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1、基因工程的基本操作程序习题一、选择题（每小题3分，共39分）1o下列关于基因工程的叙述，错误的是（）A.目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或者微生物B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达2。下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（）。A. 一种限制性核酸内切醐只能识别一种特定的脱氧核甘酸序列B.限制性核酸内切酶的活性受温度影响C.限制性核酸内切酶能识别和切割RNAD.限制性核酸内切酶可从原核生物中提取3.如图是利用基因工程技术哺育转基因植物，生产
2、可食用疫苗的部份过程示意图，其中 Pst I、Sma I、ER I、Apal为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的是（）。A.图示过程是基因工程的核心步骤B.表达载体构建时需要用到限制酶Sma IC.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D .除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构4。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（）A.过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区挨次相连成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才干进行筛选D.应用DNA探针技术，
3、可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其彻底表 达图中挨次表示限制酶、DNA聚）5 .下图为DNA份子在不同酶的作用下所发生的变化, 合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（A .B .C . OD .6 .下列关于基因工程的叙述，不正确的是（多选）（）A.基因工程时常以抗菌素抗性基因为目的基因B.细菌质粒是基因工程常用的运载体C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理运载体DNAD.为哺育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体7 .天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的 矮牵牛中存在序列已知的基因Bo现
4、用基因工程技术哺育蓝玫瑰,下列操作正确的是 （ ）Ao提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA ,再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D0将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞8 .北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列 重复次数越多,抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关 叙述正确的是（）。A.过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区挨次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗 冻蛋白
5、C.过程构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才干进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其彻底 表达9。将ada（腺甘酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导人大肠杆菌并成功表达腺甘酸脱氨 酶。下列叙述错误的是（）A .每一个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B .每一个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C.每一个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD .每一个插入的ada至少表达一个腺苜酸脱氨酶份子10 .下列叙述符合基因工程概念的是（）.A . B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B.将人的干扰素基因重组到质粒后导
6、入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D .自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上11 .在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（）.A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B,用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C.将重组DNA份子导入烟草原生质体D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞12 .下列关于转基因植物的叙述，正确的是（）。A.转入到油菜的抗除草剂基因,可能通过花粉传入环境中B.转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C .动物的生长激素基因
7、转入植物后不能表达D .如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题13 .下列关于基因工程的叙述，错误的是（）。A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或者微生物B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具能C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达二、填空题(共51分)1。科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA份子重组，并且在 大肠杆菌体内表达成功。请根据图回答问题：(1)此图表示的是采取 合成基因的方法获取基因的过程.(2)图中DNA是以为模板，形成单链DNA,在酶的作用下合成
8、双链DNA,从而获得了所需要的基因。(3)图中代表 DNA,含基因o(4)图中表示 。2。下图表示利用基因工程哺育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题。(1)若限制能I的识别序列和切点是一1GATC-,限制识别序列和切点是 GJGATCC,那末在过程中,应用限制酶 切割质粒，用限制酶 切割抗虫基因。(2)将通过过程得到的大肠杆菌涂布在含有 的培养基上,若能够生长说明已导入了普通质粒或者重组质粒,反之则说明没有导入.(3)要确定抗虫基因导入后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，则在个 体水平上的鉴定过程可简述为：.经筛选分析,该植株细胞中含有一个携带抗 虫基因的DNA片段，因此可以把它
9、看做是杂合子。理论上，该转基因植株自交产生的Fl代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的。(4)过程所用的现代生物技术称为,从遗传学角度来看，据细胞通过过 程，能形成棉植株的根本原因是细胞具有 O3. 干扰素是病毒侵入人体后由淋巴细胞产生的一种免疫活性物质,它具有广谱抗病毒的 作用。利用现代生物技术生产干扰素的流程如下：(1)过程产生的物质A是, CDNA文库(大于/小于)人的基因组文库。(2)过程用到的工具酷是 J过程需先用 处理受体细胞，过程通常采用 技术。(3)过程和的关键技术分别是、o(4)基因工程的核心步骤是图中的(填标号)o4. (2022安综31)家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将
10、人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前，需用 酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自CDNA文库的干扰素基因片段 正确插入表达载体的 和 之间。(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成份应包含：扩增缓冲液(含Mg2,)、水、4种脱氧核糖核甘酸、模板DNA、O(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的 中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以，增加培养的细胞数量，也有利 于空气交换。5. (2022天津理综，7 1)下图是哺育
11、表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线. 图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨玉青霉素抗性基因，BamH I、HindIIK Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答问题.(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 (填字母代 号)。A .启动子B . tetRC .复制原点D . ampR(3)过程可采用的操作方法是 (填字母代号).A.农杆菌转化B.大肠杆菌转化C.显微注射D.细胞融合(4)过程采用的生物技术是.(5)对
12、早期胚胎进行切割,经过程可获得多个新个体.这利用了细胞的 性.(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 (填字母代号)技术。A.核酸份子杂交B.基因序列分析C.抗原一抗体杂交D . PCR6. (2022上海卷)人体细胞内含有抑制癌症发生的P53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。(1)目的基因的获取方法通常包括 和 O(2)上图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部份区域。与正常人相比，患者在 该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对,这种变异被称为(3)已知限制酶E识别序列为CCGG,若用限制酶E分别彻底切割正常人和患者的 P53基因部份区域(见上图)，那末正
13、常人的会被切成 个片段，而患者的则被切割成长度为对碱基和 对碱基的两种片段。(4)如果某人的P基因部份区域经限制酶E彻底切割后，共浮现170、220、290和460个碱基对的四种片段,那末该人的基因型是(以P+表示正常基因,P表示 异常基因)。7. (2022福建卷;转基因抗病香蕉的哺育过程如图所示。质粒上有Pst 1、Sma I、EcoR I、APal等四种限制酶切割位点.请回答下列问题。(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶,对 进行切割。(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗 病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有,作为标记基因.(
14、3)香蕉组织细胞具有,因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香 蕉组织细胞哺育成植株。图中、挨次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的8. (2022高考全国新课标卷40)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)限制性内切酶切割DNA份子后产生的片段，其末端类型有 和.(2)质粒运载体用EcoR I切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用ECORl切割外,还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 O(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和 DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是i产物是i若要在体外获得大量反转录产
15、物，常采用 技术。(5)基因工程中除质粒外，和 也可作为运载体.(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,普通情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细 胞,原因是。9。(2022福建高考32)现代生物科技专题.肺细胞中的Iet7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强,会引起肺癌.研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。请回答：(1 )进行过程时,需用 酶切开载体以插入Iet7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为。(2 )进行过程时，需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养.研究发现，Iet7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细 胞提取 进行份子杂交，以直接检测Iet7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 (RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。10. (2022天津高考7)生物份子间的特异性结合的性质广
