《血清铁浓度检测试剂盒说明书.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《血清铁浓度检测试剂盒说明书.docx(2页珍藏版)》请在第壹文秘上搜索。
1、血清铁浓度检测试剂盒说明书微量法100T/96S注意:正式测定之前选择23个预期差异大的样本做预测定。澜定意义:血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。渊定原理:亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe?+,Fe?+进一步与2,2l联毗咤显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。自备仪器和用品:离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰醋酸、氯仿和蒸储水。试剂组成和配置:试剂一:粉剂Xl瓶,4匕保存。临用前配制,加入15mL蒸储水充分溶解。试剂二:粉剂Xl瓶,4七保存。临用前配制,加入469L冰醋酸,加入15
2、mL蒸储水充分溶解。标准液:液体ImLXl支(EP管),100molLFe3+标准液,4保存。渊定:1 .分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到520nm,蒸储水调零。2 .标准液解冻:提前取出标准液,置于室温卜充分解冻后混匀。3 .空白管:取EP管,依次加入125L蒸储水,125L试剂一,125L试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62L氯仿(自备),充分震荡混匀;室温I(X)OOrPm,离心IOmin,小心吸取上层液210L,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A空白管。4 .标准管:取EP管,依次加入125L标准液,125L试剂一,125L
3、试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62L氯仿,充分震荡混匀;室温100OOrpm,离心IOmin,小心吸取上层液210L,加入微量石英比色皿/96孔板,于52Onm测定吸光度,记为A标准管。5 .测定管:取EP管,依次加入125L血清,125L试剂一,125L试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62L氯仿,充分震荡混匀;室温100OOrpm,离心IOmin,小心吸取上层液210L,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A测定管。注意:空白管和标准管只需测定一次。血清铁浓度计算公式:血清铁含量(moldL)=C标准液X(A测定管一A空白管)(A标准管一A空白管)xV总、=10(A测定管一A空白管)(A标准管一A空白管)C标准液:100molLFe3+标准液;V总:标准液总体积ImL;IdL=O.1L。注意事项:1、血清铁含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被铁污染。2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。3.最低检出限为lmolL0