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1、最新细菌与真菌涂片镜检和培养结果报告规范专家共识要点临床实验室报告是检验结果的正式呈现,是临床诊疗的客观依据,具有法律效力。报告的规范化是检验医学各个亚专业共同的任务。本文拟对细菌学和真菌学涂片检查报告、培养检查报告的规范加以界定,希望对业界发展有所帮助。说明:(1)除血培养和无菌体液的危急值报告外,本共识中的报告仅限于最终正式报告,暂不包括分级报告。(2)本文报告指用于临床诊断的报告。不针对其他目的,如流行病学。(3)本文内容较少涉及分枝杆菌属培养的结果报告。(4)本文不涉及药物敏感试验报告规范,该规范参见美国CLSI系列文件和常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识。(5)每家医院具体的
2、报告应和所服务的医疗机构、临床科室协商后确定。临床微生物学实验室的能力分级临床微生物学的专业能力是规范报告的基础和前提。实验室服务的医疗机构不同,工作内容和任务不同,其对实验室的要求和能力亦不同。专家组建议将临床细菌学/真菌学专业能力分为初级、中级、高级3个级别。2013年卫生部抗菌药物临床应用管理办法和2015年卫生计生委抗菌药物临床应用指导原则等国家指导性文件,没有要求一级医院开展临床微生物学检查。规范报告必备的分析前要素01、患者属性表明患者和标本唯一性的信息,至少需要下列信息:姓名、性别、出生年月日/年龄、病历号、科室和病房。02、医务人员相关信息临床医生姓名,标本接收、检验和报告审核
3、人员姓名。必要时可以列出医嘱者的联系方式。03、患者临床信息适应证或诊断(包括感染相关诊断)、抗菌药物使用信息、医嘱项目。04、标本类型和部位此为临床微生物学检验的重点,需要重点关注和规范。血液应区分经皮抽取、经导管抽取,并标明穿刺的位置。分泌物、脓液、穿刺液等必须精确标明取材部位。关节液要注明具体关节。眼部:必须精确标明眼别、具体取材部位及性质,例如结膜囊分泌物、角膜刮取物、泪道结石、前房液、玻璃体等。痰液应区分咳痰、抽吸痰。支气管洗液和BALF不能混淆。尿液应区分清洁中段尿、新插导管尿、穿刺尿液、术中尿液。生殖道分泌物应区分阴道分泌物、阴道高位分泌物、宫颈外口分泌物、宫颈内分泌物、宫腔分泌
4、物。胸腔/腹腔/关节腔引流液不等同于胸腔积液/腹腔积液/关节液;脑室分流液不能写成脑卷液。05、检查方法应注明涂片和培养的方法名称。06、时间信息医嘱时间、采样时间、送达时间、接收时间、报告审核时间、报告打印时间(血液标本采集时间要精确到分)O07、结果等级性提示(如果有)分级报告(初级报告、最终结果)。08、实验室信息地址和联系方式(按:报告项目要和实验室资质相匹配)。09、疑难病例检验申请需要描写简单病史、流行病学信息、临床表现等。如果有病原学指向,应尽可能具体。检查相关因素01、判断标本的合格性标本合格则注明合格。如果拒收,则须标示拒收原因。如果标本不合格但接收,要在报告单注明接收原因、
5、不合格因素的可能影响。并声明:仅供临床参考。报告单中要注明延迟送检的时间和保存方式。02、描述接收的标本的性状部位、性状、颜色、体积或大小、质量判断和结果。所有标本都要进行分析前、分析中的质量判断。咳痰/抽吸痰普通涂片、培养时,需要注明质量判断结果,并拒收不合格标本。标本质量判断依据参见临床微生物学手册第11版第271页表1(细菌培养)、第281页表3(厌氧菌)、第284页表5(质量判断标准)、第1945页表1(真菌)。眼部标本可以分为眼表标本和眼内容物。眼表标本主要包括结膜/角膜分泌物、结膜/角膜刮取物等,泪道分泌物、泪道结石、结膜结石等可参照执行。眼内容物包括房水、玻璃体等,部分眼内组织切
6、取物可参照房水执行。03、标本前处理(如果有)包括稀释、浓缩、清洗、剪切、研磨、机械震荡、超声。对涂片标本,要注明是否甩片。建议脑脊液、其他无菌体液标本使用细胞离心机。建议导管、关节假体超声处理,腹膜透析液浓缩处理。建议眼部结石及部分组织切取物研磨后处理,研磨时注意防止污染。如有多颗结石至少保留1颗制作压片检查。04、检查项目和方法注意:涂片、培养和药敏是不同的检查项目,应分开报告。1 .检验结果:名称、定量、定性、单位、参考范围、判断标准等。2 .专业性注释:包括概念解释(如天然耐药)、临床意义、治疗建议、参考文献、符号、缩写的释义。3 .重要性/危急性提示(如需要):如“高致病性/高传播性
7、“,”请咨询感染科医生”。4 .管理性提示(如需要):如”需要上报感染控制办公室”,“注意隔离”。5 .其他提示:检验项目如为国际标准组织(ISoI5189)或美国病理学家学会认可,或为区域互认项目,可以按相关要求进行标识。6 .时效性提示:如”若有疑义,请于72h内与实验室联系”。7 .免责提示:如”该结果仅对该标本负责“,”该结果解释须结合患者临床情况”。条码化、英文翻译注释、报告修改相关信息。条件具备且有需求时,可以同时或单独呈现英文形式报告。各个信息要素,建议与WHONET代码相对应。涂片结果的规范报告一般情况下,除了血液标本、粪便标本外,培养标本都应做涂片镜检(血培养阳性报警后必须涂
8、片)。同一份标本进行涂片和培养,建议一同报告结果,应注意二者结果矛盾时的处理和解释。01、必备要素1.检验项目:革兰染色检查普通细菌,适用于除血液、导管、粪便、喉部标本外的各种标本。粪便标本常规不进行革兰染色,特殊情况下可进行(如查找弯曲菌)。革兰染色可查念珠菌,但不适用于丝状真菌。抗酸染色检查抗酸杆菌适用于:除血液和导管外的各种标本,其中呼吸道标本最常见。弱抗酸染色检查奴卡菌,主要适用于呼吸道、中枢神经系统标本。10%K0H和/或乳酸棉酚兰染色检查真菌;墨汁染色检查脑脊液标本中的新型隐球菌。六胺银染色检查呼吸道标本中的人肺抱子菌。阴性:XX染色,未见菌体;见/未见细胞;细胞名称、特征、数量。
9、阳性:XX染色,查见菌体,描述菌体特征、数量及细胞学。具体标本、菌体另有特征时,均需详细描述。细菌革兰染色,应报告每种菌体的形态(杆菌、球菌、球杆菌)、染色特征(阳性、阴性或不确定)、排列(双球菌、四联、八叠、短链或长链、葡萄状、柴捆状等)、半定量、比例。革兰染色时,建议半定量的报告方式:每油镜视野1个细菌为1+;每油镜视野15个细菌为2+;每油镜视野有630个细菌为3+;每油镜视野30个细菌为4+o说明:国际上量的报告方式没有统一。但实验室内部应该统一,并且需要和临床医生达成共识。不同菌体形态不能合并,要分别报告。抗酸染色:要半定量(世界卫生组织的6层报告方式,也适用于非痰标本);建议进行形
10、态描述(如细长弯曲、丝状、珠状)、菌体关联(如菌体聚集),并注明抗酸染色阳性杆菌,建议进一步区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌”。弱抗酸染色:建议报告菌体形态(细长弯曲、分枝、丝状、串珠状)。建议临床:”进一步申请奴卡菌、结核/非结核分枝杆菌鉴定”。真菌:区分酵母相和菌丝相,形态描述(圆形、关节型、椭圆形,菌丝);菌丝要区分真假菌丝,要有相应形态描述(是否有隔、菌丝分枝角度)。墨汁染色:建议描述菌体特征(形态、出芽、英膜等)。人肺抱子菌六胺银染色:建议报告菌体特征(包囊和滋养体特征,杯状、皱缩葡萄干样、囊形塌陷状空壳或破裂乒乓球样外观、囊壁有特征性新月状或圆括号样结构)。3.细胞学检查结果:炎症
11、细胞特征、吞噬特征描述、吞噬细胞占全部多形核粒细胞(poIymorphonuclearIeucocyte,PMN)的比例、组织细胞、细胞与菌体的关系(紧邻程度)。低倍镜下细胞的半定量参见临床微生物学操作手册(ClinicaIMicrobioIogyProcedureHandbook,CMPH)标准(CMPH23.2.1.16)o该标准提示,如果40个视野少于10个细胞,则不报告细胞形态。02、建议要素如果形态特征典型,且对应菌种在该类标本中分离率高,则可以给出菌种提示。如:革兰阳性双球菌,矛头成对,疑似肺炎链球菌。可添加彩色图片,选有特征性、代表性和诊断性的图像照片1幅或多幅,注明标本类型、处
12、理和染色方式、放大倍数,必要时在图中以箭头、文字、符号等方式标注。03、注意事项脑脊液、正常无菌部位体液等重要标本,必须离心后进行涂片镜检。建议报告细胞内吞噬菌的情况,但原始标本吞噬现象不完全等同于感染。大多数情况下,不能根据非特异性的涂片结果,直接判断菌种。例外情况:男性生殖道分泌物中性粒细胞内查见革兰阴性肾形双球菌,判断为淋病奈瑟菌;脑脊液标本墨汁染色看到宽大英膜伴出芽的菌体,判断为新型隐球菌。当革兰染色看到不着色纤细菌体或着色不匀的菌体时,考虑分枝杆菌或奴卡菌,建议加做抗酸或弱抗酸染色,即使临床未开相应的医嘱。培养结果的规范报告01、必备要素检验项目和方法:血液/体液全自动增菌培养(需氧
13、、厌氧)、普通培养、厌氧培养、分枝杆菌培养、真菌培养、微需氧培养及其他靶向培养,并报告培养时间。报告内容如下。1 .普通培养:无菌部位标本培养阴性,报告”经XX天普通培养,无菌生长”;如果是定量培养,需要提示最低培养浓度;培养阳性,报告”XX天普通培养,经鉴定发现XX菌生长“。正常有菌部位标本培养,无菌生长,报告”经XX天普通培养,无菌生长”。正常有菌部位标本,仅有正常菌群分离,报告“XX天培养,经鉴定生长正常菌群或未发现致病菌“;正常有菌部位标本培养,1种或2种致病菌,伴或不伴正常菌群分离,报告”经过XX天培养和鉴定,发现XX菌生长”。混合生长:即3种或更多种分离株生长。临床意义明确,需分别
14、鉴定、报告各分离株名称、数量和/或比例。在生命终末期患者血培养中,可以见到多种微生物生长,此时不是污染。临床意义不明确,报告混合生长,如”培养3种以上肠道革兰阴性杆菌生长”。2 .靶向培养:即针对特定菌种微生物的培养。无生长,报告”经XX天XX培养,无某菌生长“有目标菌生长,报告“XX天XX培养,经鉴定发现某菌生长”。分离株(可能致病菌、靶向培养目标菌)描述:菌种名称、鉴定方法、量(定量、半定量)、纯度、报警时间、对临床有意义的菌落特征(如黏液型)和菌落革兰染色特征(如荚膜)。疑似污染的分离株,区分实验室内污染和实验室外污染。明确的实验室内污染,不回报临床;明确的实验室外污染,无法确定来源的污
15、染分离株,需与临床沟通,必要时以检验报告方式正式回报。报告:经培养和鉴定,发现某菌生长,无法区分污染和感染,建议通过后续培养确定该分离株意义。不建议在报告中做是否污染的判断和标识。如果一定要判断,建议用“疑似”、“可能”字样。3 .对重复的分离株:同患者同部位在XX天内重复出现表型基本一致的分离株,可不必进行完整的鉴定和药物敏感试验,结果可以参考上一次结果。此时,需要通过形态学和简单鉴定(氧化酶、叫味、触酶等)判断是否该菌和上次结果一致。菌种鉴定:通常7d以内可以同上一次。药物敏感试验:大多数菌为7d以内可以同上一次,金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和一些革兰阴性杆菌如阴沟肠杆菌,建议3d。此时报
16、告:经过XX天培养,有XX菌生长;药敏结果参见某月曰某标本号检查,同时列出具体结果。如果是其他实验室复核过的结果,则注明:该结果经XX实验室确认。4 .形式区分:正常菌群、混合生长、可疑污染结果,要与可能致病菌/目标菌明确区分,避免因形式、等级相同造成误导。5 .拒收时报告:如痰涂片见扁平鳞状上皮细胞(SqUamOUSePithelialcell,SEC)210个/低倍镜视野(IOWPOWerfield,LPF)提示标本质量差。如果临床有适应证,请重新留取标本。如咳痰标本镜下观察超过40个视野未见菌体,不建议进行普通细菌培养。如果临床有适应证,可建议进行其他检查。如果报告发出后培养仍在继续,则报告上注释:培养将