cgMLST用于中国结核分枝杆菌基因型分型的效果评估2024.docx

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1、cgMLST用于中国结核分枝杆菌基因型分型的效果评估202401背景建立覆盖一个地区,甚至全国的结核病传播监测系统有助于监测结核病的传播动态,实现结核病的精准防控。全基因组测序(WGS)已经成为监测传播的主要工具,虽然具有极高的分辨率,但在大规模监测数据分析上存在以下缺陷:一是分析速度慢;二是没有统一的分析流程;三是分析结果储存要求高。而核心基因组多位点序列分型(CgMLST)作为一种分析速度快、结果易标准化且占用存储空间小的基因型分型方法,具备监测大规模结核病传播的潜力,在欧洲地区已证明了该方法的可行性,而在北京型(neage2)菌株流行为主的地区,其分型效果仍有待评估。本研究评估了cgML

2、ST用于我国不同地区结核分枝杆菌基因型分型的效果。02方法结核分枝杆菌临床菌株的WGS数据来源于已发表的在我国5个地区开展的分子流行病学研究。采用已发表的包含2891个核心基因位点的CgMLST分型方案鉴定每株菌株的基因型;单核苗酸多态性(SNP)基因型成簇的阈值为12个SNPs;利用受试者工作特征曲线(ROC)分析和流行病学调查数据确定CgMLST基因型成簇的阈值以SNP分型为标准,计算cgMLST成簇分析的敏感度、特异度及一致率;利用Pegas包计算菌株核甘酸多态性(ffi)以评估菌株的遗传多样性,并利用logistic回归分析菌株遗传多样性和谱系对一致率的影响。03结果本研究共纳入5个研

3、究现场6240株菌株的WGS数据,分别为深圳市宝安区1696株、上海市松江区2268株、四川省武胜县1270株、黑龙江省五常市694株和西藏自治区312株。以SNP分型为标准,ROC分析和流行病学调查数据确定CgMLST基因型成簇的阈值为10个基因位点。与SNP分型比较,CgMLST成簇分析的敏感度和特异度分别为99.6%和96.3%,一致率为97.1%;两种方法的一致率在不同现场存在差异(89.1%98.7%以菌株核昔酸多态性(f直)衡量不同地区菌株的遗传多样性,发现四川省武胜县、上海市松江区和深圳市宝安区分别为2.13X10-4、1.87x10-4和1.6010-4z高于全国平均水平(1.55x10-4),定义为高遗传多样性地区;黑龙江省五常市和西藏自治区分别为1.3410-4和1.23x10-4,低于全国平均水平,定义为低遗传多样性地区。logistic回归分析发现菌株谱系对一致率没有明显影响;而一致率与菌株遗传多样性显著相关,高遗传多样性地区菌株成簇的一致率为98.1%(5132/5234),低遗传多样性地区的一致率为92.2%(928/100604结论CgMLST基因型分型方法适用于我国结核分枝杆菌临床菌株分型,具有与SNP分型相似的分辨力;其具有分析速度快、结果易标准化,且占用存储空间小等优势,有望更好地在全国范围内实现实时监测结核病传播的目的。

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