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1、2基基 本本 操操 作作 训训 练练（一）实验要求（一）实验要求 1 1、实验课重要性及要求：、实验课重要性及要求：掌握基本技能，验证药理学中重要的基本理掌握基本技能，验证药理学中重要的基本理论、基本知识。论、基本知识。培养严谨的态度、严密的工作方法和实事求培养严谨的态度、严密的工作方法和实事求是的工作作风；是的工作作风；培养对事物观察、比较、分析的能力和综合培养对事物观察、比较、分析的能力和综合解决实际问题的能力；解决实际问题的能力；培养创新意识。培养创新意识。3 2 2、实验过程具体要求：、实验过程具体要求：包括实验前、实验中、实验后。包括实验前、实验中、实验后。3 3、实验报告要求：、实
2、验报告要求：要求：科学性真实记录，不可涂改；要求：科学性真实记录，不可涂改；严密性层次分明严密性层次分明 艺术性字法，句法，章法艺术性字法，句法，章法 内容：实验题目、实验目的、实验方法、内容：实验题目、实验目的、实验方法、实验结果、讨论、结论实验结果、讨论、结论 4（二）基本操作（二）基本操作 小白鼠捉持法、灌胃法、皮下注射法、小白鼠捉持法、灌胃法、皮下注射法、肌肉注射法、腹腔注射法、处死法。肌肉注射法、腹腔注射法、处死法。5药物剂型介绍药物剂型介绍 分为四大类分为四大类 1 1、液体剂型、液体剂型 2 2、软膏剂型、软膏剂型 3 3、固体剂型、固体剂型 4 4、气、气 雾雾 剂剂6 戊巴比
3、妥钠半数有效量的测定戊巴比妥钠半数有效量的测定 操作步骤：操作步骤：1 取鼠取鼠10、分、分5组、称重组、称重 2 分别给药，戊巴比妥钠分别给药，戊巴比妥钠 3 49、39、31、25、20mg/kg 4 记录记录15分钟内入睡鼠数分钟内入睡鼠数 5 实验室同剂量组合并求实验室同剂量组合并求P，计算，计算ED50 6 ED50=lg-1Xm-i(P-0.5)7有关知识：有关知识：测定测定LD50、ED50的意义的意义 粗略估计药物安全性的重要常数粗略估计药物安全性的重要常数 TI=LD50/ED50 安全范围，一般指安全范围，一般指ED95LD5之间的距离，之间的距离，更精确点，指更精确点，指
4、ED99LD1之间的距离之间的距离8 药物血浆半衰期（药物血浆半衰期（t1/2t1/2）的测定）的测定一有关知识一有关知识血浆半衰期（血浆半衰期（t1/2t1/2），血药浓度下降一半所需要的时间），血药浓度下降一半所需要的时间二操作步骤二操作步骤1 1 取兔称重麻醉取兔称重麻醉20%20%乌拉坦乌拉坦5ml/kg5ml/kg（或（或 戊巴比妥钠戊巴比妥钠1.5ml/kg1.5ml/kg）2 2 血液抗凝处理血液抗凝处理0.3%0.3%肝素肝素ml/kgml/kg 3 3 仰位固定，分离颈动脉，扎夹远近心端仰位固定，分离颈动脉，扎夹远近心端4 4 颈动脉插管，取空白动脉血颈动脉插管，取空白动脉血
5、mlml 5 5 注射注射SDSD（1.5ml/kg1.5ml/kg），取，分钟），取，分钟 血血mlml 6 6 严格按严格按P6P6表格操作，计算表格操作，计算t1/2t1/29注意事项：注意事项：1 1勿忘抗凝步骤；勿忘抗凝步骤；2 2给药后均补入给药后均补入0.30.3毫升生理盐水；毫升生理盐水；3 3给药后取血时，先放血约给药后取血时，先放血约0.30.3毫升；毫升；4 4三氯乙酸加入血样后应立即震荡！三氯乙酸加入血样后应立即震荡！5 5SDSD给药液与给药液与SDSD标准液勿混淆；标准液勿混淆；6 6 加样顺序、加样量要正确！加样顺序、加样量要正确！10乙酰胆碱的量效曲线及药物乙酰
6、胆碱的量效曲线及药物pDpD2 2、pApA2 2测定测定一一 有关知识有关知识 pDpD2 2（亲和力指数）：（亲和力指数）：引起引起5050最大效应时，最大效应时，药物摩尔浓度的负对数值。药物摩尔浓度的负对数值。pApA2 2（拮抗参数）：（拮抗参数）：使加倍浓度的激动剂仅引起原浓度使加倍浓度的激动剂仅引起原浓度的效应水平时，拮抗剂摩尔浓度的负对的效应水平时，拮抗剂摩尔浓度的负对数值。数值。11操作步骤：操作步骤：1 取豚鼠处死、剖腹取回肠取豚鼠处死、剖腹取回肠 2 2 清洗分离、剪成清洗分离、剪成1.5cm1.5cm左右长数段左右长数段 3 3 进行计算机进行计算机MedlabMedla
7、b系统参数设置系统参数设置 4 4 取肠段对角结扎，一端挂钩、一端连换能器取肠段对角结扎，一端挂钩、一端连换能器 5 5 平衡平衡1010分钟后，预刺激（分钟后，预刺激（Ach 3x10Ach 3x10-3-3M,0.1ml),M,0.1ml),换液换液3 3次，每次平衡次，每次平衡5 5分钟分钟 6 6 记录正常回肠收缩曲线记录正常回肠收缩曲线 7 7 按表依次加入不同浓度乙酰胆碱液按表依次加入不同浓度乙酰胆碱液 迅速！迅速！8 8 洗肠洗肠3 3次、平衡次、平衡1010分钟，加入阿托品液分钟，加入阿托品液0.30.3毫升毫升 9 9 平衡平衡5 5分钟后按表分钟后按表P9P9重复加入不同浓
8、度乙酰胆碱液重复加入不同浓度乙酰胆碱液10 10 绘制乙酰胆碱量效曲线图绘制乙酰胆碱量效曲线图 PD2=q-lgA;pA2=pAx+lg(x-1)PD2=q-lgA;pA2=pAx+lg(x-1)12注意事项：注意事项：1 1 悬挂肠段不要过度牵拉悬挂肠段不要过度牵拉 （控制在（控制在1 1克左右）；克左右）；2 2 实验开始后不能再改变肠管的负荷！实验开始后不能再改变肠管的负荷！3 3 加药时勿碰连线及管壁；加药时勿碰连线及管壁；4 4 药物剂量加入要注意连续累积性；药物剂量加入要注意连续累积性；5 5 浴管内温度要恒温（低于浴管内温度要恒温（低于3838度）！度）！13 强心苷对离体蟾蜍心
9、脏的作用强心苷对离体蟾蜍心脏的作用 有关知识有关知识:强心苷可强心苷可 1 1 加强心肌收缩性加强心肌收缩性;2 2 减慢窦性频率减慢窦性频率 强心机理强心机理 抑制钠钾抑制钠钾ATPATP酶酶,钠钾交换受抑钠钾交换受抑 钠钙交换增加钠钙交换增加14操作步骤操作步骤:1 1制备蟾心制备蟾心;处死处死,分离心脏分离心脏;穿线二穿线二,插管插管;结扎结扎,取出夹上取出夹上2 2加入任氏液约加入任氏液约1 1 毫升毫升,夹心尖夹心尖,连接连接MedlabMedlab生物信号系统生物信号系统,描记正常曲线描记正常曲线I I3 3换入低钙任氏液约换入低钙任氏液约1 1毫升毫升,描记低钙曲线描记低钙曲线I
10、III4 4滴加夹竹桃滴加夹竹桃3 3滴滴+3+3滴滴,描记强心曲线描记强心曲线IIIIII5 5滴加夹竹桃直至中毒滴加夹竹桃直至中毒,描记中毒曲线描记中毒曲线IVIV6 6 换洗三次换洗三次,观测心脏功能恢复情况及曲线观测心脏功能恢复情况及曲线15 吗啡的镇痛作用吗啡的镇痛作用【有关知识有关知识】吗啡镇痛作用机制吗啡镇痛作用机制 吗啡吗啡 (+)阿片阿片R(、R)镇痛镇痛、致幻、致幻 吗啡成瘾后的戒断症状：吗啡成瘾后的戒断症状：a.兴奋兴奋,失眠失眠,疼痛疼痛,震颤震颤 b.流泪流泪,涕涕,呕呕,泻泻,出汗出汗 c.一种说不出来的难受感觉一种说不出来的难受感觉16【操作步骤操作步骤】1予试验
11、予试验 小鼠小鼠2只，后爪只，后爪SC2福尔马林福尔马林20l,间隔间隔5分钟累积，观察分钟累积，观察30分钟内连续舔足时间分钟内连续舔足时间2正式试验正式试验1生理盐水组生理盐水组 6只小鼠，只小鼠，SC NS(0.1ml/10g),5分钟后：分钟后：后爪后爪SC2福尔马林福尔马林20l,记录记录5分钟内连续舔足时间分钟内连续舔足时间172吗啡组吗啡组 6只小鼠，只小鼠，SC 0.02%盐酸吗啡盐酸吗啡(0.1ml/10g)，5分钟后分钟后 后爪后爪SC2福尔马林福尔马林20l,记录记录5分钟内连续舔足时间分钟内连续舔足时间3吗啡纳洛酮组吗啡纳洛酮组 6只小鼠，只小鼠，IP 0.01%纳洛酮
12、纳洛酮(0.1ml/10g)，5分钟后分钟后,SC 0.02%盐酸吗啡盐酸吗啡(0.1ml/10g)，5分钟后分钟后,后爪后爪SC 2福尔马林福尔马林20l,记录记录5分钟内连续舔足时间分钟内连续舔足时间 18【注意事项注意事项】1 保持安静，以免影响小鼠的痛觉行为；保持安静，以免影响小鼠的痛觉行为；2 注射福尔马林时角度不要太大，进针不要太深；注射福尔马林时角度不要太大，进针不要太深；3 应预先熟悉秒表的使用方法，以免错过记录应预先熟悉秒表的使用方法，以免错过记录 时间。时间。19 利多卡因对氯化钡诱发利多卡因对氯化钡诱发 家兔心律失常的预防作用家兔心律失常的预防作用【有关知识有关知识】利多
13、卡因药理作用利多卡因药理作用 1 降低异位自律性；降低异位自律性；2 影响传导：影响传导：已有阻滞之，致传导已有阻滞之，致传导 抑制钠离子内流抑制钠离子内流 部分除极之，致传导部分除极之，致传导 促进钾离子外流促进钾离子外流20【操作步骤操作步骤】A 1 取甲兔、称重；取甲兔、称重；B 1 取乙兔，同左取乙兔，同左 2 麻醉麻醉(iv2%戊巴比妥钠戊巴比妥钠1.5ml/kg)2 同左同左 3 缓慢缓慢iv2%利多卡因利多卡因0.5ml/kg，5后后 3 iv NS，同左，同左 4 iv0.4%BaCl20.8ml/kg 4 同左同左 5 记录记录01、3、5、10、15、5 同左同左 20、3
14、0心电图心电图 6 统计心律失常出现时间、持续时间统计心律失常出现时间、持续时间 6 同左同左21【注意事项注意事项】1 利多卡因静脉注射速度要慢，以免诱发惊厥利多卡因静脉注射速度要慢，以免诱发惊厥;2 氯化钡静脉注射速度要快；氯化钡静脉注射速度要快；3 每次给药后补入每次给药后补入0.5ml生理盐水生理盐水22 苯巴比妥和苯妥英钠的苯巴比妥和苯妥英钠的 抗电惊厥作用抗电惊厥作用【有关知识有关知识】苯巴比妥苯巴比妥 抑制病灶神经元异常放电及其扩散，主要用于抑制病灶神经元异常放电及其扩散，主要用于 癫痫大发作及其持续状态癫痫大发作及其持续状态苯妥英钠苯妥英钠 阻止病灶异常放电向正常脑组织扩散，降
15、低细胞膜阻止病灶异常放电向正常脑组织扩散，降低细胞膜 对钠离子、钙离子的通透性，抑制对钠离子、钙离子的通透性，抑制PTP形成。主要用于形成。主要用于 1 大发作、精神运动性发作大发作、精神运动性发作 首选首选 2 三叉神经痛、舌咽神经痛三叉神经痛、舌咽神经痛 3 心律失常（室性）心律失常（室性）23【操作步骤操作步骤】1设定条件：电压设定条件：电压100V。方式：单次，。方式：单次，A频率频率2Hz，B时间时间1S2选择电惊厥阳性鼠选择电惊厥阳性鼠6只，称重后分只，称重后分3组；组；3甲、乙、丙组分别甲、乙、丙组分别IP NS、苯巴比妥、苯妥英钠、苯巴比妥、苯妥英钠 剂量均为剂量均为 0.1m
16、l/10g430分钟后，原条件再给予电刺激，分钟后，原条件再给予电刺激，记录强直性屈曲、伸展等的持续时间记录强直性屈曲、伸展等的持续时间24【注意事项注意事项】1小鼠电惊厥指标：前肢屈曲、后腿伸直；小鼠电惊厥指标：前肢屈曲、后腿伸直；2鳄鱼夹需沾生理盐水，以利导电；鳄鱼夹需沾生理盐水，以利导电；3 用药前后小鼠电刺激条件要一致。用药前后小鼠电刺激条件要一致。25 地西半的抗药物惊厥作用地西半的抗药物惊厥作用【有关知识有关知识】地西半地西半作用机制作用机制 BZ类药类药（）（）BZ受体受体促进促进GABA与与 相应受体结合相应受体结合，增加，增加Cl通道开放频率通道开放频率,Cl 内流内流，超极化，抑制性效应，超极化，抑制性效应作用用途作用用途 抗焦虑、镇静催眠、抗惊厥抗癫痫、中枢性肌松抗焦虑、镇静催眠、抗惊厥抗癫痫、中枢性肌松印防己毒素印防己毒素 1 (+)脑干呼吸中枢；脑干呼吸中枢；2 中毒量致阵挛性惊厥中毒量致阵挛性惊厥 解除中枢以解除中枢以GABA为介质的运动神经突触为介质的运动神经突触 前抑制，从而取消了限制中枢兴奋泛发传播前抑制，从而取消了限制中枢兴奋泛发传播 的自身调节机制
