在一个固定的水平，并且时有致死的病例发生(Dc输血传播HBV.HCV和HIV的比例分别为1/20万、1/60001/10万和1/45万1/60万，由于检测试剂和技术的提高，输血传播疾病较血液污染的发生率明显下降。因此细菌的血液污染近来越来越引起人们的关注(2)o1995年9月25日FDA和AABB等发起在美国NIH临
2、床中心召开了“血液成分微生物污染现状研时会。目的在于回顾血液成分细菌污染的原因，测定和预防(3)。FDA强调所有执业证持有者和注册登记的厂家以及输血机构都须在7d之内向FDA的检查监察部门报告与输血有关的死亡情况.FDA报告每年的死亡数字为3050例，其中细菌污染为9例(3)。RamSey等(4)报道了自1993年1月1996年12月美国血液成分FDA强检报告，在960份血液中，细菌污染占0.2%。Klein等(3)指出向FDA报告的由于输注了细菌污染的血液造成死亡的数字1986年1991年是1976年1985年的2倍。1993年全年发病和死亡数字为179例，其中55%的死亡者与红细胞输注有关
3、，18%与血小板输注有关，13%与血浆输注有关。CUrrie等(5)指出，血小板在室温下保存，有利于细菌的繁殖，其细菌污染较高。Blajchman等(6)报道第1天的血小板中细菌数目不多，不易被检测出来，第3天后细菌数目增加，其污染率为0.67%.Burstain等(7)近来的研究表明血液的污染比例为IsI1000。由于血小板是510份混合后输注，所以病人污染机会增加至估计每年污染的血小板致死者为150例。在加拿大血小板的细菌污染比例是4.1/万10.7/万。法国从1994年1997年5月发生8028例输血事故，144例与细菌污染有关，涉及到红细胞的有97例，涉及到血小板的有53例，其中革兰氏
4、阳性菌占51%,革兰氏阴性杆菌占28%,棒状杆菌占6%(3).2血液和血液成分细菌污染的原因Klein等(3)指出造成血液污染的是普通细菌。污染源包括献血者、针穿刺处的皮肤、四周环境、空气、仪器、人群以及采血过程。Schaffner(8)指出在人的表皮上有两类细菌菌落。一类为短暂的菌落，即细菌污染表皮是短时间的，这些细菌不能固定在表皮繁殖。另一类为可残留的细菌菌落，它可以牢固地寄生在细胞上或细胞间、细胞碎片和皮肤脂质之中，在那里繁殖。肘窝部位的菌落主要含有革兰氏阳性球菌，如表皮葡萄球菌菌属。个别人身上可能有棒状杆菌和一些革兰氏阴性细菌。Rcharache强调微生物在血液中生长和繁殖的关键因素包
5、括接种的数量、贮存的条件(主要指温度)和特殊生物的品种和株别。例如肺炎链球菌需要一定的接种量，而金黄色葡萄球菌少于10个时，在适宜的环境下也能生存并繁殖13)。对临床反应来说微生物的数量也是一个重要因素。如葡萄球菌在输血时达到IOCFU时，受血者可以耐受，并能被患者清除。耶尔森小肠结肠炎杆菌在4团时经过1020d后便可迅速生长，即使细菌本身失去致病力，但是释放的内毒素，使患者受害(3)0关于献血者菌血症是血液污染的原因有不同看法。Benson(9)认为近期有皮肤破损穿刺史的献血者可能存有无症状的菌血症。GOIdman等(10)认为献血者患了胃肠和呼吸道感染,即使其血液培养阴性，也应当进一步收集
6、数据，确定细菌的来源。血液的细菌污染率高于临床患者的菌血症，其中原因是采血后的血中白细胞在短时间内仍有吞噬作用。Samz(11)报告22(316h后在全血中接种的表皮葡萄球菌和埃舍利希大肠杆菌数目减少，但金黄色葡萄球菌除外。Wagner(12)报告，血液在22团保存，延长至24h,细菌生长情况与8h时相同。3血液和血液成分细菌污染的预防3.1 皮肤消毒针穿刺部位的皮肤消毒对防止血液污染很重要。肥皂清洗不能杀死细菌，乙醇有较强的杀菌作用。皮肤涂抹酒精至少30s后，Imin为最佳，待全部蒸发后才能起到最大的消毒效果。碘酊制剂与洗必泰能与皮肤结合，并且有效地发挥抗菌作用(9)对碘过敏者可用洗必泰(1
7、3)。3.2 输血前的细菌检测较理想的预防措施是在输血前检测出细菌污染。Yomtoviom通过革兰氏染色法发现5例细菌污染血液，但有1例漏检(3)。BUrStain等(7)用试纸条测定浓缩血小板中的葡萄糖和PH来判定细菌污染，其敏感性和特异性分别为95%(107CFU/ml)和98%.试纸条能检测金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、仙影拳杆菌、肺炎沙雷伯杆菌、沙雷菌属，方法快速、廉价。Wagner等(2)用肉眼观察浓缩血小板云雾旋涡的消失、细胞外PH的下降及血浆葡萄糖水平的降低。当细菌数目N107CFUml时三个测定结果相似。而对阴沟肠杆菌，PH测定不敏感。近几年多用全自动细菌培养来检测血小板的细菌
8、污染(14,15)0这种方法可在68h获得细菌培养结果。阳性终点的确定由血液培养瓶的压力变化、PH值变化、颜色变化、微生物荧光测定、卡路里测定而获得。在培养中加入适量的皂氟可防止假阳性结果，提高准确度(16)。其方法敏感、快捷，应用趋势不断增加，但昂贵。3.3 采血和血保技术的改进Klein等(3)指出大多数细菌污染的血液出现在采血开始的5IOmI之内。欧洲一些国家已使用美国Baxtre公司生产的特制采血装置，将初采的IOmI血流入一个小血袋、弃去。Evspinasa等(18)用外周血做干细胞移植时用导管技术由肘正中静脉采血，每例均做细菌培养，减少细菌污染。BradIey等(17)将保存红细胞的温度由4团降至00,减少了细菌污染。RiVera等(19)配制了一种血小板保存液，将血小板贮存在4团不振荡，既延长了保存时间，又减少了细菌污染。3.4 血液制品病原体的灭活1.in等(20)用光化学方法，即8甲氧基补骨脂素，加长波紫外线照射，灭活高浓度的广谱病原体，并保持了足够的血小板体外功能。
