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1、ICS65.020.20CCSB60/79广西壮族自治B45区地方标准DB45TXXXX-XXXX春石斛杂交育种技术规程TechnicalcodeofpracticeforcrossbreedingofNobiIetypeDendrobium（征求意见稿）本稿完成日期：2023年10月8日在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。XXXX -XX-XX 实施XXXX-XX-XX发布广西壮族自治区市场监督管理局发布本文件按照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的
2、责任。本文件由广西壮族自治区农业科学院提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西壮族自治区亚热带作物研究所、广西壮族自治区林业科学研究院、南宁青秀山风景名胜旅游开发有限责任公司、广西壮族自治区国有钦廉林场。本文件主要起草人：罗清、黄歆怡、王华新、陆祖正、韦妙琴、龚建英、谢振兴、李秋荔、潘文、丁丽琼、池昭锦、汪小玉、覃茜、唐靖、於艳萍、沈丽娟、毛立彦、卢业飞、唐毓玮、苏莉花。春石斛杂交育种技术规程1范围本文件界定了春石斛杂交育种涉及的术语和定义，规定了育种流程及目标、杂交、无菌苗培育、子代测定及筛选优良单株、优良单株扩繁等要求，描述了档案管理、新品种登录、审定和植物新品种权申请等内容。本文件适用于广
3、西壮族自治区行政区域内春石斛人工控制杂交育种。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T2758植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南石斛属DB45/T1783石斛兰组培快繁技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1石斛DendrobiumSw.兰科石斛属历植物，为兰科第二大属，全球约有2000种，分布于亚洲热带、亚热带及大洋州，我国原产80种，除个别种类外，皆为附生草本植物（中国原产的均为附生，其他国家发现有极个别
4、为地生）。3.2春石斛NobiIetypeDendrobium石斛属植物中的落叶类石斛，自然花期在春季的35月，花色鲜艳多彩，具有极高的观赏价值。3.3花朵flower石斛花朵由醇片、花瓣、蕊柱、子房和苞片5部分组成。3.4蕊柱Gynandrium蕊柱也称鼻，顶端是药腔，内有4个花粉块，外面盖有药帽，花药之下近蕊柱顶端处有一腔穴，称为蕊腔,是石斛兰接收花粉的地方。在花药和蕊腔之间有蕊喙,主要用于防止自花授粉和协助异花授粉。3.5单交singlecross单交指用两个春石斛亲本进行杂交。3.6单交后回交backcrossaftersinglecrossing指用两个春石斛亲本杂交，从其一代杂交种
5、中选择优良单株和亲本之一回交，再从回交后代中选育春石斛新品种。3.7单交后自交或姐妹交selfingaftersinglecrossingorsistercross指用两个春石斛亲本杂交后，从一代春石斛杂交种中选择单株自交或进行姐妹交，后从这些自交或姐妹交的后代选育出春石斛新品种。3.8自交后杂交selfingafterhybridization指对两春石斛亲本先进行系统育种，然后选株杂交，从杂交后代中选育春石斛新品种。3.9复合杂交compositehybridization指3个或3个以上的亲本参与的杂交。4育种流程及目标4.1 育种流程明确育种目标一选择杂交亲本一配置杂交组合一杂交种子培
6、养和试管苗移栽一杂交后代种植和优良单株选择一优良单株繁殖，形成株系一株系栽培、性状鉴定和稳定性观察一档案记录和管理一新品种登录、审定和植物新品种权申请。4.2 杂交方式杂交方式包括单交、单交后回交、单交后自交或姐妹交、自交后杂交、复合杂交。4.3 育种目标制定春石斛育种目标分花色（粉红、五指花系、紫红花系、白色花系、黄色花系、线条花）、株型（大型、中小型、迷你型）、开花性（早花、易开花、多花、香花）、抗性（抗病性、抗虫性等）。5杂交5.1 亲本选择与选配根据育种目标选择健壮、无病虫害，非第一次开花，性状稳定，可育的春石斛作杂交亲本进行杂交。育种亲本选择见表1。表1春石斛育种亲本选择育种目标亲本
7、选择花色粉红、五指花系以粉红色至粉紫色春石斛为基本育种亲本，往浅色系筛选则育出粉红、五指花系。紫红花系选择具紫红色系的春石斛亲本进行杂交白色花系以粉色原种与白色系反复杂交可筛选出白花色系育种目标亲本选择黄色花系重要原种有束花石斛(DendrObiUmchrysanthum)尖刀唇石斛(,Dendrobiumheterocarpum)等黄花系做亲本株型大型育种选大型种做亲本中小型育种重要原种有细茎石斛(DendrObiUmmoniIiforme)、独角石斛(DendrobiUfflUniCUm)等小型种做亲本开花性育种早花选择开花早的优良品种作亲本易开花选择花芽对低温要求不高的优良品种作亲本多花
8、选择花量大、多节开花的优良品种作亲本香花选择具有香味的优良品种作亲本抗性抗病性选择抗病性强的优良品种作亲本抗虫性选择抗虫性强的优良品种作亲本其他生长势育种有倍数芽特性的亲本，可选育出缩短生长周期的后代5.2 工具准备照相机、记录本、铅笔及消毒过的镜子、标签(2X2cm).玻璃皿等。5.3 人工授粉根据拟定的杂交组合进行人工授粉，授粉时间以母本花朵开放4d6d,父本花朵开放Id3d内为宜，授粉时先将母本花朵的唇瓣和花粉块除去，用消毒过的镜子从父本药腔内取花粉块放入干净的玻璃皿中。将父本的花粉块送入母本蕊腔中。5.4 标记记录用铅笔标明父母本、花朵编号、授粉口期和操作人等，对授粉的花枝挂上标签，并
9、登记在记录本。5.5 授粉后管理授粉后子房膨大时疏果，每株保留2-3个幼果。5.6 杂交果采收杂交后12Od200d,观察到果皮黄绿色，开始皱缩且开裂前采收果实。5.7 杂交果保存采收后将果荚装入封口袋后放置4C冰箱保存，可保存一周。6无菌苗培育6.1果荚处理将葩果用体积浓度2%洗洁精水溶液浸泡Iomin,然后用自来水冲洗IOmin,在超净台上将朔果置于5%次氯酸钠溶液中消毒15min,无菌水冲洗23遍，再次用5%次氯酸钠消毒15min,取出后用无菌水冲洗23次，最后用消毒滤纸去除翔果表面的水分。6. 2无菌播种将处理好的翔果在超净台内用手术刀剖开，挑取种子接种于诱导培养基中。6.3 增殖分化
10、、生根培养增殖、分化、生根培养参照DB45/T1783的规定执行。6.4 炼苗及移栽炼苗及移栽参照DB45/T1783的规定执行。6.5 移栽后管理管理参照DB45/T1783的规定执行。7子代测定及筛选优良单株7.1 子代测定杂交后代开花株按照NY/T2758进行性状观测。7.2 优良单株选择根据杂交育种方向选择杂交后代优良植株。可在整个生育期进行选择，在苗期对抗病性、抗逆性、株型和叶艺等进行选择；在花期对花色、花型和香味等进行选择。8优良单株扩繁1 .1优良单株繁殖，形成株系选取优良单株的幼茎或嫩叶为外植体进行组织培养扩繁，组培快繁技术参照DB45/T1783的规定执行,2 .2株系栽培对
11、筛选植株群体组培移栽参照DB45/T1783进行管理。移栽后成大苗进行栽培管理8 .2.1大苗种植以水苔、3cm的树皮或椰块等作为作为大苗移栽基质，选用2.5寸营养杯将原来小杯的植株进行换盆。9 .2.2温度、湿度管理放置于温度为22C32C,空气相对湿度为60%80%,通风良好且空气流通无碍的场地。10 2.3光照管理提供适宜的光照条件，以50%60%的遮光率为宜。11 2.4水分管理见盆面干燥时可浇水，以水从盆底流出为度。8. 2.5肥料管理以基肥为主，按每株22.5g,每3个月撒施1次有效成分N:P:K为14:13:13的固体缓释肥；结合浇水，根外追肥，薄肥勤施，每15天喷施一次叶面肥，
12、直至得到成苗。冬季一般不施肥，必要时可用磷酸二氢钾1000倍液根外追肥。8.3特异性、一致性、稳定性观测对新的株系按照NY/T2758进行性状鉴定及稳定性的观察。9档案管理建立生产技术管理档案(见附录A),记录杂交组合及杂交授粉情况。技术档案要有专人记载，技术负责人审查后存档。10新品种登录、审定和植物新品种权申请10.1国际登陆可在英国皇家园艺学会(RoyalHorticulturalSociety,RHS)进行国际登录。10.2国内登陆可在中国兰花协会和中国兰花学会联合组成的中国兰花品种登陆注册审查委员会进行国内登录。10.3新品种审定和植物新品种权申请可向农业农村部或国家林业和草原局植物新品种保护办公室提出植物新品种权申请。附录A（资料性）生产技术档案表A.1给出了杂交组合及杂交授粉记录表。表A.1杂交授粉记录表授粉日期母本辛父本授粉花朵数结果数量前果采收日期前果采收数无菌播种日期移栽日期首次开花日期杂交培育人
