他克林对急性胰腺炎大鼠血清细胞因子的影响研究.docx

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1、他克林对急性胰腺炎大鼠血清细胞因子的影响探讨他克林对急性胰腺炎大鼠血清细胞因子的影响探讨作者:汪建初,浦涧,潘小炎,韦忠恒,陆涛,马燕飞,韦邦宁,马日海【摘要】目的探讨静脉注射他克林对急性胰腺炎大鼠细胞因广的影响。方法健康Wistar大鼠108只,随机分为假手术组、比照组、他克林组各36只,分别测定三组动物模型建立胜利后1h、12h、24h、36h、48h、72h血清中TNF、I1.6、I1.10的含量改变。结果假手术组各细胞因子均处于较低水平,比照组较假手术组各个时段细胞因子水平都明显上升(PV0.05),而他克林组大鼠细胞因子NF、I1.6在1.h、12h、24h、36h、48h、72h时

2、也明显较假手术组上升(PV0.05),但是其上升幅度与比照组相比明显降低(PV005)o他克林组爱护性细胞因子I1.10在发病初1小时有上升,与比照组相比P=0933;而在1272h,I1.10上升明显,并逐步达到肯定高度,与比照组相比有显著性差异(PV0.05)o结论静脉注射他克林能够降低胰腺炎大鼠血清损伤性细胞因子TNF、I1.6的释放,上升爱护性细胞因子I1.10水平。【关键词】胆碱能抗炎通路细胞因子急性胰腺炎AbstractObjectiveToinvestigatehowthecho1.inergicantiinf1.ammatorypathwayInf1.uncingthecyto

3、kine1.eve1.in1.aboratoryratswithpancreatitis.Methods108Wistarratswererandom1.ydividedintoshamgroup(SG),contro1.group(CG)andtacrineinjectiongroup(TG),serumcytokinescontentvariationofTNF,I1.6,I1.10indifferentperiodweredetermined.Resu1.tsSerumconcentrateofcytokinesinSGkeepa1.ow1.eve1.,butwhatinCGwerehi

4、gherthanthatinSG,whichisSignifficantstatistica1.1.y(P0.05).TheconcentrateofTNF,I1.6inTGwerehigherthanthatinSG,ineachperiod(P0.05).Butmuch1.owerthanthatinCG(P0.05).Serum1.eve1.ofI1.10inTGstartrisingin1hour,butithasnoSignifficancecomparingtocontro1.group(P=0.933).t1272h,theI1.101.eve1.risedtoahigh1.ev

5、e1.inTG,whichwashigherthaninCG(P0.05).Conc1.usionTacrineintravenousinjectioncou1.dincreasedserumprotectivecytokineI1.101.eve1.,butdecreasedinjurycytokinesTNF,I1.6contentin1.aboratoryratswithpancreatitis.Keywordscho1.ingericantiinf1.ammatorypathway;cytokine:acutepancreatitis细胞因子在重症急性胰腺炎(SAP)发病中起着重要的作

6、用,抗细胞因子是治疗SAP一个重要的方向。新近探讨发觉,神经系统和免疫系统之间存在着肯定的关系,即胆碱能抗炎系统,神经系统通过胆碱能系统对机体的炎症反应起着调控作用。本探讨通过制作急性胰腺炎动物模型,静脉注射胆碱酯酶抑制剂他克林(tacrine),从而视察兴奋胆碱能通路对急性胰腺炎大鼠血清中细胞因子水平影响。材料和方法1.试验分组Wistar大鼠108只,由右江民族医学院动物中心供应,重300-350g,依据试验方法分为假手术组、比照组、他克林组各36只。假手术组行开腹能内静脉插管术,比照组制作胰腺炎动物模型并行骼内静脉插管,他克林组行胰腺炎模型制作及骼内静脉分别插管并经骼内静脉注射他克林(1

7、.5mgkg-1次-1,每6小时注射一次)。2 .试剂和议器大鼠TNF、I1.6、I1.10除联免疫吸附试剂盒由深圳精致公司供应:牛黄胆酸钠由美国SIGMA公司供应:配超低温冰箱等。3 .模型制作胰腺炎模型:术前禁食12小时,自由饮水,用氯氨酮腹腔注射麻醉(100mgkg)胜利后,剪去腹部毛发,消毒,铺无菌巾。经上腹部正中切口进入腹腔,提起胃、十二指肠,显露出胰腺,确认胆胰管,在其近端和远端均以动脉夹或一号丝线短暂结扎,将带有四号针头的1m1.注射器沿十二指肠壁浆肌层穿刺距离胆胰管开口0.30.4cm处的胆管,注入4%的硫磺胆酸钠0.1m1./100g,以0.2m1./min的速度注射毕,停留

8、4分钟,去除结扎线,指压穿刺点,荏无漏胆,逐层关腹。4 .细胞因子测定分别在模型制作完成后1h、12h、24h、36h、48h、72h取各组大鼠酩内静脉血,取上清液离心15分钟后用酶联免疫吸附法测定血清中TNF、I1.6、I1.10含量。5 .统计学分析全部数据均以-S表示,采纳SPSS13.0统计软件包,作重且测量方差分析。结果假手术组各细胞因子均处于较低水平,比照组较假手术组各个时段细胞因子水平都明显上升,TNF和I1.6水平在48h时达到高峰,72h时均有所降低,而爱护性细胞因子I1.10呈逐步增高走势,在4872小时时仍旧维持在较高水平。他克林组大鼠,细胞因子TNF,I1.6在1.h、

9、12h、24h、36h、48h、72h时明显较假手术组上升(PV0.05),但是其上升幅度与比照组相比较明显降低,具有统计学意义(P0.05)他克林组爱护性细胞因子I1.10在发病初1小时有上升,但是与比照组相比,没有统计学意义(P=0933):而在12-72h,I1.10上升明显,并逐步达到肯定高度,与比照组相比,其上升具有统计学意义(PV005)见表Io表1各组各时段细胞因子浓度改变状况(略)注:S假手术组;C比照组;N他克林组。与S组比较,XPVO.05,与C组比较,ZPV0.05探讨重症急性胰腺炎(SAP)是临床上常见的急症,病情凶险,虽经多年努力,至今仍有高达20%30%的病死率,是

10、临床上最麻烦急症之一。为了寻求治疗SAP的有效方法,多年来医学界学者在这一领域已经进行了大量的探讨和探究,包括运用特异性的细胞因子拮抗剂和通过血液净化清除过多细胞因子即抗细胞因子治疗,目前已经找到很多细胞因子的特异性抑制物,包括细胞因子的可溶性受体、受体拮抗剂,各种细胞因子特异性抗体和其他一些药物,在试验探讨中他们也的确能有效降低某种细胞因子的水平,减轻患者的症状和胰腺损伤,但单一的抗细胞因子治疗对于SAP的疗效并不准确,对于试验动物模型生存率的改善仍存在争议。现代临床对于SAP的治疗仍旧处于被动地位,解决SAp的关键,就是调整炎症反应平衡。胆碱能抗炎通路是通过削减损害性细胞因子的释放而起作用

11、的。目前国内外尚无胆碱能抗炎通路在急性胰腺炎治疗作用方面的报告。本探讨旨在通过胆碱能抗炎通路在急性胰腺炎大鼠治疗作用探讨,寻求一种治疗急性胰腺炎有效手段。他克林是胆碱酯海抑制剂,静脉应用可以提高胆碱能神经的功能。本探讨通过静脉注射他克林实现胆碱能抗炎通路在急性胰腺炎中的抗炎作用探讨。探讨发觉比照组各个时段细胞因子水平都明显上升,TNF和I1.6水平在48h时达到高峰,72h时均有所降低,而爱护性细胞因子I1.10呈逐步增高走势,在48-72h时仍旧维持在较高水平。而静脉注射他克林组动物,细胞因子TNF,I1.6在1Ik12h、24h、36h、48h、72h时也明显较假手术组上升,但是其上升幅度

12、与比照组相比明显降低(P0.05)。他克林组爱护性细胞因子I1.10在发病初1h有上升(P=0.933)。而在12-72h,I1.10上升明显(P0.05),并逐步达到肯定高度。本探讨证明,静脉注射他克林在大鼠试验性急性胰腺炎中,可以有效降低TNF及I1.6等细胞因子的上升幅度,从而减轻细胞因子对机体的损害:爱护性细胞因子I1.10在应用他克林后,水平较比照组明显上升。他克林是乙酰胆碱酯酶抑制剂,可抑制乙酰胆碱水解,提高脑胆碱能神经元功能。电刺激迷走神经或应用胆碱脂酶抑制药物或乙酰胆碱受体激烈剂,可以抑制巨嗜细胞合成TNF,还有核转录因子NFb这些炎症始动因子得到抑制,SP细胞因子瀑布样连锁反

13、应必定减轻或消逝。本探讨通过静脉注射胆碱酯酶抑制剂他克林,发觉能够有效的降低胰腺炎大鼠发病初期各损害性细胞因子浓度,上升爱护性细胞因子I1.10。本探讨首次将胆碱能抗炎通路引进急性胰腺炎的治疗,为急性胰腺炎这一主要由细胞因子介导的全身性疾病的治疗供成了新的途径。应用胆碱能抑制剂可以增加胆碱能神经元功能,在SAP初期能阻断细胞因子的瀑布链样反应,后续的细胞因子将预期减弱,爱护性细胞因子I1.10水平上升,从而削减细胞因子对全身其他器官系统的损伤作用。【参考文献】1AnderssonJ.Theinf1.ammatoryref1.ex-introductionJ.JInternMed,2005,257(2):122125.2WangH,1.iaoH,OchaniM,eta1.Cho1.inergicagonistsinhibitHMGB1.re1.easeandimprovesurviva1.inexperimenta1.sepsisJ.NatMed,2004,10(11):1216-1221.3CzuraCJ,FriedmanSG,TraceyKJ,eta1.Neura1.inhibitionofinf1.ammation:thecho1.inergicanti-inf1.ammatorypathwayJ.JEndotoxinRes,2003,9(6):409-413.

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