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1、酱油中氨基酸态氮含量的测酱油中氨基酸态氮含量的测定定 电位滴定法电位滴定法一、目的与要求1.了解食品中氨基酸态氮的来源、作用及测定方法2.领会和掌握双指示剂甲醛滴定法及电位滴定法 基本原理、操作要点。3.进一步巩固滴定分析和电位滴定法的基本操作技能。二、测定原理 氨基酸含有羧基和氨基,利用氨基酸的两性作用,加入甲醛固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,用氢氧化钠标准溶液滴定后进行定量,用双指示剂或电位滴定法确定终点。测定步骤:样品采集与处理样液制备测定数据处理。三、仪器与试剂三、仪器与试剂仪器:酸度计、磁力搅拌器、100mL容量瓶、50mL碱 式滴定管、200mL的烧杯试剂:36甲醛溶液、0.05
2、0mol/L氢氧化钠标准溶液、酱油、蒸馏水四、测定步骤1.0.050 mol/L氢氧化钠标准溶液配制 准称2.00gNaoH 溶解 定容 1000mL容量瓶 2.电位滴定法 准吸酱油5.0mL 蒸馏水定容 100mL容量瓶 吸取20.0mL 200mL烧杯+60mL水 插入酸度计的指示电极和参比电极 0.05molL NaOH标准溶液 滴定至指示pH8.2 准确加入甲醛溶液10mL 0.05molL NaOH标准溶液滴定至pH9.2 记录用去氢氧化钠标准溶液的毫升数,供计算氨基酸态氮含量用3.试剂空白试验:取水80mL 0.05molL氢氧化钠标准溶液滴定 pH8.2 加10mL甲醛溶液 O.
3、05molLNaOH标准溶液滴定至pH9.2 所用氢氧化钠标准溶液毫升数为测定氨基酸态氮的试剂空白试验 NaOH溶液的配制 电位滴定法五、数据记录和处理酱油消耗NaOH/mL酱油加甲醛后消耗NaOH/mL空白消耗NaOH/mL空白加甲醛后消耗NaOH/mLNaOH标准液浓度/(mol/L)3.317.820.211.380.051.结果记录2.结果计算 式中:-样品中氨基酸态氮的含量,g100mL;V1测定用的样品稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,mL;V2试剂空白试验加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,mL;V3样品稀释液取用量,mL;V4样品的体积,mL;V样品稀释液的总体积,
4、mL;cNaOH标准溶液的浓度,molL;0.0141mL 1.000molL氢氧化钠标准溶液相当氮的克数。100)/(014.0)(3421VVVcVV100)/(014.0)(3421VVVcVV=0.003157 x100=0.3157 g/100ml100)100/20(5014.005.0)31.382.7(六、实验小结 本实验主要是要我们掌握电位滴定法的基本原理和操作要点及进一步巩固电位滴定法的基本操作技能。在测定之前,酸度计一定要进行校正,校正溶液的配制要准确。还有就是要求我们掌握基本的溶液的配制,及溶液的稀释、定容,一些常见的基本的仪器的使用。本实验没什么难度,主要就是考验我们的细心及耐心,做实验的时候一定要集中注意力。