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1、急性经口毒性试验1目的(1)检测消毒剂对实验动物的急性毒性作用和强度。(2)为亚急(慢)性揖性等试验提供剂量选择的依据。2实验动物小鼠或大鼠任选种，雌雄各半。小鼠体重18g22g,大鼠体重180g220g,根据不同的计算LD50方法，选用适当的动物数量。3试验分组如应用概率单位对数图解法计算LD5o,随机分为5个6个剂量组。通常最高剂量组的动物死亡率应290%,最低剂量组动物死亡率应WI0%。可先以较大的组距较少量动物进行预试，找出其粗略致死剂量范围，然后再设计正式试验的剂量分组。4操作程序(1)动物的准备：试验前，一般禁食过夜，不限制饮水。(2)受试物的配制：常以水或食用植物油为溶剂配制成溶
2、液，或采用0.5%竣甲基纤维素配制成混悬液。灌胃给予受试物的最大容量，小鼠不超过02ml10g体重，大鼠不超过l0ml100g体重。(3)染毒方法：用灌胃方式将受试物一次给予动物。若受试物毒性很低，一次灌胃容量太大，可在24h内分成2次3次给予，其总剂量作为一日剂量计算。(4)染毒后观察动物的中毒表现和死亡数及死亡时间，并对死亡动物和观察期满处死动物进行尸体解剖，肉眼观察，发现有异常的组织或脏器，尚需进一步作组织病理学检查。观察时间14CL5LD50的计算方法根据给受试物后14d内的各剂量组动物死亡率计算LD50(半数致死剂量)。5.1 概率单位-对数图解法：(1)根据各剂量组动物死亡率，从表
3、2-9中查各组的概率单位。因死亡率为0%和100%的概率单位，与所试动物数有关，故需另在表210中查找。例如：对死亡率为45%的概率单位，可查表2-9。先在表的左侧纵标目上找到40,而后在表的上行横标目处找到5,两者交叉点处的4.87,即为45%的概率单位。又如:某组用10只实验动物，如果全部存活(死亡率为0%),查表2/0,其概率单位为3.04o02.672.953.123.253.363.453.523.593.66103.723.773.823.873.923.964.014.054.084.12204.164.194.234.264.294.334.364.394.424.45304.
4、484.504.534.564.594.614.644.674.694.72404.754.774.804.824.854.874.904.924.954.97505.005.035.055.085.105.135.155.185.205.23605.252.285.315.335.365.395.415.445.475.507()5.525.555.585.615.645.675.715.745.775.81805.845.885.925.955.996.046.086.136.186.23906.286.346.416.486.556.646.756.887.057.33注：横标目数字为死
5、亡率的个位数，纵标目数字为死亡率的十位数。表2/0相应于反应率为0%及100%的概率单位该组动物数反应率该组动物数反应率0%100%0%100%.113.007.0023.856.15122.977.0333.626.38132.937.0743.476.53142.907.1053.366.64152.877.1363.276.73162.857.1573.206.80172.827.1883.136.87182.807.2093.096.91192.787.22103.046.96202.767.24(2)用方格纸绘散点图，横轴表示剂量的对数值(X),纵轴为概率单位值(Y),将各组数值点在
6、图上。(3)按各点的分布趋势，用直尺绘出一条最适合于各点的直线，使线上方的点到线的总距离与线下方的点到线的总距离相近，此线应尽量靠近概率单位为5的点及附近的点。(4)查出求概率单位5处的剂量对数，其反对数即为LD50o按下列公式计算LD50的95%可信限。S=(X2-X1)(Y2-Y1)Sm=S(N72),z21.D50对数值的95%可信限=logLD501.96Sm(上式结果，经反对数变换后，可得LD50的95%可信限)Sm为LD50的标准误；S为标准差；XpX2分别为机率单位等于4(Y)和6(丫2)时相应的剂量对数值；N为Y(=4)及丫2(=6)相应的死亡率间所用的动物数。5.2 1次最大
7、限度试验：如20只动物(雌雄各半)一次灌胃剂量5000mgkg体重,在Md内又无死亡,可判定大于5000mgkg体重。5.3 其他方法：如霍恩(HOm)法、寇氏(Karber)法等。6评价规定消毒剂的毒性评价：1.D50大于5000mgkg体重者属实际无毒；1.D50为501mgkg-5000mgkg体重者属低毒；1.D50为51mgkg500mgkg体重者属中等毒；1.D50为lmgkg50mgkg体重者属高毒；1.D50小于ImgZkg体重者属剧毒。注：为评价消毒剂在实际应用时对人体的安全性，当产品原形LD55OOOmgkg体重时，需增做消毒剂最高应用液浓度5倍溶液的急性经口毒性试验，并计算其LD50O
