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1、规模化猪场临床技术支撑与疫病检测、防控方案 农业微生物学国家重点实验室农业微生物学国家重点实验室 华中农业大学动物传染病诊断中心华中农业大学动物传染病诊断中心 武汉科前动物生物制品有限责任公司武汉科前动物生物制品有限责任公司 华中农业大学动物病原微生物室华中农业大学动物病原微生物室 前沿的科研平台前沿的科研平台1.农业微生物学国家重点实验室农业微生物学国家重点实验室2.农业部重大动物疫病与人畜共患农业部重大动物疫病与人畜共患病重点开放实验室病重点开放实验室3.教育部生物药物工程研究中心教育部生物药物工程研究中心研究成果研究项目研究项目 近近5年来，本实验室主持承担年来，本实验室主持承担973项
2、目项目7项、项、863项目项目6项、国项、国家自然科学基金家自然科学基金20项、国家科项、国家科技支撑计划、科技攻关、科研技支撑计划、科技攻关、科研成果转化等国家及省部及课题成果转化等国家及省部及课题50余项余项一名院士一名院士二十三名教授二十三名教授四十名博士研究生四十名博士研究生一百五十名硕士研究生一百五十名硕士研究生华中农业大学动物传染病诊断中心华中农业大学动物传染病诊断中心 专业猪病临床服务团队专业猪病临床服务团队1.农业微生物学国家重点实验室农业微生物学国家重点实验室2.农业部重大动物疫病与人畜共患病重点开放实验室农业部重大动物疫病与人畜共患病重点开放实验室3.教育部国家生物药物工程
3、研究中心教育部国家生物药物工程研究中心一、技术依托一、技术依托二、人才优势二、人才优势1.陈焕春院士、吴斌教授、何启盖教授和周陈焕春院士、吴斌教授、何启盖教授和周诗其副教授和汤细彪博士长期坐诊；诗其副教授和汤细彪博士长期坐诊；2.中心现有博士中心现有博士2名，硕士名，硕士8名，本科名，本科23人，人，专业的临床猪病研究团队；专业的临床猪病研究团队；3.能完成从分子水平到动物群体全方位的临能完成从分子水平到动物群体全方位的临床监测与诊断，配套个性化的防控方案。床监测与诊断，配套个性化的防控方案。产产-学学-研相结合，猪病的问题是兽研相结合，猪病的问题是兽医工作者的头等大事！医工作者的头等大事！解
4、决猪场实际问题，才是硬道理！解决猪场实际问题，才是硬道理！能完成从分子水平、到动物群体全方位临床诊断能完成从分子水平、到动物群体全方位临床诊断支撑项目支撑项目解决临床实际问题解决临床实际问题 建立、完善生猪健康生产与疾病管理档案建立、完善生猪健康生产与疾病管理档案 优化、配套合理的免疫程序与疫病监测评估体系优化、配套合理的免疫程序与疫病监测评估体系 规范猪场药物的管理与科学保健程序的制定规范猪场药物的管理与科学保健程序的制定 流行疫病的临床诊断、实验室诊断与重大疫情的控制流行疫病的临床诊断、实验室诊断与重大疫情的控制 长期跟踪、监测猪场病原，建立并分析猪场流行病原库长期跟踪、监测猪场病原，建立
5、并分析猪场流行病原库 综合防治、控制本场流行存在的顽固性病原，提高生产成绩综合防治、控制本场流行存在的顽固性病原，提高生产成绩 猪瘟、猪伪狂犬病的净化与根除猪瘟、猪伪狂犬病的净化与根除 猪场技术人员的业务培训与专业技能指导猪场技术人员的业务培训与专业技能指导病原谱的建立病原谱的建立1 1、剖检流程与临床解剖诊断、剖检流程与临床解剖诊断2 2、细菌学检测流程、细菌学检测流程处理处理接种接种培养培养检测检测镜鉴镜鉴生化鉴定生化鉴定PCR鉴定鉴定 3 3、常见病毒学的检测工作流程、常见病毒学的检测工作流程 特异性试验特异性试验多重多重PCR检测方法检测方法检测检测PRV-PPV-PCV2三种三种DN
6、A病毒的多重病毒的多重PCR 病毒学检测注意事项病毒学检测注意事项 病毒的定性检测病毒的定性检测 病毒的定量检测（实时荧光定量检测）病毒的定量检测（实时荧光定量检测）病毒的分子测序病毒的分子测序病毒学检测：病毒学检测：3个工作日个工作日分子测序：分子测序：7-8个工作日个工作日弓形虫病弓形虫病PCRPCR检测结果检测结果 4 4、寄生虫学检测、寄生虫学检测附红细胞体附红细胞体PCRPCR检测结果检测结果 M 2000bp Marker 1、猪附红细胞体猪附红细胞体PCR扩增产物扩增产物 2、阴性对照阴性对照寄生虫学检测：寄生虫学检测：3个工作日个工作日5 5、病理学诊断、病理学诊断 酶联免疫吸
7、附试验(ELISA)乳胶凝集 血凝抑制试验 胶体金检测拭纸条 血相、血常规检测，健康水平评估血相、血常规检测，健康水平评估6 6、血清抗体评估检测、血清抗体评估检测血清学检测：血清学检测：3个工作日个工作日7 7、检测结果会诊与控制方案提出、检测结果会诊与控制方案提出优秀科研成果的生产转化基地，为中国优秀科研成果的生产转化基地，为中国养猪业健康发展提供强大的技术支撑养猪业健康发展提供强大的技术支撑！科技创造价值，科前回报社会！科技创造价值，科前回报社会！规模化猪场常见临床问题与防治对策规模化猪场常见临床问题与防治对策汤细彪汤细彪 博士博士 华中农业大学动物传染病诊断中心华中农业大学动物传染病诊
8、断中心Email:Email: 手机：手机：1397126073613971260736QQ:450794077QQ:450794077记忆中伤痛：记忆中伤痛：20062010 病！病！病！病！病！病！养猪业的灾难养猪业的灾难 2006.江西、湖南江西、湖南2009河南、安徽河南、安徽2007.湖北、四川、湖北、四川、山东、福建、河北、山东、福建、河北、河南河南2008.湖北、四川、湖北、四川、山东、福建山东、福建2010 广西、江西、湖北、安徽、河南、广西、江西、湖北、安徽、河南、吉林、辽宁、河北、四川、云南疫情吉林、辽宁、河北、四川、云南疫情 2010年产房仔猪的问题 2010年保育仔猪的
9、问题 2010年育肥猪问题 2010年母猪群繁殖障碍性问题20102010年临床主要流行疫病年临床主要流行疫病20102010年产房仔猪的流行现状年产房仔猪的流行现状 产房仔猪的顽固性腹泻和呼吸道问题产房仔猪的顽固性腹泻和呼吸道问题 顽固性腹泻顽固性腹泻 肾脏有出血点肾脏有出血点 肾脏无明显病变肾脏无明显病变 顽固性腹泻，肠系水样腹泻物顽固性腹泻，肠系水样腹泻物实验室病原学检测实验室病原学检测 猪瘟、伪狂犬是引起顽固性腹泻的重要原因；猪瘟、伪狂犬是引起顽固性腹泻的重要原因；胃肠生态平衡破坏；胃肠生态平衡破坏；副猪嗜血是引起产房仔猪呼吸系统疫病的重要病原。副猪嗜血是引起产房仔猪呼吸系统疫病的重要
10、病原。腹泻疫病防控方案腹泻疫病防控方案免疫：免疫：母猪全群普打伪狂犬HB-98 启动猪瘟超免 0-1d：伪狂犬HB-98滴鼻；保健：保健：微生态制剂乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热链球菌；预防程序：预防程序：治疗程序：治疗程序：1 1、猪瘟：最重要的疾病、猪瘟：最重要的疾病 急性败血型猪瘟-主要发生于保育猪和育肥猪。慢性型猪瘟-腹泻症状；纽扣状溃疡 猪瘟病毒的持续感染可以造成母猪繁殖障碍，出现流产、产死胎和弱仔，先天感染使带毒猪发生免疫耐受，给免疫预防带来困难。猪瘟与其它细菌疾病混合发生 猪瘟抗体易受免疫抑制病的干扰（一）防控仔猪顽固性腹泻，做好（一）防控仔猪顽固性腹泻，做好“猪瘟猪瘟”的防控的防
11、控猪瘟疫苗的特点猪瘟疫苗的特点u细胞苗：用细胞培养；常规免疫细胞苗：用细胞培养；常规免疫u脾淋苗：用家兔制备，适用于紧急接种脾淋苗：用家兔制备，适用于紧急接种u浓缩苗：商品化的名字，按照剂量使用即可浓缩苗：商品化的名字，按照剂量使用即可猪瘟的免疫程序u猪群发生猪瘟时超前免疫：免疫后2小时才吃母乳，否则无效35日龄-70日龄分别作2次免疫u猪群稳定时 25-30日龄；60-65日龄u 种猪群跟胎免疫，母子同打 25-30日龄；一年2-3次 上世纪80年代末90年代初，我国猪群中流行、爆 发以母猪产死胎、木乃伊、畸胎为主要临床症状 的重要传染病，给我国养殖业造成重大经济损失。新生仔猪大量死亡、日龄
12、内仔猪死亡率达100%，断奶仔猪发病率20-40%，死亡率10-20%，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。公猪不育、发生睾丸肿胀、萎缩，失去种用能力。猪伪狂犬病是危害猪群健康养殖重大的传染病之一猪伪狂犬病是危害猪群健康养殖重大的传染病之一（二）防控仔猪顽固性腹泻，须做好（二）防控仔猪顽固性腹泻，须做好“伪狂犬病伪狂犬病”的防控的防控 母猪产健仔率不高母猪产健仔率不高 仔猪的顽固性腹泻与呼吸道问题仔猪的顽固性腹泻与呼吸道问题 育肥猪的呼吸道症状，是育肥猪的呼吸道症状，是PRDC的原因之一的原因之一 2-3 老态未去，新的表现形式又来！老态未去，新的表现形式又来！顽固性腹泻顽固性腹泻呼吸系统综合症
13、呼吸系统综合症3.3.选择合适伪狂犬疫苗选择合适伪狂犬疫苗1：灭活疫苗，TK（帮凶）基因没有缺失，但已灭活，体液免疫反应；2：弱毒疫苗Bartha株，分离自牛，TK基因未被缺失，对仔猪不安全；3：基因工程疫双基因双基因TK-/gG-TK-/gG-（中牧合作疫苗）（中牧合作疫苗）;TK-/gE-;TK-/gE-弱毒疫苗（弱毒疫苗（Begonia;NIA783)Begonia;NIA783)1 1）安全、有效，既能免疫母猪，又能免疫仔猪；）安全、有效，既能免疫母猪，又能免疫仔猪；2 2）既能进行体液免疫又能激发粘膜免疫，同时产生非特异性细胞免疫，）既能进行体液免疫又能激发粘膜免疫，同时产生非特异性
14、细胞免疫，3 3）即可产生特异性中和抗体，又能激发细胞因子，清除体内）即可产生特异性中和抗体，又能激发细胞因子，清除体内 其他病毒，显著提高猪群健康水平。其他病毒，显著提高猪群健康水平。推广应用要求：推广应用要求：传统疫苗满足不了临床要求：传统疫苗满足不了临床要求：科前公司伪狂犬疫苗科前公司伪狂犬疫苗HB-98HB-98研发历程研发历程全球领先第三代：全球领先第三代：HB-98现在：不仅是好现在：不仅是好疫苗，疫苗，具有时代具有时代责任责任抗病毒抗病毒特殊疗效特殊疗效养猪人都知道养猪人都知道HB-98研究研究临床临床2020年年种毒：中国流产母猪种毒：中国流产母猪-鄂鄂A株株免疫力确实的免疫力
15、确实的基础基础研究研究一代产品：灭活疫苗一代产品：灭活疫苗早期：控制伪狂犬早期：控制伪狂犬立下汗马功劳立下汗马功劳陈院士学成归国陈院士学成归国临床临床控制繁殖障碍问题控制繁殖障碍问题研究研究临床临床二代二代：TK-/gG-TK-/gE-中期：进一步控制中期：进一步控制伪狂犬病，伪狂犬病，杜绝繁殖障碍杜绝繁殖障碍扩大影响，获国家奖励扩大影响，获国家奖励我的名字叫我的名字叫HB-98:HB-98:我是我是 三基因缺失三基因缺失 TK-/gG-/gE-TK-/gG-/gE-基因工程疫苗基因工程疫苗 猪伪狂犬病活疫苗（猪伪狂犬病活疫苗（HB-98HB-98株）的特点与优势株）的特点与优势 1、前沿分子
16、技术，聚焦地方毒株 农业微生物学国家重点实验室农业微生物学国家重点实验室 地方毒株分子亚型对应，针对性强；地方毒株分子亚型对应，针对性强；本动物分离株，适应性与免疫原性更强；本动物分离株，适应性与免疫原性更强；人工定向缺失关键毒力基因，科学合理，人工定向缺失关键毒力基因，科学合理，取长补短，更取长补短，更 安全、有效安全、有效。2 2、安全、有效的伪狂犬活疫苗必须缺失、安全、有效的伪狂犬活疫苗必须缺失TKTK基因基因伪狂犬病毒属于疱疹病毒科，目前，多种与毒力和免疫原性相关的基因均已被定位和测序，如TK、gG、gE、gB、gC、gD、gI等，其中TK为致命的凶手，是该病毒主要的毒力基因，控制病毒在神经组织内的复制。TK基因的存在加强了伪狂犬病毒的潜伏性，犹如一颗定时炸弹，增加了毒力返强和野毒重组的可能性！安全的基因工程疫苗必须缺失TK基因，未缺失TK基因的伪狂犬疫苗，不能完全清除野毒对猪群的威胁 伪狂犬病毒编码的伪狂犬病毒编码的gGgG蛋白是一种趋化因子结合蛋白，由于蛋白是一种趋化因子结合蛋白，由于gGgG与机体与机体本身的趋化因子结合，使本身的趋化因子结合，使趋化因子趋化因子不能发挥功
