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1、痰标本的采集、运送、保存、验收及处理流程 痰是如何产生的?在人体气管支气管的内壁都覆盖着一层黏膜,由纤毛柱状上皮和杯状细胞组成,在黏膜下层含较多的黏液腺和浆液腺,腺体导管开口于黏膜表面,正常情况下,杯状细胞和腺体分泌少量黏液覆盖在黏膜层表面,对黏膜起保护作用,可保持气管黏膜的湿润以便把吸入气管支气管内的灰尘颗粒、细菌等粘附住,阻挡其进入肺组织深处,然后,在借助于纤毛柱状上皮的纤毛摆动,把它们排到气管上端的喉头部位,经口腔咯出即为痰。病理状态下的痰 当气管支气管和肺受到有害因素的刺激或致病菌感染而发生炎症时,呼吸道的黏膜充血水肿,大量炎性细胞侵润,血管扩张,渗出增加,粘膜层的杯状细胞和黏膜下层的
2、腺体增生肥大,黏液分泌大量增多,有利于清除异物,黏液分泌过多,就加重了纤毛柱状上皮的负担,不利于黏液的排出,在细菌及毒素的作用下,产生一些变性坏死组织细胞潴留在支气管内,黏液和这些变性坏死的组织细胞就构成了病理状态下的痰。痰液检查的目的 协助诊断某些呼吸系统的疾病。如:支气管哮喘、支气管扩张等。确诊某些呼吸系统的疾病如:肺结核、肺炎等。观察疗效和预后判断。痰的送检指征有哪些 发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、黏稠或血性并伴有胸痛、气急肺部闻及湿啰音。外周血白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高。X线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液,甚至出现感染性休克和呼吸衰竭等患者。痰培养标本采集的注意事项 在抗生素
3、应用前采集痰液。最好在清晨采集痰标本,多数患者在清晨痰较多,且含菌量也多。对于细菌性肺炎,痰标本送检每天一次,连续2-3天,不建议24小时内多次采集,除非痰液外观性状出现改变。怀疑分枝杆菌感染患者,应连续收集3天清晨痰送检。自然咳痰前,首先进行刷牙,用清水漱口3次以去除口腔内的杂菌。特别是老年、重症或住院患者的上呼吸道定植菌更多,致使痰经口咽部受到污染。痰标本的采集方法 自然咳痰法:患者清晨刷牙漱口之后用力咳出呼吸道深部的痰液,吐至无菌广口瓶内立即盖紧盖子送往微生物实验室。如果患者痰液较深不易吐出时,可在咳痰前捶背,协助排痰,采集痰量不少于1ML。由临床医生按相应操作规程采集的痰标本 经支气管
4、镜抽吸法:纤维支气管镜检查可直接从肺部感染病灶获取支气管分泌物操作较为安全。用支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌,但不能完全避免咽喉部正常菌群污染,所以一般不用此法。但对于不能咳出或诱导出足够痰液的患者,支气管镜检查可作为获取标本进行分支杆菌培养的一种方法,常用的采集方法有采集支气管肺泡灌洗经支气管直接吸引或用防污染样本毛刷采集。经人工气道吸引分泌物:是目前临床较为常用的微生物标本。但由于这些宿主的气管纤毛黏液防御机制受到损害,大气通常有致病菌或条件致病菌定植而不再保持无菌状态,所以有学者提出此法的标本应该先做细胞学筛选。采集方法可通过导管吸痰,防污染毛刷采集或防污染灌洗采集。经气
5、管穿刺吸引物:由于采集到的下呼吸道标本不受上呼吸道正常菌群的污染,曾较广泛推荐应用于下呼吸道细菌性感染的病原学的诊断。此法患者常不易接受,但这样的标本适用于厌氧培养。经胸壁针刺吸引物对于感染性疾病,只是偶尔用来诊断一些原因不明的肺炎和免疫缺陷患者的肺炎或贴近胸壁的肿块病灶的标本采集。胃内采痰法:清晨空腹时,将胃管插入胃内,用注射器抽取胃液。适用于无自觉症状的肺结核患者,尤其是婴幼儿不会咳痰,常将痰液吞入胃内,可通过采集胃内容物作结核分支杆菌培养。小儿取痰法:用弯压舌板向下压舌,用棉试子伸入咽部,小儿因压舌刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在棉试子上,从而获得标本。雾化蒸汽吸入法:无痰或痰量极
6、少时可用3%-5%的NaCl溶液5ml先雾化吸入5min,进行导痰。当NaCl浓度过高时,患者常常不能耐受,所以气道高反应的患者如哮喘患者不宜用此法。痰标本在运送和保存的注意事项 标本采集后需尽快(2h)送到实验室,不及时运送可导致肺炎双球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌由于不适应外界环境和自溶现象而死亡。延迟送检或待处理标本应置于4冰箱保存(疑为肺链和流感嗜血杆菌等苛养菌不在此列),以免杂菌生长,但保存的标本应在24h内处理。对可疑烈性呼吸道传染病(SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)的患者标本,在采集、运送或保存过程中必须注意生物安全保护。痰涂片细胞学筛选下呼吸道操作流程 (一)咳出痰和气管抽出痰涂片E2
7、5不合格正常菌群10E25可接受?E25合格24h内无致病菌(放)致病菌量少且3种正常菌群生长致病菌量多3种,无明显优势菌致病菌量多3种取优势菌鉴定+药敏支气管肺泡灌洗液刷检加入1ml生理盐水或肉汤稀释 离内心菌涂及片鳞及状镜上检皮中细性胞粒数细量胞E104CFU/ml下呼吸道操作流程(二)取优势菌鉴定+药敏24h细菌生长情况有菌生长无菌生长或菌量少E1%菌杂未检出细菌痰标本中常见的病原体 常见的细菌有金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性的葡萄球菌、肺炎链球菌、A群链球菌、肠球菌、卡他莫拉菌、脑膜炎奈瑟氏菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、军
8、团菌、支原体、衣原体等 常见的真菌主要为白假丝酵母菌、隐球菌、曲霉菌和毛霉菌。常见的病毒有腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、冠状病毒和麻疹病毒。痰培养的临床意义 痰标本的细菌学检查对呼吸道感染的诊断有重要意义。细菌性肺炎为呼吸道感染最常见的类型。近年调查表明由肺炎链球菌所致肺炎仍为常见,由流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、MRSA和革兰氏阴性杆菌所致的肺炎比例明显上升。军团菌肺炎引起了人们的重视。在医院中,革兰氏阴阳杆菌占50%以上成为主要病原体,一些条件致病菌和耐药菌成为医院内肺炎的主要致病菌。支原体肺炎以不典型肺炎表现。近几年发生率明显上升,占肺炎的10%-20%,临床上约80%的慢性气管炎病人合并有支原体感染。真菌性肺炎是致病性真菌和条件致病性真菌所引起。目前以条件致病性真菌感染为主,并呈上升趋势。常见菌以白假丝酵母菌为主,曲霉、毛霉和隐球菌也常见。