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1、消毒与灭菌效果监测方法简介 在消毒与灭菌效果监测方法中，研究最多、应用较普遍的为压力蒸汽、电离辐射与环氧乙烷三大灭菌技术灭菌效果的监测方法。对紫外线与其它化学消毒剂消毒效果的监测方法也有研究与应用。除电离辐射外，其它方法消毒与灭菌效果的监测，在医院中较常见。方法可归纳为4类：1.仪表监测 2.化学监测 3.生物监测 4.程序监测1 仪表监测 通过仪表测定有关参数，间接了解是否可达到消毒或灭菌的要求。1.1 常用仪表温度计(留点温度计)压力计(负压压力计)湿度计压力、温度、时间自动记录仪紫外线强度计电离辐射强度计电离辐射剂量仪乙醇水溶液比重计水中臭氧检测仪1.2 注意事项(1)用前应校正或定期校
2、正(2)布放于有代表性部位 2 化学监测 根据化学物质的物理化学变化，测知杀菌因子的剂量，间接判断是否达到消毒或灭菌的效果。2.1 监测对象 压力蒸汽灭菌 干热灭菌 紫外线强度 电离辐射剂量 化学消毒剂2.2 指示材料2.2.1 压力蒸汽灭菌常用指示材料 化学指示胶带(签)化学指示卡(管)综合性化学指示剂 (移动式化学指示剂)化学指示试纸 BD试验指示图2.2.2 干热灭菌常用指示材料 化学指示剂 移动式化学指示剂2.2.3 化学消毒剂常用指示材料 环氧乙烷指示卡 蒸汽-甲醛气体灭菌化学指示剂 空气臭氧浓度检测仪(管)消毒剂浓度试纸 戊二醛浓度监测卡(管)2.2.4 其它指示材料 紫外线强度指
3、示卡 电离辐射指示剂2.3 监测方法2.3.1 压力蒸汽灭菌监测 硫磺管、苯甲酸管不能用 BD试验每天一次，用30cm25cm 2528cm布巾包 每包外用胶带、内放卡美国医疗器械改进协会规定：每包外用胶带、内放卡 每天第一次用预真空压力蒸 汽灭菌器时，BD试验2.3.2 干热或消毒剂气体灭菌监测 将化学指示剂放于包中央 布放于最难达到灭菌的部位 (或消毒器内各层中央与四角)2.3.3 紫外线强度监测 开灯照5 min后无异常 置卡于灯中央下方垂直1 m处 照射1 min 避免日光直射到卡2.3.4 消毒液浓度监测 试纸浸湿后0.51.0 min比色 3 生物监测 在监测灭菌效果时，用菌的存活
4、与否直接证明是否达到要求。在监测消毒效果时，用测定对菌的杀灭率判断是否达到要求。3.1 基本要求 灭菌 用菌片(5105 5106cfu/片）消毒 用菌片或菌悬液(菌药混合液 中含菌量5105 5106cfu/ml)不同灭菌方法的效果监测，应采用不同的菌种，并对其抗力有一定要求。灭 菌 生 物 D值 存活时间 杀灭时间 方 法 指示剂 (min)(min)(min)压力蒸汽 嗜热脂肪杆菌 (1210.5饱 灭菌 (ATCC 7953)芽胞 和蒸汽条件下)1.31.9 3.9 19.0干热灭菌 枯草杆菌黑色变种 (1605 (ATCC 9372)芽胞 条件下)1.31.9 3.9 19.0环氧乙
5、烷 枯草杆菌黑色变种 (EO 600mg/L30mg/L,54 灭菌 (ATCC 9372)芽胞 2,RH60%10%条件下)2.55.8 7.5 58.03.2 监测方法3.2.1 压力蒸汽灭菌监测 单片菌片装于牛皮纸袋中 放入标准测试包(30cm30cm25cm)中央或最难透汽处(2片/包)，同时 放化学指示卡 置于灭菌器近排气口处(上方)灭菌后，接种于溴甲酚紫蛋白胨培养 液中，56培养7 d(24 h初步看)设阴性、阳性对照 美国医疗器械改进协会规定生物指示剂应在下列情况下使用:(1)新灭菌器装置后检查 (2)灭菌器大修后验收 (3)常规监测 每周(最好每天)1次 (4)灭菌人体移植器材
6、(待培养结果阴性后，器材才可使用)(5)周期性质量检测美国所用标准测试包分两种：吸水手术巾包 混装包吸水手术巾包：含16条吸水手术巾，外包以双层布 23cm23cm15cm(1.5 kg)生物指示剂放于8与9条手术巾间中央 同时放化学指示卡于其侧 混装包：含棉布手术衣3件以上，吸水手术巾12条，30个纱布方，5个纱布卷，一条手术大单，外以布包两层。30cm30cm50cm(4.55.5kg)生物指示剂放于包中央 同时将化学指示卡放于其上方或下方隔一手术巾处3.2.2 干热或消毒剂气体灭菌监测干热 菌片装入无菌试管(1片/管)布于消毒器内各层对角线内、外角(2管/点)消毒剂 菌片装入布(纸)袋
7、布于器内各层最难达到灭菌处(或中央与 四角)的物品中间灭菌后，接种于营养肉汤中(消毒剂需含中和剂)，37培养7 d(3 d初步看)设阴性、阳性对照3.2.3 物品(手)表面消毒效果监测物品、手表面可染试验菌或用其含自然菌(1)物理因子或消毒剂气体：菌片放入无菌平皿中(2片/皿)，小型染菌物品 直接布放 消毒器每层布放2份(内、外)5份(中央、四角)(2)消毒液：平皿或适当容器盛消毒液 菌片或小型染菌物品(手)浸泡消毒液中 对大型染菌物品表面喷消毒液 消毒后，对菌片或涂抹采样作活菌计数 设阳性(不消毒)、阴性对照采样、活菌计数：菌片投入含10 ml采样液试管中 物品、手在采样部位用棉拭往返涂擦2
8、次，将棉拭头放入含10 ml采样液试管中 振打试管以洗脱菌 取洗脱液培养48 h 计数菌落数 计算杀灭率3.2.4 空气(自然菌)消毒效果监测消毒前、后分别用平板沉降15 min采样37培养48 h平板直径9 cm，距地面1.5 m布于中央、四角(30 m2布中央与对角线二角)有条件者可用FA-1型多级撞击式采样器3.2.5 监测消毒液微生物污染取消毒液1.0 ml加入含9.0 ml相应中和剂试管中混匀取0.2 ml涂抹平板或0.5 ml倾注琼脂混匀20培养7 d：霉菌37培养72 h：细菌总数细菌总数(cfu/ml)=平板菌落数20(或50)3.3 注意事项(1)检测化学消毒剂效果要用中和剂
9、 消毒 加于采样液中 灭菌 加于培养基中(2)复方中和剂应注意成分间拮抗(3)中和剂应经试验证明合适 附表 XXX中和剂试验结果组 别 平均菌数(cfu/ml)消毒剂+菌液(片)0 4.5 0.5消毒剂+菌液(片)+中和剂 20 0.5 4.5中和剂+菌液(片)204 000(中和剂+消毒剂)+菌液(片)168 000正常菌液(片)对照 202 000未接种菌培养基对照 0（接种平皿0.5 ml，结果为3次试验平均）4 程序监测 依消毒或灭菌处理程序，作回顾性或前瞻性监测。回顾性 据仪表的自动记录或工作人员的现场记录，判断是否达到消毒或灭菌的要求。前瞻性 据拟灭菌物品原始污染菌量、灭菌处理方法的杀菌D值和灭菌保证水平(10-6)，设计处理剂量。结 语 消毒与灭菌效果监测，尤其是生物监测，是一件技术性较强的工作，稍有差错即得不出正确的结论。因此，负责监测的工作人员责任心要强，要经过培训。
