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1、实验诊断在诊断中的位置及作用诊断是医生将所获得的各种临床资料经过分析、评价、整理后,对患者所患疾病提出的符合临床思维逻辑的判断。诊断疾病是医生最重要、最基本的临床实践活动之一。诊断疾病的步骤:搜集临床资料 分析、评价、整理临床资料 提出初步诊断 确立及修正诊断实验诊断学(laboratory diagnosis)运用实验室技术和方法,通过物理、化学反应、仪器分析和动物试验等手段,对病人的血液、体液、分泌物、排泄物以及组织细胞等标本进行检验,获得反映机体功能状态、病理变化或病因等的客观资料,用以判断健康状态及协助临床诊断、病情监控、疗效观察和预后评估。实验室前:医嘱的制定,患者的准备,样本的采集
2、和运送实验室中:对样本进行血液学、体液、生化学、免疫学、病原微生物学、细胞学等检查实验室后:综合分析检测结果实验诊断学内涵实验室检查前:检查的时机,检查的意义,检查的敏感性和特异性等。在分析、评价、整理实验室检查结果时,必须与病史资料和体格检查结果结合起来进行分析,切不可单靠某项检查结果诊断疾病。必须考虑:假阴性和假阳性问题,有无影响检查结果的因素,与其他临床资料是否相符,如何解释等。实验诊断学的现状和发展趋势随着科技水平的快速发展,新技术、新方法不断应用于实验诊断学科中。从手工操作发展为快速高度自动化分析从定性检测发展为定量检测从常量单项检测发展为微量多项检测从细胞、蛋白质水平发展到基因诊断
3、血液标本的采集和处理血液标本的种类 全血:血细胞成分检验 血清:大部分生化项目检验 血浆:部分临床生化检验采血部位毛细管:成人 婴幼儿 烧伤患者静脉:需血量较大动脉:血气分析严禁从静脉输液管中采集血液样本。采血时间标本采集后的处理2.骨髓标本的采集和处理 骨髓穿刺获得,立即制片,细菌培养,造血干细胞培养3.排泄物、体液标本的采集和处理 标本采集后均应随时尽快送检和检验在获得病史和体格检查的基础上,学会选择基本的必要的实验室检查,了解常用实验室检查的原理和方法熟悉标本的采集和处理以及常见影响因素掌握各项常用的检验参考值及其临床意义学会将检验结果与其他临床资料相结合分析学习要求血常规检查blood
4、 routine test1.毛细血管采血法 部位:手指2.静脉采血法 静脉法优于毛细血管法的原因3.抗凝剂 柠檬酸钠 草酸钠 肝素 EDTA(K盐尤佳)红细胞和血红蛋白检测成熟红细胞是中央稍浅,大小近似相等无核的细胞成熟红细胞是中央稍浅,大小近似相等无核的细胞成熟红细胞成熟红细胞红细胞计数自动计数仪,手工法血红蛋白测定氰化高铁血红蛋白法红细胞形态检测 瑞氏染色红细胞血红蛋白成年男性(4.0-5.5)109/L120 160 g/L成年女性(3.0-5.0)109/L110 150 g/L新 生 儿(6.0-7.0)109/L170 200 g/L红细胞及血红蛋白增多相对性增加红细胞及血红蛋白
5、减少贫血概念:单位容积血中RBC,Hb.,HCT低于参考值下限,分生理性贫血及病理性贫血贫血分类:生理性贫血:妊娠中晚期血浆容量增加血液稀释,婴幼儿和青少年造血原料相对不足,老年人造血功能减退病理性贫血:病因分类:红细胞生成减少,红细胞破坏过多,失血性贫血 形态学分类(1)正细胞(2)大细胞(3)小细胞 骨髓增生程度分类(1)增生(2)增生不良红细胞形态学改变大小异常l小红细胞/大红细胞/巨红细胞泪滴形红细胞泪滴形红细胞 红细胞形态如梨形或水滴形,见于各种增红细胞形态如梨形或水滴形,见于各种增生性贫血及骨髓纤维化,以及地中海贫血、生性贫血及骨髓纤维化,以及地中海贫血、脾功能亢进或脾功能亢进或
6、肾病等肾病等裂红细胞裂红细胞 指红细胞碎片,包括盔形红细胞等,多见于弥散性血管指红细胞碎片,包括盔形红细胞等,多见于弥散性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血和心源性溶血性贫血等内凝血、微血管病性溶血性贫血和心源性溶血性贫血等红细胞破碎综合症;其它常见于化学中毒、肾功能衰竭、红细胞破碎综合症;其它常见于化学中毒、肾功能衰竭、血栓性血小板减少性紫癜。血栓性血小板减少性紫癜。红细胞比积和红细胞有关参数红细胞比积 定义:红细胞比积(Hemocrit Hct)又称红细胞压积(Packed cell volume)是指红细胞在血液中所占容积的比值。参考值:男性.女性.临床意义:各种原因所致血液浓缩,常作为补
7、液参考各种类型贫血血细胞平均值的计算方法:手工法 血细胞分析仪法红细胞比积和红细胞有关参数红细胞常数计算1三种常数定义(1)平均红细胞体积(mean corpuscular volume MCV)每升血液中红细胞比积MCV=*1015 fl 每升血液中RBC数目(1L=1015 FL)红细胞比积和红细胞有关参数(2)平均红细胞血红蛋白量(mean corpuscular hemoglobin MCH)每升血液中血红蛋白含量MCH=*1012 pg 每升血液中RBC数目(1g=1012pg)红细胞比积和红细胞有关参数(3)平 均 红 细 胞 血 红 蛋 白 浓 度(m e a n corpusc
8、ular hemoglobin concentration MCHC)每升血液中血红蛋白含量 MCHC=g/l 每升血液中红细胞比积血细胞分析仪法手工法MCV80-100 fl82 92 flMCH27 34 pg27 31 pgMCHC320 360 g/l320 360 g/l临床意义:贫血的形态学分类贫血类型MCVMCHMCHC常见疾病正常细胞性NNN急性失血、溶血、再障、白血病大细胞性N叶酸、维B12缺乏小细胞低色素性N慢性炎症、尿毒症 单纯小细胞性铁缺乏、珠蛋白肽链合成障碍红细胞体积分布宽度 (RBC Distribution Width,RDW)红细胞体积分布宽度是由血液分析仪测量
9、获得的反映周围血红细胞体积异质性的参数,是反映红细胞大小均一程度的客观指标。临床意义:与MCV结合进行贫血分类:这种分类法更能反映贫血的病理变化,对贫血的鉴别诊断有一定的价值。诊断缺铁性贫血:IDA的病人95%以上RDW增高,可与轻型-珠蛋白生成障碍性贫血(88%RDW正常)鉴别。贫血类型 常见疾病大细胞均一性 部分再障 大细胞不均一性 巨幼细胞性贫血正细胞均一性 急性失血 正细胞不均一性 再障、部分溶贫小细胞均一性 地中海贫血 小细胞不均一性 缺铁性贫血三网织红细胞计数(Ret)网织红细胞(reticulocyte)是介于晚幼红细胞和成熟RBC之间未完全成熟的RBC。胞浆中尚残存多少不等的核
10、糖核酸等嗜碱性物质,用煌焦油兰、新亚甲兰进行活体染色,这些嗜碱性物质即被凝集沉淀着色,在胞浆中呈现兰色细颗粒状,颗粒状间又有细丝状联缀,而构成网状结构。网织红细胞计数(Ret)参考值:百分数:成人 0.5-1.5%新生儿2-6%绝对值:(24-84)*109/L网织红细胞计数(Ret)临床意义1.反映骨髓造血功能:Ret 表示骨髓红细胞 增生活跃 溶贫、急性失血 缺铁贫 et表示骨髓造血功能低下 再障 et 急性白血病et 2.作为贫血治疗的疗效判断及治疗性试验的观察指标。血小板检查一、血小板计数(血小板检查2临床意义(1)PLT下降:血小板生成障碍:再障,放射线损害,白血病。血小板破坏或消耗
11、亢进:免疫性破坏消耗性亢进,血小板自身异常分布异常:肝硬化,脾亢()增加:原发性增多:骨髓增生性疾病,慢粒,真红反应性增多:急性、慢性炎症,缺铁贫血小板检查血小板平均容积和血小板分布宽度血小板平均容积(mean platelet volume,MPV)血小板分布宽度(platelet distribution width,PDW)参考值:MPV:fl,PDW:15-17%血小板检查PLT MPV 表示血小板减少是外周血的原因PLT MPV 表示骨髓增生障碍PLT MPV N 表示血小板分布异常 PLT MPV 表示反应性血小板增加 PLT MPV 表示病变来至于骨髓 红细胞沉降率的测定红细胞沉
12、降率(erythrocyte sedimentation rate ESR)简称血沉。原理:由于自身重量产生自然下沉力,而在下沉时,必须与等体积的血浆发生位置互换,造成血浆向上流动,通常情况膜表面唾液酸带负电荷,红细胞互相排斥,使细胞间距为。彼此分散悬浮于血浆中。下沉受到的阻力较大,故沉降率较慢。红细胞沉降率的测定 此外,血液白蛋白带有负电荷,纤维蛋白原、球蛋白带有正电荷,正常情况下,下沉速度慢,在某些病理状态下,血浆中纤维蛋白原或球蛋白增加,能降低的电位,促使其成缗线状聚集,减少了血浆对沉降的阻力,因而血沉加快。胆固醇、甘油三酯也能促进血沉,白蛋白带负电荷,有抑制缗线状聚集的用。卵磷脂也有抑
13、制聚集作用,有利于维持悬浮性。红细胞沉降率的测定参考值:成人男性015 成人女性020红细胞沉降率的测定临床意义:()生理变化 新生儿、儿童 ESR 月经期、妊娠 ESR 老年人 ESR ()病理性 (A)炎症性疾病:急性细菌性炎症、自身免疫性疾病、慢性炎症:(B)组织坏死及损伤:范围较大组织损伤或手术创伤缺血性组织坏死:心肌梗塞、肺梗塞等红细胞沉降率的测定(C)恶性肿瘤:增长迅速的恶性肿瘤增快,与巨球蛋白、纤维蛋白原增高等有关。手术、放疗、化疗后、趋于正常,良性肿瘤则正常。(D)各种原因所致的高球蛋白血症:多发性骨髓瘤、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肾炎、肝硬化等(E)贫血(F)
14、高胆固醇血症红细胞沉降率的测定4临床应用()动态观察病情变化:活动期,静止期正常()区分良性与恶性肿瘤:良性肿瘤,恶性肿瘤()反映血浆中球蛋白增高(4)区分功能性与器质性疾病:心绞痛,心肌梗塞 常见的白细胞常见的白细胞 具有典型的分叶状的核具有典型的分叶状的核 高度游走的吞噬细胞高度游走的吞噬细胞 巨噬细胞以及外周组织和淋巨噬细胞以及外周组织和淋巴组织中发现的各种类型大巴组织中发现的各种类型大型吞噬细胞的前体细胞型吞噬细胞的前体细胞嗜中性白细胞嗜中性白细胞单核细胞单核细胞 数量具有日夜周期性:早上最多,下午最少数量具有日夜周期性:早上最多,下午最少 寄生虫感染后,嗜酸细胞数目增多寄生虫感染后,
15、嗜酸细胞数目增多 某些过敏性疾病中,一些组织的嗜酸细胞亦某些过敏性疾病中,一些组织的嗜酸细胞亦增多增多 白细胞中所占比例最少白细胞中所占比例最少 特点是细胞质内含有大的集中碱性颗粒特点是细胞质内含有大的集中碱性颗粒嗜酸性白细胞嗜酸性白细胞嗜碱性白细胞嗜碱性白细胞白细胞计数手工法白细胞分类计数 瑞氏染色 电阻抗计数 荧光染色后激光计数白细胞成人(4.0-10)109/L新 生 儿(15-20)109/L6月 12岁(6.0-7.0)109/LN 50-75%E 0.5-5%B 0-1%L 20-40%M 3-8%1.中性粒细胞(neutrophil,N)病理性增多急性细菌性感染、化脓性感染广泛的
16、组织损伤或坏死、溶血、术后急性出血急性中毒粒细胞白血病、骨髓增殖性疾病、恶性肿瘤病理性减少核象变化粒细胞核象:指粒细胞的分叶情况 反映粒细胞成熟度核象变化反映某些疾病的病情和预后核左移:外周血,中性粒杆状核,甚至出现晚幼粒,中幼粒,早幼粒,原粒等幼稚细胞,超过5%,称核左移。常见于急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血、白血病等核右移:正常中性粒以三叶核为主,若五叶核以上超过3%,称核右移,为造血功能衰竭或造血物质缺乏所致,常见于巨幼贫,用抗代谢药物后在严重感染、败血症、恶性肿瘤、中毒、大面积烧伤时出现的中毒性和退行性变化中毒颗粒中毒颗粒 空泡粒细胞空泡粒细胞 形态异常DohleDohle体体是一种出现于成熟粒细胞浆中的淡蓝色小体,常分布在细是一种出现于成熟粒细胞浆中的淡蓝色小体,常分布在细胞边缘、圆形或不规则,有时不止一个。经常与胞边缘、圆形或不规则,有时不止一个。经常与严重感染严重感染时出现的其它粒细胞时出现的其它粒细胞“中毒性中毒性”改变并存。改变并存。奥氏奥氏(Auer)(Auer)小体小体是含于胞浆内的一种红色的棍棒状小体。一般认为它是含于胞浆内的一种红色的棍棒状小体。一般认为它