血清载脂蛋白A1 血清载脂蛋白B免疫透射比浊法测定法.docx

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1、血清载脂蛋白A1免疫透射比浊法测定法1 .实验原理免疫透射比浊终点测定法。使用抗ApoAl抗体和样品中的ApoAl进行抗原-抗体反应。反应完成后,用透射比浊法检测吸光度的变化反映ApoAI浓度。2 .标本:2. 1病人准备:12小时禁食。2.2类型:血清、肝素或EDTA血浆。3 .标本存放:稳定性:1525C保存可稳定5天;28C保存可稳定2周;-20。C保存可稳定3个月;标本不可反复冻融。4 .标本运输:常温条件下保存运输。5 .标本拒收标准:标本细菌污染的标本。6 .实验材料6.1试剂申能APOAI测定试剂盒(货号:25171002101试剂1525ml;试剂2lX25ml)6.1.1试剂

2、组成试剂1(R1):pH7. 5 100mmolLTris缓冲液聚乙二醇(PEG)表面活性剂,稳定剂适量试剂2(R2):pH7. 5100mmolL适量Tris缓冲液羊抗人APoAl抗体(含稳定齐IJ)6.1.2试剂准备:试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。6.1.4变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。6. 1.5注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95gL)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2校准品

3、:建议使用DiaSys公司提供的TruCalApoAl校准品对自动分析仪进行校准,校准稳定期:4周。具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6 .3质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7 .仪器:奥林巴斯AU100O生化分析仪8 .操作步骤8 .1项目基本参数:参见AUlOOo生化分析仪项目测定参数.SOP文件9 .2仪器操作步骤:参见AUlOOO生化分析仪操作规程.SOP文件10 检验结果的判断与分析11 .质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程

4、.SOP文件。12 .计算方法:按照公司配套校准品使用要求,用3个不同水平的校准液,并以9gL氯化钠溶液为空白,经校准测定,仪器自动对校准品响应量通过合适的数学模型如LOgit/Log,拟合成校准曲线。校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。13 .参考值范围tsl女性:1.201.90gL男性:1.10-1.70gL参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。14 .临床意义载脂蛋白Al(APoAD是高密度脂蛋白(HDL)的主要结构蛋白,它可以去除细胞中的胆固醇,因此具有预防动脉粥样硬化的作用。流行病学研究表明以A

5、poAl表示的HDL水平与冠心病(CHD)的流行率呈负相关。在使用总胆固醇和甘油三酯来过筛冠心病危险时,除检测脂蛋白(a)与载脂蛋白B之外,同时检测载脂蛋白Al能对脂类失调提供更多的信息,也可替代高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测。一些研究表明,当ApoB浓度上升(女性ApoBl.50gL,男性ApoB1.55gL),而ApoAl浓度下降(女性ApoAl1.50gL,男性ApoBl.55gL),而ApoAl浓度下降(女性Apoll.20gL,男性APOAkI.10gL),对于预测CHD危险非常有用。14.操作性能14 .1线性范围:O.Ol2.50gL14.2精密度:精密度的评估是根据NeCLS推荐的标准方法,AUlOOO批内精密度小于3%,总精密度小于3%o用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20X(gL)S(gL)CV(%)天间精密度n=20(每天校)X

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