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1、流式细胞术 细胞染色，制备单细胞悬液 上机获取数据 数据分析PMTPMTPMTPMT 4DichroicFiltersBandpassFilters流式细胞检测原理流式细胞检测原理Laser 1234Flow cell流式数据表现形式流式数据表现形式FS:细胞大小SS:胞内颗粒性流式血液肿瘤数据分析步骤 1 、寻找异常细胞 2、 定义异常细胞 -异常细胞是什么细胞？ -异常细胞的量有多少？ 3、结论如何寻找异常细胞?正常细胞群的分布正常细胞群的分布粒细胞粒细胞单核细胞单核细胞淋巴细胞淋巴细胞CD45:白细胞共同抗原，表达于所有白细胞异常细胞群异常细胞群异常细胞群异常细胞群异常细胞的量如何计算?
2、 流式如何定义细胞? -以白血病细胞表达的抗原标志作为依据粒细胞成熟过程粒细胞成熟过程阶段表达不表达I原粒CD45+CD34+CD117+DR+CD13+CD33+CD15,CD11b,CD16, CD10II早幼粒CD45+CD117+CD13+CD33+CD15+CD34, HLA-DR, CD11b,CD16 III中幼粒CD45+CD13+CD33+CD15+CD11b+CD34, CD117, DR, CD16IV晚幼粒CD45+CD13+CD33+CD15+CD11b+CD16+CD34, CD117, DR, CD10V成熟粒CD45+CD13+CD33+CD15+CD11b+C
3、D16+CD10+CD34, CD117,DR不同阶段粒细胞不同阶段粒细胞CDCD分子的表达情况分子的表达情况单核细胞的成熟过程单核细胞的成熟过程不同阶段单核细胞不同阶段单核细胞CD分子的表达情况分子的表达情况阶段表达 不表达I原单CD45+CD34+CD117+DR+CD13+CD33+CD11b, CD14,CD15II幼单CD45+DR+CD34+/CD117+/-CD13+CD33+CD11b+CD15+CD34, CD117, CD14III成熟单CD45+ DR+CD13+CD33+CD11b+CD15+CD14+CD34,CD117红系的成熟过程红系的成熟过程阶段表达不表达I原红
4、CD45+CD71+CD117+Glycophorin A (CD235a)II有核红CD71+Glycophorin+CD45III成熟红Glycophorin+CD45, CD71B B淋巴细胞成熟过程淋巴细胞成熟过程T T淋巴细胞的成熟过程淋巴细胞的成熟过程 其他血液系统肿瘤的特异性标志其他血液系统肿瘤的特异性标志 毛细胞性白血病：毛细胞性白血病：CD19+CD19+，CD103+CD103+， CD11c/CD22CD11c/CD22双阳性高表达双阳性高表达 CLLCLL：CD19+/CD5+CD19+/CD5+ CMML CMML：CD14+/CD68+/CD13+CD33+/CD1
5、4+/CD68+/CD13+CD33+/高高SSCSSC MM MM：CD19+CD19+，CD38+CD38+ 流式报告单的结论如何得出?病例分析病例一异常细胞异常细胞髓系？淋系？髓系？淋系？流式细胞术检测结果表明骨髓细胞中髓系母细胞（流式细胞术检测结果表明骨髓细胞中髓系母细胞（CD34+CD34+或或/ /和和CD117+CD117+）约）约占骨髓细胞总数占骨髓细胞总数32%32%；同时伴有单核细胞系列分化倾向的细胞约占骨髓细胞；同时伴有单核细胞系列分化倾向的细胞约占骨髓细胞总数约总数约70%70%。结果符合急性髓性白血病伴单核细胞系列分化（。结果符合急性髓性白血病伴单核细胞系列分化（AM
6、L-M5AML-M5）。）。因为原始单核细胞幼稚单核细胞大于等于因为原始单核细胞幼稚单核细胞大于等于8080为为M5a,xM5a,x小于小于8080为为M5bM5b，在分界线上，所以不区分，在分界线上，所以不区分a,b.a,b.治疗方法类似。治疗方法类似。淋巴细胞-4.2 T细胞占淋巴细胞44.9%，CD4:CD8=0.66，未见明显异常；NK细胞占淋巴细胞3.9%，未见明显异常；成熟B细胞占淋巴细胞40.7%，为多克隆B细胞,未见明显异常。粒细胞-22.7 相对比例未见明显减少。免疫表型提示粒细胞发育成熟标记物表达紊乱。单核细胞-37.7 相对比例明显增多，其中约70%为成熟单核细胞，免疫表
7、型为CD14+,CD64+,CD11b+, CD13+,CD33+,HLA-DR+和CD4+。CD45 Dim-33.0 相对比例明显增多，为髓性原始/幼稚细胞,免疫表型为CD34+，CD117+，CD13+,CD33+和HLA-DR+。非白细胞-0.2 未见明显异常。病例二淋巴细胞-41.5 T细胞占淋巴细胞70.9%，CD4:CD8=1.42，未见明显异常；NK细胞占淋巴细胞4.7%，未见明显异常；成熟B细胞占淋巴细胞17.6%，为多克隆B细胞,未见明显异常。粒细胞-10.9 其相对比例明显减低，免疫表型未见明显异常。单核细胞-4.9 未见明显异常。CD45 Dim-36.1 主要为原始/幼稚B淋巴细胞，其免疫表型为CD34-、CD117-、CD19+、HLA-DR+和CD10+。非白细胞-6.1 主要为细胞碎片。流式细胞术检测表明结果原始流式细胞术检测表明结果原始/ /幼稚幼稚B B淋巴细胞约占骨髓细胞白细胞总数淋巴细胞约占骨髓细胞白细胞总数30%30%， 其免疫表型为其免疫表型为CD34-CD34-、CD117-CD117-、CD19+CD19+、HLA-DR+HLA-DR+和和CD10+CD10+，提示为前，提示为前B B淋巴细淋巴细胞。结果符合急性胞。结果符合急性B B淋巴细胞白血病（淋巴细胞白血病（B-ALLB-ALL）。）。
