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1、ICS11.040.01CCSN54团 体标 准T/CRHA XXX-XXXX胶乳免疫比浊技术实验室测定标准1.aboratorymeasurementstandardoflateximmunoturbidimetricassay（征求意见稿）202X-XX-XX 实施202X-XX-XX发布中国研究型医院学会发布目次1范围22规范性引用文件23术语和定义23.1 胶乳免疫比浊技术23.2 空白限23.3 检出限24原料及原料性能评价方法34.1 胶乳颗粒34.2 交联蛋白35试剂性能要求45.1外观45.2装量45.3 空白吸光度45.4 分析灵敏度（空白限、检出限、定量限）45.5 线性范
2、围45.6 可报告范围55.7 重复性55. 8批间差55.9正确度55.10稳定性55.11 抗干扰能力55.12 钩状效应66检测66.1检验项目及试验方法66.2试剂放行检测87质量保证98标识、标签和使用说明书108.1 试剂（盒）外包装标识、标签108.2 试剂（盒）内包装标识、标签108.3 试剂（盒）使用说明书109包装、运输和贮存119.1 包装119.2 运输119.3 3贮存11参考文献12本标准根据GB/T1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容有可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由中国研究型医院学会临床数据与样本资源库专业委员会提
3、出。本文件由中国研究型医院学会归口。本标准起草单位：中国人民解放军总医院、中国医学科学院北京协和医院、北京大学第三医院、中山大学孙逸仙纪念医院、武汉大学中南医院、中国医科大学附属第一医院、北京大学第一医院、佛山市南海区人民医院、北京大学深圳医院、福建医科大学附属第一医院、北京怀柔医院、中南大学湘雅医院、潍坊医学院附属医院、北京九强生物技术股份有限公司本标准主要起草人：田亚平、张春燕、邱玲、禹松林、崔丽艳、吴永华、段朝晖、范俊丽、李花、李一荣、屈晨雪、蔡甜、夏勇、杨滨、杨曦、易斌、张维清、张旭光、张玺玉引言伴随着仪器、原料及生产技术的进步，基于胶乳免疫比浊法的检测试剂盒已经被越来越多的国内外厂家
4、重视，带动了产品的研发和生产热潮。为了把关试剂盒的临床性能、分析性能和经济性能等各方面可满足临床实验室的使用需求，同时使试剂盒的生产更标准化和规范化，特制定胶乳免疫比浊技术实验室测定团体标准，供厂家和医学实验室参考。胶乳免疫比浊技术实验室测定标准1范围本标准规定了应用胶乳免疫比浊技术进行测定的试剂盒的术语和定义、原料及原料性能评价方法、试剂性能要求、试验方法、试剂盒标识、标签和使用说明书、包装、运输和贮存等。本标准适用于基于胶乳免疫比浊技术进行研发、生产和定量检测的试剂盒(以下简称：试剂盒)，包括在半自动、全自动生化分析仪、免疫分析仪上使用的试剂盒。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规
5、范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GBfT29791.2体外诊断医疗器械制造商提供的信息(标示)第2部分：专业用体外诊断试剂WS/T420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证(Verificationofanalyticalperformanceofquantitativekitsbyclinicallaboratory)WS/T492-2016临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证(VerifiCatiOnofperformanceforprecisio
6、nandtruenessofquantitativemeasurementsinclinicallaboratories)CNAS-GL037:2019临床化学定量检验程序性能验证指南(GUidanCeontheverificationofquantitativemeasurementproceduresusedintheclinicalchemistry)3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1胶乳免疫比浊技术IateXimmunoturbidimetricassay胶乳免疫比浊技术是免疫比浊法的一种。该方法将抗体包被在粒径适中的胶乳微球表面形成复合物，与待测物质结合后发生凝集现象，
7、在可见光的范围内，光线可以通过胶乳颗粒被仪器检测到，且检测到的光线强度越强，待测物质的含量越高。胶乳免疫比浊技术取消了反复孵育和洗涤的过程，操作简便，检测时间短，可在短时间内进行批量检测，适用于各种主流生化平台，无需特殊设备即可进行，各层级医院均可开展，成本较低。4. 2空白限Limitofblank;LoB一定概率下，由给定测量程序测量空白样本可能得到的最高测量结果。5. 3检出限Limitofdetection;LoD一定概率下，由给定测量程序测量样本中待测物质的最小浓度或最小量。6. 4定量限Limitofquantitation;LoQ是指给定测量程序定量检测样本中待测物质的最低量，测
8、定结果应具有一定准确度。7. 5分析证书CertificateofAnalysis;COA质量检测报告COA是产品出售前的质量检查，是鉴定产品质量达标的书面证明。COA文件是经过对产品、设备的质量检验得出，是保障产品质量体系的标准。4原料及原料性能评价方法7.1 胶乳颗粒7.1.1 直径采用动态光散射(DynamiCLightScattering,DLS)法，使用标准激光粒度仪，遵循仪器操作规程对胶乳颗粒进行测量，判定其直径是否在原料厂家COA声称的范围内。8. 1.2表面电荷密度采用电导滴定方法，使用标准电位滴定仪器，遵循仪器操作规程对胶乳颗粒进行测量，判定其表面电荷密度是否在原料厂家COA
9、声称的范围内。9. 1.3分散性采用目测外观的方法，使用移液器吸取一滴胶乳颗粒到凝集板上，旋转摇晃凝集板，观察是否有凝集颗粒，如果存在凝集颗粒，可以判定原料分散性不合格。10. 1.4固体含量采用干燥失重的方法，滴加ImL胶乳颗粒到玻璃培养皿上，使用分析天平测量干燥前后的胶乳颗粒重量，使用公式“干燥后重量/干燥前重量*100%”计算固体含量，判定是否在原料厂家COA声称的范围内。11. 1.5微生物含量量取定量胶乳颗粒,平铺于琼脂培养基上进行微生物培养,一定时间后统计培养皿中产生的菌落数,判定微生物含量是否在原料厂家COA声称的范围内。4.1.6 酸碱度量取定量胶乳颗粒，使用校正后的PH计测量
10、，判定酸碱度是否在原料厂家COA声称的范围内。4.1.7 空白吸光度根据不同检测项目的要求，量取定量胶乳颗粒使用去离子水稀释到一定浓度，使用分光光度计，设定570-80Onm范围内的波长范围检测稀释后的胶乳颗粒溶液吸光度，判定是否在原料厂家COA声称的范围内。4.2交联蛋白4. 2.1外观采用目测外观的方法，液体交联蛋白应为澄清透明的液体，不含异物、浑浊或摇不散的沉淀；干粉交联蛋白应为白色粉末，不含有其他颜色的杂质。5. 2.2蛋白含量采用二辛可酸(bicinchoninicacid,BCA)方法检测蛋白含量，判定是否在原料厂家COA声称的范围内。6. 2.3蛋白纯度采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰
11、胺凝胶电泳（Sodiumdodecylsulfate-polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE）方法检测蛋白纯度，判定是否在原料厂家CoA声称的范围内。7. 2.4亲和力采用竞争醐联免疫吸附测定（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）或表面等离子互作方法测量蛋白的亲和力，判定是否在原料厂家CoA声称的范围内。8. 2.5特异性采用蛋白质印迹法（WeStern-Blot,WB）测量蛋白的特异性，判定是否在原料厂家COA声称的范围内。9. 2.6功能性实验（小试）根据每个检测项目的配制工艺，将蛋白交联到胶乳颗粒上，配制
12、少量胶乳试剂，检测加速稳定性、灵敏度、特异性等性能，判定是否符合产品性能要求。5试剂性能要求9.1 外观应根据产品的包装特点规定适当的外观要求，一般应有试剂盒各组分组成、性状，内、外包装、标签等的要求。a）试剂盒组分应齐全，内外包装应完整，标签清晰；b）液体试剂无渗漏，无肉眼可见颗粒、无沉淀。9.2 装量液体试剂的装量应不少于标示值。9.3 空白吸光度应规定试剂盒空白吸光度（八）的要求。测试血清/血浆/尿液/脑脊液样本试剂：试剂空白A应符合生厂商给定的范围。9.4 分析灵敏度（空白限、检出限、定量限）测试血清/血浆/尿液/脑脊液样本试剂：生厂商应给定试剂空白限/检出限/定量限的范围。9.5 线
13、性范围测试血清/血浆/尿液/脑脊液样本试剂：生厂商应分别规定不同样本类型试剂线性范围。a）线性区间内，线性相关系数|川应不小于0.990；b）应规定线性区间内的线性偏差，可以根据实际情况，在线性区间的不同分段以相对偏差或绝对偏差表达。9.6 可报告范围测试血清/血浆/尿液/脑脊液样本试剂：生厂商应分别规定不同样本类型试剂可报告范围。a）可报告低限（定量下限）：对于低值样本，重复测试的变异系数（CV）W方法性能标示的总误差或不确定度。b）可报告高限（定量上限X样本最大稀释倍数）：对于高值样本，还原浓度与理论浓度的偏差（）W方法预期偏倚值。9.7 重复性应至少规定两个浓度控制物质重复测试的变异系数
14、（CV）。测试血清/血浆/尿液/脑脊液样本试剂：用同一批次生产的试剂重复测定同一控制物质，其CV应W生厂商宣称。控制物质的浓度选择可参考医学决定水平，代表正常值和异常值水平。9.8 批间差应规定不同批号的试剂（盒）测试相同控制物质的差异，所得结果以批间相对极差（R）表示，其R应W生厂商宣称。9.9 正确度测试血清/血浆/尿液/脑脊液样本试剂，建议按如下优先顺序，采用下列方法之一测试试剂（盒）的准确度：a）相对偏差：生产商应规定相对偏差范围，其相对偏差应W生厂商宣称。b）比对试验：在线性区间范围内，待测系统与比对系统相关系数I应不小于0.975（或产应不小于0.95）：生产商应规定每个医学决定水
15、平或参考区间限值的绝对偏差和相对偏差范围，其绝对偏差和相对偏差应W生厂商宣称。c）回收试验：生产商应规定回收率范围，其回收率应在生产商宣称范围内。9.10 稳定性在保证效期内产品性能符合要求的情况下，可根据产品特性选用以下方法的任意组合进行验证。a）效期稳定性：生产商应规定产品的有效期。在生产商规定的储存条件下，取近效期或过效期的样品检测5.1,5.35.9,结果应符合相应要求。b）热稳定性试验：在制造商规定的热稳定性试验条件下，检测5.1,5.3-5.9,结果应符合相应要求。注1：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。注2：一般地，效期为1年时选择不超过1个月的产品，效期为半年时选择不超过半个月的产品，以此类推。如超过规定时间，但产品符合要求时也可以接受。注3：根据产品特性可选择a）,b）方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产品性能符合标准要求。9.11 抗干扰能力测试血清/血浆样本试剂，生产商应说
