松材线虫分离方法教你如何快速分离松材线虫.docx

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1、松材线虫分离方法,教你如何快速分离松材线虫松材线虫是一种毁灭性虫害,被松材线虫感染后的松树,针叶出现黄褐色或红褐色,会出现萎篇下垂的现象,树脂分泌结束,会整株枯萎死亡、最终腐烂。因为松材线虫危害大,所以要加强检疫与防治。分离检验是常用的检疫检验方法,主要的分离方式有漏斗法分离、浅盘法分离,还可通过线虫分离器快速分离。下面,我们就来详细地了解下这些方法。1、贝尔曼漏斗法:(1)、置备一只直径10T5cm的玻璃漏斗,玻璃漏斗末端接上一段长约15Cm的乳胶管,置于漏斗架上,在乳胶管上装一个止水夹。(2)、对媒介昆虫开展线虫分离时,可用剪刀将其剪碎或用箭头镶子、解剖针将其撕碎,剪取大小合适的2层纱布将

2、碎体包裹后,放入漏斗中,关闭漏斗下端乳胶管上的止水夹,然后从漏斗壁慢慢注入清水,使清水充满漏斗和下面乳胶管,水要漫过纱布包。(3)、浸泡24小时后,将培养皿置于乳胶管下,打开止水夹,接取15Inl浸泡液,供镜检或作为样品送检。2、浅盘法:(1)、前盘分离装置由2个口径不同的用不锈钢或铝合金等材料制成的浅盘组成,将其中口径。略小,底部为粗网筛的浅盘放在另一个浅盘上面。(2)、将大小合适的2层少补平铺于筛盘上,松木样品细木条(或木片、木屑)置于筛盘纱布上面,慢慢注入清水,使清水浸泡全部样品。(3)、浸泡24小时后,移去筛盘,把大浅盘内的样品浸泡液倒入烧杯中,烧杯内浸泡液中的线虫可通过自然沉降或离心

3、方法,移去多余的水分,浓缩至适宜的量,以便显微镜检验。3、线虫分离器:(1)、将采集的植株根部的样品轻轻的洗去其表面所附的土壤。(2)、将潮湿的根剪成2CnI的小段放入筛网(筛网底部可衬一块垫巾或纱布)。(3)、把内置样品的筛网放在接虫皿上,然后打开线虫分离器的箱盖,把接虫皿及筛网均匀的排列在箱体内(两层之间用筛网支架隔开),盖上箱盖。(4)、把波纹管带盖的一端装在箱盖入雾口,另一端插入雾化器的喷雾口。(5)、用定时器设定通电雾化的时间(设定方法请仔细阅读定时器说明书),把设置好的定时器插在220V50Hz电源上(此时定时器进入计时状态),雾化器插头插在定时器插孔中。(6)、顺时针旋转雾化器的旋钮开关,电源指示灯亮,证明已接通电源,雾化器开始工作,可根据需要旋转开关旋钮调节雾量大小。(7)、12-24小时(根据样品种类来确定具体分离时间)后,关闭雾化器电源,打开箱盖,先把筛网拿起,取出接虫皿,放在双筒解剖镜或高倍显微镜下检查有无线虫及鉴定线虫种类。线虫分离器与浅盘法、漏斗法分离相比,一样点利用的都是线虫喜水的特性,不同的点在于线虫分离器利用的是水雾,耗水量低,雾气还能够提供充足的氧气,保证分离出来的线虫多数是获得,而且分离得到的线虫很干净,可直接用于检验。

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