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1、酸性土壤速效磷试剂盒说明书徽量法100T6S注意r正式消定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定.测定意义,速效磷是土境中订被植物吸收的磷组分,包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷,土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一.测定原理,用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷,用用锌抗比色法测定。自备实验用品及仪1天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿川6孔板、震荡仪。试剂组成和配制I提取液:液体IoomLXl瓶,4寸保存.试剂一:液体6mLxl支,4匕保存。试剂二:粉剂Xl支,4P避光保存。临用前加2ml蒸循水溶解。用不完的试剂4C保存。试剂三:粉剂3支,4.C避光保存。临用前加I
2、mI蒸循水溶解。现配现用。样本处理:新鲜土样风干,过30-50目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为1:510的比例(建议称取约0.1g土样,加入ImL提取液),振荡提取30min,100g,25C离心IOmin,取上清液待测。测定步Oh1、取试剂三一支,加入Iml蒸Ifl水充分溶解待用。2、显色液的配制(可测50个样):取EP管一支,加入660L试剂一,再加入100L试剂二,充分混匀后,再加入240l试剂三,充分混匀待用;配好的显色液应为黄色,若变蓝则为磷污染;显色液必须现配现用;若一次性测不了50个样,可按比例缩小各试剂体积。3、操作表空白管测定管样本(L)40提取液(L)40显色
3、液(HL)2020H2O(L)140140充分混匀,25t静置30min于微量石英比色血/96孔板中,蒸憎水调零,测定66Onm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,A:A测定管-A空白管。空白管只要做一管。计算公式,a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线:v=01252x-0.0041,R2=0.9957,X为标准品浓度(mgL),y为吸光值。速效磷含量(mgkg干重)=(A+0.0041)+0.1252V样+(WXV样+V样总)=7.987x(A+0.41)+WV样:样本体积,0.04mL:V样总:加入提取液体积,1mL.W:样本质量,约0.1gb.用96孔板测定的计算公式如下标准曲线:V=0.0626x-0.41,R=0.9957,X为标准品浓度(mgl),y为吸光值。速效磷含量(mgkg干甫)=(A+0.0041)+0.0626*V样+(WXV样+V样总)=15.97(A+O.41)WV样:样本体积,0.04mL:V样总:加入提取液体积,1mL.W:样本质量,约0.1g注意事项,1.配好的显色液当天用完,变蓝则不能使用。2.AA线性范围为:0.01-1,5.3.标准曲线线性范围为:0.1mg/L-20mg/Lo