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1、乙型肝炎的试验室诊断血清标记物对于乙肝的病原学诊断最初、也是最常用的是乙肝病毒血清标记物(HBVM)检测。HBVM主要包括:两对半(HBSAg、HBSAb、HBCAg、HBeAb、HBCAb)、HBxAgHBXAb、前S抗原及抗体、DNA多聚酶(DNA-P)及抗体等。通过检测HBVM可以间接的多角度了解患者HBV感染、复制以及病情复原状况。常用血清标记物是两对半,临床意义如F:1.表面抗原(HBsAg):位于病毒外壳表面,由HBV基因组S区和前S区基因编码,完整的大分子HBSAg是完整病毒的必需条件。血清HBSAg的出现,意味着HBV的现症感染,是乙肝血清学检杳最重要的指标。HBsAg虽然只是
2、HBV存在的间接指标,但诊断乙肝的最常用也是最重要的指标,主要因它出现最早,一般在感染后3周出现,有利于早期诊断。其次,它持续时间长,急性患者至少持续5周,最长可持续5个月,并且在血液中的释放量大,特别简单检测。前S1.和前S2紧随HBsAg而出现在血流中,并与HBeAg和HBV-DNA相关。2.表面抗体(HBsAb):由于病毒HBsAg抗原性诱发机体产生的爱护性抗体,HBsAb是一种爰护系抗体,在HBSAg消逝后数周后出现,并可持续多年存在。HBSAb是全部乙肝要关抗体中出现最晚的。常与HBCAb同时存在,而很难与HBSAg同时被检出来。抗前SI抗体出现于潜藏期,是全部抗体中出现最早的。抗S
3、3抗体出现在急性期,处于HBY复制终止前后,提示有清除病毒的作用。3. e抗原(HBeAg):HBeAg是一种可溶性蛋白抗原,一般仅见于HBSAg阳性血清中,阴性中偶见。HBeAg出现在血中稍后于HBSAg,同时消逝很快,所以窗口期也不能出现。HBeAg是由HBV-DNA开放读码框前C区编码,与HBV的活动性复制亲密相关,是HBV传染性的重要指标。HBCAg是HBV复制的标记,而HBeAg是HBV正在复制的标记。4. e抗体(HBeAb):在病毒复制过程中,e抗原暴露诱发机体产生。有肯定爱护作用。HBeAb紧接着HBeAg消逝而出现,表示HBV复制已经削减,传染性降低。HBeAb持续时间不长,
4、几月后渐渐消退。血清中HBeAb的检出意味着病毒复制中止或削减。5. 核心抗体(HBcAh):由病毒C区编码的HBCAg诱导产生,没有爱护作用。由于HbCAg位于病毒内部,一般方法不能检出,在血清中只能检测到HbcAboHbCAb可以作为HBY感染的标记。血清中的检出HBCAb表明病毒正在或曾经进行复制。常说的HBCAb一般是指HBCAb-IgG,是最用的两对半中最先出现的抗体,一般在HBSAg出现后24周出现。当HBSAg消逝,而HBSAb还没有出现时,常只能检出HBCAb,因此临床将此阶段称为窗口期。HBCAb和HBsAb一样也可以持续多年存在。HBCAb-IgM仅出现在急性期,具有鉴别诊
5、断意义。.乙型肝炎病毒DNA聚合酶(DNAP)DNAP位于HBV核心部分,有逆转录酹活性,是HBV复制的干脆指标。.染JG月.I一412345678基因诊断随着分子生物学技主的发展,应用DNA分子杂交和PCR技术可以检测出血清、体液和组织中HBVDNA的存在状况,是干脆、精确的病原学诊断证据。运用PCR及定量PCR技术检测HBVDNA,是乙肝诊断的重大进步。1.HBVDNA检测或定量检测(病毒载量):(1)灵敏度提高:WANG等对206名HBSAg阴性、A1.T阴性的健康供血者用PCR方法检测HBVDNA,检出阳性9例,占饯。这说明HBsAg虽然是HBV的感染的标记,但由于S基因的变异或低水平
6、表达,而常规方法难以检出,会导致漏检。而运用PCR能较好的弥补。(2)与HBVM结合运用,可以对临床供应更为有效、更有价值的信息:基因学诊断与HBVM并不是冲突的,各有优势,在乙肝的诊治过程结合运用更具临床价值。如:临床有资料显示,对于HBvDNA阳性、HBeAg阳性的慢性乙肝病人病情较HBvDNA阳性、HbCAb阴性的病人重,自然缓解率也较低。(3)动态监测病毒的载量是疗效监测的重要指标:乙肝疗效监测以前用的是指标血清学“两对半”检测,但由于血清学指标反应相对滞后、灵敏度较差,并不是志向的疗效监测指标。近年随着定量PCR在临床上的应用,连续监测HBVDNA血清载量已经成为疗效监测的志向指标。临床上一般认为用药后HBVDNA下降到10.5拷贝/m1.以下为对药物完全应答;定量下降大于2个数量级为对药物部分应答;未达上述标准为无应答。常见的两对半结果HBsAgHBsAbI1.BeAgHBeAbHBcAb病程未感染+感染早期+感染初期+急性或慢性乙型肝炎,高传染性+一+急性、慢性乙型肝炎或HbsAg携带者+急性乙肝趋向复原或慢性乙肝,弱传染性+急性HBV感染“核心窗口期”或既往曾感染过乙肝,有流行病学意义一一一+乙肝复原期,弱传染性+急性乙肝康复期,起先产生免疫力+疫苗接种后或HBV感染后康复+急性HBV感染康复期或有既往感染史,目前保持免疫力