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1、【作者简介I肖香兰(1964-.女.主管枪转技师.主要从事理化检验探讨。【化学测定方法】保健食品中总黄酮的测定方法肖香兰.罗仁才.张楠(北京市疾病预防限制中心养分与食品卫生所.北京100o1.3摘要I目的:建立以石油酸作为洗脱剂测定保健食品中总黄阴的方法。方法：样品经甲薛提取.用聚戢胺粉吸附,经石油酸洗脱杂质后,在波长36Onm处,用分光光度法测定保健食品中总黄酮的含量。结果:采纳石油醐作为洗脱剂,总黄酮浓度的含量在02010gm1.范围内与吸光度值呈良好的线性关系(r=019998.方法的检出限为215go测定样品的相对标准偏差在4160%6149%之间.回收率在86167%IOI150%之
2、间。与用苯作为洗脱剂方法测定结果比较.两者无显著性差异。结论:该方法操作简便,重现性及稳定性好,线性范围宽,特殊是削减了苯对检测人员和环境的污染,可用于保健食品中总黄酮的测定。1关键词1保受食品;总黄酮;I检聆【中图分类号1R55I5I文献标识码】A文章编号11004-8685(2(X)706-1037-02Deterininationoftota1f1.avonoidsinheaIthRXK1.XiaoXiang21.an.1.uoRen2cai.ZhangNan(BeijingCenterforDiseaseContro1.andPrevention.Beijing1(XX)13.Chin
3、a(Abstract)Objective:Toestab1.ishamethodfordeterminingf1.avonoidsinhea1.thfoodIMCthOds:ThCtota1.f1.avonoidsinhea1.thfxx1.weredetermincdbyspcctrophotomctaftertheSampIcsweredisti1.1.edbymethano1.andpurifiedbypctro1.cumCthcrIThcdetec2tionwave1.engthwas360nm1.Resu1.1.s:DaIUbetweentheI1.avonoidscontentan
4、dabsorbanhadabetter1.inearre1.aionshipintherangeoft)-2010gm1.(r019998IThedeterminationIiinitsWere215gIThere1.ativestandarddeviationswerebetween4160%*6149%ITherecoverieswereinthe11ngcof86167%*101.150%IPurifiedbypeero!cmetherinsteadofbcnzcncjhcresu1.tshadnoobviOUSdifferenceIConcIusion:Thcmethodissiin1
5、.eviab1.eandaccura1.e,aru1.ithasbeenapp1.iedsuccessfu1.1.yIodeterininef1.avonoidsinhea1.thtb1.1.(KeywordsFIea1.thfood:TOta1.I1.avonoidsitdetection黄的类化合物也称类黄酮.是广泛存在于植物界的一大类多酚化合物.多以贰类形式存在.也有一类以游离形式存在。黄酮类化合物泛指两个苯环通过中心三碳链相互连接而形成的一系列化合物,母体结构为二苯基色聚。很多黄酮类化合物都有重要的生物活性,如抗氧化、抗肿痛、爱护心血管、抗突变等功能，类黄酮以其独有的特性日益成为全世界
6、探讨的热点,在医学、食品、保健食品等领域得到广泛的应用.目前保健食品中总黄酮的测定通常方法有硝酸铝比色法和干脆紫外测定法.在保健食品检验与评价技术规范中.采纳的是干脆紫外测定法.在测定中需以苯洗脱杂质,但是,苯的毒性很强且用量大,对环境极易造成污染,并对试睑者造成损害，因此本文用石油酸替代苯.试蛤结果满足。I材料与方法H1.仪器与设备7220型分光光度计,恒温水浴箱,25mI具塞比色管.遮纸,漏斗,分析天平(万分之一。112试剂1121!甲静分析纯.11212石油酸沸程30C60C.11213总黄酮(以芦丁计标准溶液称取芦丁OIOI(M*加甲醇溶解并定容至100m1.即得0!IOingZinI
7、。113测定方法1131!标准曲线吸取芦丁标准溶液：01（X）、0105、OI1.0、0120、（）140、110、1150、2100m1.于IOmI比色管中.加甲醇至刻度.摇匀.于波长360nm比色.求回来方程.计算试样中总黄酮含量。11312样品处理。33样品测定称取适量试样,加乙曲定容至251Om1.,摇匀.80C水浴提取23h,放冷.重新定容,吸取上清液IIOmI于蒸发皿中,加聚酰胺粉吸附,于水浴上挥去乙静.转入层析柱.先用201Om1.石油酸洗脱.然后用甲爵洗脱黄菊.定容至25mI0此液于波长36Onm测定汲取值。2结果与探讨211波长选择黄酮类化合物是母体结构为二苯基色酮的一类化合
8、物的（下转第1142页和小批量样品的测定。其原理:样品的BPo经乙醴提取浓缩后,被K1.还原成米甲酸,在气相色谱上分别测定,与标准品比较定量。气相色谱仪附F1.D检测器.色谱柱为玻璃柱2m3312mm内装60-80目ChromS。巾WAWDMCS涂以5%+11%DEGS+磷酸。方法的检出限为05mgkg0方法的精确度和精密度为:过氧化苯甲酰浓度在0102012gkg范围内,回收率为8318%94IO%.RSD为315%511%。线性范围在每毫升含有过氧化苯甲酸2（200g03建议鉴于从1999年2OO2年6月.3年半时间内各地及国家质检总局检测BPO运用状况.建议：(1禁止添加过氧化米甲酰于面
9、粉中.因为0106gkg限量对面粉增白效果不志向。(2如不能禁止运用,则应对小面粉加工厂实行严管措施,实施卫生许可制度,对不具备有添加设备的小企业不允许向小麦中添加过氧化苯甲酰,对具有添加设备的企业.要求有专人负责,并增加对产品的检测频次,以确保添加量限制在国家标准限量之内。(3建议企业运用过赳化苯甲酰替代品.如运用生物酶与乳化剂结合而增白等。(4加强市场监督管理力度。(5加大宣扬力度.暴光有问题的面粉.使老百姓在政府的指导下.选购合格面粉.将不合格面粉从市场淘汰出局。参考文献I(HGB276O-I996I食品添加剂运用卫生标准S1FAomyo食品卫生标准法典M1第1版I北京:中国轻工业出版社
10、,199311801【31郭万春,陆守政I市售面粉中过氧化苯甲嵌漆加和残留量的检测与分析IJ1.1.中国公共卫生,1999,15(6:51914王燕I面粉中过氧化苯甲嵌含量的检测报告IJI1.中国公共卫生，2000,16(2:1121【51丁鸿简,李林.杨其富I高效液相色谱测定面粉中面粉中过氧化苯甲川中国公共卫生,2001.17(11:104716OrfiCiaIMeuIodSofAssociationofofficia1.Cheinists14thED.AQAC.VA.19S4;Sec14:03X17王萌国IHP1.C测定过氧化苯甲酰J1.环境与健康杂志.199916(1:9818刘仁凤.易
11、小军,祁世凯.等1面粉中过氧化苯甲酰含量检测与分析叩中国公共卫生.2(X)1.17(增刊:12()1(收稿日期20070205(上接第1037页总称,包括:黄丽、黄雨旭、脱氢黄般、异黄酮和查耳酮等.这一类化合物有两个紫外汲取区,即240-28Onm和300-400nm,本方法测定的是在300-400nm有汲取的黄酮,某些在该波长无汲取的黄酮成分不包括在内,如异黄酮。212溶剂选择包括贰和It原形式的黄酮化合物都有较强的极性,易溶于甲醇、乙醇等溶剂。运用乙的作为提取液在80C水浴提取2h可提取完全。213精确度试胎采纳不同种类的样品.进行了凹凸两浓度的加标试骐,3种不同样品凹凸两浓度的平均回收率
12、分别为：93160%、97147%和96176%.见表Io表I精确度试验结果(n=6样品加标量(mg测定结果(mg回收范围(%平均回收率(%214精密度试验对不同种类的样品.分别测定6次淇RSD分别为5127%、6149%、4160%.见表215线性范围在本试睑条件下,黄阴浓度在0-20gm1的范围内,线性关系良好,r=O199980表2精密度试验结果6=6样品测定结果(mgg平均结果(mggRSD216与保健食品检蕤与评价技术规范所载方法的比较采纳5种不同的样品.分别用保健食品检验与评价技术规范所载方法和本法进行测定.结果表明.两种测定方法测定结果无显著性差异.见表3。表3两种测定方法的t检睑结果均无显著性差异3小结该方法操作简便,重现性及稳定性好,线性范围宽,削减了苯对检测人员和环境的污染,测定结果与保健食品检验与评价技术规范所载方法无显著性差异,可用于保健食品中总黄琳的测定。【参考文献I吴坤.孙秀发1养分与食品卫生学Mi1.北京:人民卫生出版社.1981192-9312保健食品检验与评价技术规范S12(X)31（收稿日期:2007-01/9
