皮肤刺激试验测定.docx

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1、皮肤刺激试验测定1目的检测消毒剂对实验动物皮肤的刺激/腐蚀作用和强度。2实验动物每次试验至少需3只皮肤完好的健康家兔或豚鼠。3操作程序3.1 一次完整皮肤刺激试验(1)在试验前24h,用脱毛剂将家兔或豚鼠背部脊柱两侧的毛去掉,不得损伤皮肤。去毛范围,左、右各约3cm3cmo(2)次日将受试物(浓度一般为皮肤消毒应用液的5倍或原液0.5ml(g)直接滴于面积为2.5CmX2.5Cm的一侧去毛完整皮肤上,或滴于同样大小的2层4层纱布上并敷贴在一侧去毛皮肤表面,然后用一层无刺激塑料膜或油纸覆盖,再用无刺激胶布固定。另一侧去毛皮肤作为空白对照(或溶剂对照)。敷贴时间为4ha试验结束后,用温水或无刺激性

2、溶剂除去残留受试物。(3)分别于去除受试物后lh、24h和48h观察皮肤局部反应,并按表2-11进行刺激反应评分。3.2 一次破扳皮肤刺激试验(I)涂受试物前,在2.5CmX2.5Cm的去毛皮肤上,用75%酒精清洁、消毒暴露皮肤,待酒精挥发后,用灭菌刀片或注射针头在皮区内划一个“井”形的破损伤口,并在该破损皮区内染毒。注意皮肤破损仅达表皮,不要伤及真皮。(2)手术前的皮肤准备,手术后受试物涂抹和局部皮肤反应的观察,评分方法同3.1。注意鉴别感染和原发性刺激反应的区别,若有感染可疑,应进行重复测试。3.3多次完整皮肤刺激试验(1)试验前动物皮肤准备同3.1(I)0(2)次日将受试物浓度同3.1(

3、2)0.5ml(g)涂在一侧皮肤上,另一侧涂溶剂作为对照,在涂抹后4h,用水或无刺激的适宜溶剂清洗,除去残留物。每天涂抹一次,连续涂抹14d。在每次涂抹后24h观察结果,按表2-11评分。为了便于受试物的涂抹和结果观察,必要时应剪毛。对照区的处理方法同试验区。4评价规定4.1 一次皮肤刺激试验在各个观察时间点,按照表2-11对动物的皮肤红斑与水肿形成情况进行评分,并分别按时间点将3只动物的评分相加,除以动物数,获得不同时间点的皮肤刺激反应积分均值(刺激指数)。取其中最高皮肤刺激指数,按表2-12评定该受试物对动物皮肤刺激强度的级别。4.2 多次皮肤刺激试验按下列公式计算每天每只动物平均积分(刺激指数),并以表2-12判定皮肤刺激强度。(每只动物14d的红斑和水肿总积分)每天每只动物平均积分=受试动物数义14表2J1皮肤刺激反应的评分标准皮肤刺激反应皮肤刺激反应评分红斑形成:无O勉强可见1明显2严重3紫红色红斑,并有焦痂4水肿形成:无O勉强可见i皮肤隆起,轮廓清楚2水肿隆起约Imm3-4zMr4,Lian4-f一小Iinni表2-12皮肤刺激强度分级皮肤刺激指数刺激强度级别O-0.50.5V2.02.0V6.0无刺激性轻刺激性中等刺激性强刺激性6.08.0

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