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1、第一节第一节 细菌细胞的代谢过程细菌细胞的代谢过程第二节第二节 细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖第三节第三节 细菌的人工培养细菌的人工培养第二章第二章 细菌的生理细菌的生理 第一节第一节 细菌细胞的代谢过程细菌细胞的代谢过程细菌与真核生物新陈代谢的主要区别:细菌与真核生物新陈代谢的主要区别:1.细菌生长和繁殖速度快细菌生长和繁殖速度快 2.利用各种化合物作为能源的能力强利用各种化合物作为能源的能力强 3.营养需求多种多样营养需求多种多样 4.可利用超常流水线合成大分子物质可利用超常流水线合成大分子物质 5.细菌能产生特殊物质细菌能产生特殊物质 物质摄取物质摄取生物合成生物合成聚合作用聚合作用组装组
2、装细菌细胞的代谢过程细菌细胞的代谢过程一、物质摄取一、物质摄取n单纯扩散单纯扩散n促进扩散促进扩散n主动运输主动运输n基团转位基团转位 需要载体蛋白,需要能量。两个突出特点需要载体蛋白,需要能量。两个突出特点:(1)转运过程中物质发生了化学变化;转运过程中物质发生了化学变化;(2)主要存在于厌氧菌和兼性厌氧菌中。主要存在于厌氧菌和兼性厌氧菌中。二、生物合成二、生物合成 1.作为鉴别细菌的主要措施作为鉴别细菌的主要措施 2.细菌生物合成环节可被药物影响细菌生物合成环节可被药物影响 三、聚合作用三、聚合作用nDNA复制复制 半保留复制半保留复制n转转 录录n翻译翻译转转 录录翻翻 译译DNA mR
3、NA 蛋白质蛋白质四、组装四、组装n自我组装(自我组装(self-assembly):自我组装可自我组装可在体外试管内完成,鞭毛及核糖体即采用此在体外试管内完成,鞭毛及核糖体即采用此种方式。种方式。n指导组装(指导组装(guided assembly):细菌表面细菌表面膜结构则只能依赖指导组装来完成。膜结构则只能依赖指导组装来完成。第二节第二节 细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖一、细菌个体的生长繁殖一、细菌个体的生长繁殖 世代时间世代时间:一个菌体分裂为两个菌体所需的时间一个菌体分裂为两个菌体所需的时间。一般一般20-30min。二、细菌群体的生长繁殖二、细菌群体的生长繁殖 生长曲线(生长曲线(g
4、rowth curve):):将细菌接种在液体将细菌接种在液体 培养基并置于适宜的温度中,定时取样检查活菌数,可发培养基并置于适宜的温度中,定时取样检查活菌数,可发 现其生长过程具有规律性。以时间为横坐标,以活菌数的现其生长过程具有规律性。以时间为横坐标,以活菌数的 对数为纵坐标,可得出一条生长曲线。对数为纵坐标,可得出一条生长曲线。液体培养细菌的生长曲线液体培养细菌的生长曲线n细菌来到新环境的一个适应过程。细菌来到新环境的一个适应过程。n特点:特点:(1)代谢活跃,合成并积累所需酶系统代谢活跃,合成并积累所需酶系统;(2)RNA含量明显增多,但含量明显增多,但DNA的量无变化的量无变化;(3
5、)细菌数并不增加细菌数并不增加1.迟缓期(迟缓期(lag phase)细菌此时生长迅速,以恒定速度进行分裂繁殖,活细菌此时生长迅速,以恒定速度进行分裂繁殖,活菌数以几何级数增长,达到顶峰,生长曲线接近一菌数以几何级数增长,达到顶峰,生长曲线接近一条斜的直线。一般而言,该期的病原菌条斜的直线。一般而言,该期的病原菌致病力最强,致病力最强,其形态、染色特性及生理活性均较典型,对抗菌药其形态、染色特性及生理活性均较典型,对抗菌药物等的作用较为敏感。物等的作用较为敏感。2.对数期(对数期(logarithmic phase)新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡,营养的消,营养的
6、消 耗、耗、代谢产物的蓄积等。代谢产物的蓄积等。3.稳定期(稳定期(stationary phase)4.衰亡期(衰亡期(decline phase)死菌数超过活菌数死菌数超过活菌数,如不移植到新的培养基,最如不移植到新的培养基,最终可全部死亡,此期细菌的菌体变形或自溶,终可全部死亡,此期细菌的菌体变形或自溶,染色不典型,难以进行鉴定染色不典型,难以进行鉴定。第三节第三节 细菌的人工培养细菌的人工培养 培养基(培养基(culture medium)是人工配制的基质,含有细菌生长繁殖是人工配制的基质,含有细菌生长繁殖必需的营养物质。培养基制成后,通常都要必需的营养物质。培养基制成后,通常都要经灭
7、菌处理。经灭菌处理。(一一)按营养组成的差异按营养组成的差异 1.基础培养基基础培养基:基本营养成分基本营养成分 2.营养培养基营养培养基:在基础培养基中添加一些其它营养物质,如葡萄在基础培养基中添加一些其它营养物质,如葡萄 糖、血液、血清、生长因子等糖、血液、血清、生长因子等 培养基的分类培养基的分类 普通培养基普通培养基 血液培养基血液培养基 1.固体培养基固体培养基:1.5%2%琼脂,用于细菌分离纯化。琼脂,用于细菌分离纯化。2.半固体培养基半固体培养基:0.5%琼脂,作穿刺试验。琼脂,作穿刺试验。3.液体培养液体培养:扩增纯培养的菌体。扩增纯培养的菌体。(二二)按状态的差异按状态的差异
8、细菌在固体培养基中的生长情况细菌在固体培养基中的生长情况光滑型菌落光滑型菌落粗糙型菌落粗糙型菌落粘液型菌落粘液型菌落 细菌在半固体培养基中的生长情况细菌在半固体培养基中的生长情况1:有动力:有动力2:无动力:无动力 细菌在液体培养基中的生长情况细菌在液体培养基中的生长情况菌膜菌膜菌沉淀菌沉淀均匀浑浊均匀浑浊对照对照 1.鉴别培养基鉴别培养基:在培养基中加入特定底物,观察细菌在其生长后分解在培养基中加入特定底物,观察细菌在其生长后分解 底物如何,从而鉴别细菌。底物如何,从而鉴别细菌。2.选择培养基选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,使之抑制一类细菌在培养基中加入某种化学物质,使之抑制一类细菌
9、 生长,而有利于另一类细菌生长,从而将后者选择出来。生长,而有利于另一类细菌生长,从而将后者选择出来。3.厌氧培养基厌氧培养基:专供厌氧菌的分离、培养和鉴别用专供厌氧菌的分离、培养和鉴别用.将普通培养基放在将普通培养基放在 无氧环境中培养,或者使培养基本身成为无氧的环境。无氧环境中培养,或者使培养基本身成为无氧的环境。(三三)按功能的差异按功能的差异麦康凯琼脂培养基麦康凯琼脂培养基 复习重点复习重点1.物质摄取的方式有哪几种?各有何特点?物质摄取的方式有哪几种?各有何特点?2.何谓细菌的生长曲线?不同时期各有何特点?何谓细菌的生长曲线?不同时期各有何特点?3.何谓培养基?培养基的种类有哪些?何谓培养基?培养基的种类有哪些?