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1、紫外分光光度法鉴定未知芳香化合物及蔡的测定紫外分光光度法鉴定未知芳香化合物及蔡的测定目的要求1、学习和把握用紫外分光光度法定性的原理和方法。2、学习紫外分光光度计的使用方法，了解基本结构，把握紫外分光光度法定量的原理和方法。基本原理紫外分光光度法其比较紧要的用途是用于有机化合物的定性和定量分析方面。由于很多有机化合物及其衍生物在紫外波段有强的汲取光谱，可以把未知试样的紫外汲取光谱图和标准试样（或与标准准图谱）比较，当浓度和溶剂相同时，若两者的谱图相同（峰、微小值和拐点的相同），而且未知样品大体已知时，可以说明它们是同一个化合物。但是在紫外和可见光区域，这些特征的峰、微小值和拐点的数目往往是有限
2、的，且紫外汲取光谱的汲取峰还较宽,两种不同的化合物可能有相同的紫外汲取光谱，对于完全未知的有机化合物，有时可以通过改换溶剂和适当的化学处理之后所得的未知标准光谱对比，不仅比较入，还要比较它们的人max和A,来进一步确证，甚至还要进一步借助红外、核磁和质谱等手段才能*后得出结论。紫外分光光度法进行定量分析是有快速，灵敏度高及分析混合物中各组份有时不需要事前分别，不需要显色剂，因而不受显色剂温度及显色时间等因素的影响，操作简便等优点。目前广泛用于微量或痕量分析中。但有一个局限性，就是待测试样必需在紫外区有汲取并且在测试浓度范围服从比耳定律才行。利用紫外光度法测定试样中单组份含量时，通常先测定物质的
3、汲取光谱，然后选择*大汲取峰的波上进行测定。其原理与一般比色分析相同。可用标准工作曲线法。假如通过试验证明，在测定条件下符合比耳定律，也可以不用标准曲线而与标准品的已知浓度溶液比较求出未知样品浓度。仪器与试剂751G型，752型及53WB型紫外可见分光光度计；ICnl石英比色皿未知物1环己烷溶液；未知物2环己烷溶液；未知物3乙醇溶液；未知物4乙醇溶液；蔡的标准溶液：（1）Img/mL的标准蔡溶液：精准称取50毫克色谱纯的蔡于小烧杯中，以无水乙醇溶液溶解后定量移入50毫升容量瓶中，以无水乙醇稀至刻度，摇匀；（2）IOHgmL的标准票溶液，由lmg/mL蔡标液精准稀释100倍即成；（3）1ug/m
4、L的标准蔡溶液：由IOPgmL禁标液精准稀释10倍即成。试验步骤1、以试样的溶剂为参比对未知芳香化合物的溶液测定，其紫外汲取光谱波长一般从220nm300nm0间隔自选（一般间隔12nm）。2、绘制出汲取曲线后从aUltraioletSpectraofAromaticCompounds”（芳香族化合物的紫外光谱）一书中的标准谱图对比查出属于何种有机化合物。3、以95%乙醇为参比溶液，用IenI石英比色皿对标准蔡一乙醇溶液测定紫外汲取光谱，波段从210nm230nm,只要找出*大汲取峰位置即可。4、在仪器上以*大汲取峰测定已知浓度的标准溶液。（1）用IomL带塞比色管6支，配制浓度分别为0.2、0.4、06、08、1.0、L5gmL的标准溶液系列各IOmL。（2）在分光光度计上以*大汲取峰波长（22Onnl）测定标准系列的吸光度，浓度从低到高，记录汲取值。5、对未知样品进行测定。对几个未知样品中的蔡含量进行测定时的条件应与标准系列一致。试样中含量高,可用乙醇稀释后测定。结果处理式中：C标、C样一分别为标准液和试样中蔡的浓度；A标、A样一分别为标准液和试样液的吸光度；W样一试样重。注意事项（1）测定过程中比色皿应加盖子，并防止盖子相互污染。（2）读数后立刻关闭光闸，保护光电管。（3）当心不要打破石英比色皿；比色皿光学玻璃面要用揩镜纸擦。
