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1、蚌埠医学院细胞工程课程教学大纲课程编号：课程名称：细胞工程英文名称：Ce1.1.Engineering课程类型：专业课总学时：30学时理论课学时：24学时实验学时：6学时适用对象：供生物技术专业本科使用。课程简介：细胞工程是应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法，按照人们的需要和意图，在细胞水平上进行遗传操作，包括重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，通过细胞融合、核移植、染色体转移等技术，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种和新产品的生物工程技术。20世纪生物学领域取得了前所未有的成就。作为生物工程主体之一的细胞工程，其应用研究方面取得的成果极大地促进了农业、
2、畜牧业、食品工业、医药工业的发展。作为高新技术支柱之一的细胞工程技术必将对人类社会发展产生越来越大的影响。本课程主要介绍细胞工程相关基础知识,研究方法和技术及最新研究进展,以及具典型意义的应用实例。一、课程性质、目的和任务细胞工程课程是生物技术专业学生的一门重要的必修专业课,授课对象为该专业本科学生。生物工程专业学生通过本课程的学习，掌握生物组织、器官及其细胞离体培养的原理与技术，以及细胞融合与杂交瘤技术、单倍体与多倍体育种技术、细胞重组与克隆技术、胚胎工程技术、基因导入等的基本原理、技术路线和方法，为从事生物学领域的相关研究及其与细胞工程有关的生物技术产业奠定良好的理论和技术基础。本课程是为
3、生物科学专业学生在修完生物化学、微生物学和细胞生物学等课程之后开设的一门课，目的在于使学生开阔视野，拓宽知识面，扩展工作的适应性，希望通过学习之后，能在适应学科交叉渗透的发展形势有一定的帮助。二、教学基本要求通过本课程的学习，使学生系统掌握该门学科形成与发展，理论与原理，技术与方法等基础知识，结合科研实际以及最新研究动态，使学生对本课程有一个全面的了解；以适应后基因组时代在教学、科研和生产开发各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。三、教学内容及要求(-)绪论【掌握】细胞工程的概念；细胞工程主要研究内容。【熟悉】细胞工程的重要应用。【了解】生物技术的概念；生物技术的研究领域；细胞工程的发展历史
4、。(二)动物细胞培养【掌握】清洗消毒过程与方法；无菌操作技术；培养细胞的观察方法。【熟悉】细胞培养中常用的染色方法；细胞的冻存与复苏过程。【了解】了解细胞培养常用仪器设备、使用方法、注意事项；培养细胞的生物学特征；细胞的克隆培养法及常用组织分离的方法。（三）细胞融合与单克隆抗体【掌握】细胞融合的概念、技术方法；单克隆抗体的概念；杂交瘤技术生产单克隆抗体的技术原理与制备步骤。【熟悉】细胞融合的基本原理；杂交瘤细胞筛选；单克隆抗体大量制备、分离纯化、检测方法。【了解】细胞融合的影响因素；原生质体的制备；单克隆抗体的应用；人源性单克隆抗体的制备方法。（四）胚胎工程【掌握】胚胎工程概念；对哺乳动物胚胎
5、进行操作的原理、方法和技术。【熟悉】精子采集，活能，卵细胞回收与成熟培养；胚胎发育的基本过程、体外受精、胚胎移植技术、胚胎分割技术、早期胚胎的体外培养、动物的性别控制方法。【了解】胚胎工程的定义和发展历史，胚胎冷冻保存技术；了解试管婴儿和胚胎移植技术。（五）细胞核移植与克隆技术【掌握】动物克隆的操作原理、方法和技术过程。【熟悉】核移植技术原理（包括胚胎细胞核移植技术、干细胞核移植技术、体细胞核移植技术），核移植技术的一般操作程序。【了解】核移植技术的应用、发展趋势重点介绍。简单介绍核移植技术的应用、发展趋势。（六）干细胞与组织工程【掌握】干细胞的概念；胚胎干细胞、成体干细胞、全能干细胞、多能干
6、细胞和单能干细胞定义；组织工程的概念。【熟悉】干细胞的分离培养与鉴定方法。【了解】干细胞技术的运用；组织工程技术的运用。（七）细胞凋亡与细胞增殖检测技术【掌握】细胞增殖与凋亡的概念。【熟悉】细胞增殖的常规检测技术，如直接计数法，MTT法，CCK8法等。细胞凋亡的常规检测技术，如形态学检测，AnnexinV,DNAFagmentation,TUNE1.,线粒体膜电位变化,细胞色素C释放，CaSPaSe活性，凋亡相关蛋白检测等方法。【了解】细胞增殖与凋亡的重要信号转导途径；细胞增殖的5,-滨脱氧尿嗑咤核苜（Brdu）检测法，羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）法，Ki67染色法等。（八）转基
7、因技术及细胞工程最新研究进展【掌握】转基因技术细胞转染外源基因的方法；转染细胞的鉴定。【熟悉】转基因动物的制备；乳腺生物反应器制备原理和应用。【了解】转基因动物定义与发展历史、转基因动物技术的意义和最新发展。四、课外习题及课内讨论由于课时有限，本门课程安排部分自学内容和适当习题（包括思考题，讨论题等），主要留给学生课下完成，最后由老师集中讲解与点评；五、教学方法与手段教学方法主要以讲授为主，教学手段是采用多媒体教学。六、教学学时分配根据各本科专业教学计划要求，安排总学时是30学时，其中理论课24学时，实验课6学时，理论课与实验课的比例为4：1。内容课堂讲授实验、见习课其它教学环节小计（一）绪论
8、33（二）动物细胞培养336（）细胞融合与单克隆抗体336（四）胚胎工程33（五）细胞核移植与克隆技术33（六）干细胞与组织工程33（七）细胞凋亡与细胞增殖检测技术33（八）转基因技术及细胞工程最新研究进展33总计24630七、考核方式闭卷考试加平时成绩及实验成绩；各教学环节占总分的比例：闭卷考试，占80%,平时成绩（包括出勤率、课堂回答问题及课后作业完成情况等）和实验成绩，占20%。八、推荐教材和教学参考书教材：细胞工程（第二版），安利国主编，科学出版社，2014.01教学参考书：细胞工程学，李志勇编著，高等教育出版社，2008年细胞工程，王永飞,马三梅,李宏业主编，科学出版社，2017年。动物细胞工程学，周欢敏主编，中国农业出版社，2009年。细胞工程，陈志南主编，科学出版社，2005年。细胞工程，罗立新等编著，华南理工大学出版社，2002年。九、本大纲主要起草人、审阅人主要起草人：细胞工程全体主讲教师2016年5月审阅人：廖亚平2016年5月生物科学院（系）、部细胞生物学教研室蚌埠医学院课程教学大纲执行审批表大纲名称细胞工程课程编号适用专业生物技术专业总学时数30学时理论24学时实验6学时编制单位细胞生物学教研室编制时间2016年5月31日教研室意见教研室主任：年月日系、部意见系、部（院）主任：年月日教务处意见教务处处长：年月日
