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1、羟色胺转运体与肠易激综合征患者躯体心理症状的相关性分析5羟色胺转运体与肠易激综合征患者妪体心理症状的相关性分析摘要)目的探讨5-羟色胺转运体(SERT)与肠易激综合征(IBS)患者躯体和心理症状是否存在相关性。方法选取2010年1月2012年12月佛山市第一人民医院IBS患者154例为病例组，并按不同症状分为3个亚组(C-IBS组65例、D-IBS组47例、A-IBS组42例)，选择同期健康志愿者154名作为比照组。应专心理症状自评量表(SC1.-90)来评价探讨对象的心理状态：采纳实时定量PCR法测定SERT信使KNA(InRNA)表达量,Western印迹法测定SERT蛋白表达水平。结果S
2、ERT蛋白衣达量：病例组(0.810.45)和比照组(0.790.47)比较，差异无统计学意义(P0.05)。SERTnRNA转录表达量：病例组(0.460.25)和比照组(0.420.28)比较，差异无统计学意义(P0.05)。C-IBS组SERT蛋白表达量(0.980.51)及mRN表达量(0.580.23)均显著高于D-IBS组(0.710.40)、(0.410.25)、A-IBS组(0.670.35)、(0.370.23)和比照组(0.790.47)、(0.420.28),差异均有统计学意义(PO.05)o结论IBS患者SERT的111RNA及蛋白量表达水平与患者的躯体和心理症状亲密相
3、关，越低则越简单出现躯体化症状、焦虑等心情表现。关键词5-羟色胺转运体；肠易激综合征：转运蛋白质；躯体化症状；心理症状中图分类号R574.4文献标识码A文章编号1673-7210(2014)02(c)-0018-04CorrelationbetweenexpressionofSERTandsomaticandpsychologicalsymptomsofirritablebowelsyndrome1.IKcjinglQIUXiaoleilYUANYaozong21.DepartmentofSpecialMedicalCenter,theFirstPeoplesHospitalofFoshanC
4、ity,GuangdongProvince,Foshan528000,China；2.DepartmentofSpecialMedicalCenter,theAffiliatedRuijinHospitalofShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200025,ChinaAbstractObjectiveToexplorethecorrelationbetweentheexpressionofSERTandsomaticandpsychologicalsymptomsofirritablebowelsyndrome(IBS).Me
5、thods154casesofIBSpatientsintheFirstPeoplerSHospitalofFoshanCityfromJanuary2010toDecember2012wereselectedasdiseasegroupanddividedintothreegroups(C-IBSgroup65cases,D-IBSgroup47cases,-IBSgroup42cases)accordingtodifferentsymptom.154healthyvolunteerswereselectedascontrolgroup.Thepsychologicalsymptomofst
6、udyobjectswereevaluatedbyS1.C_90.TheexpressionofSERTatmRNlevelwastestedbyreal-timepotymerasechainreaction(PCR)andtheexpressionofSERTatprotein1eve1wasdetectedwithWesternblotting.ResultsTheexpressionsofSERTatprotein：diseasegroup(0.810.45)andcontrolgroup(0.790.47)werecompared,thedifferencewasnotstatist
7、icallysignificant(P0.05).TheexpressionsofmRNA：diseasegroup(0.460.25)andthecontrolgroup(0.420.28)werecompared，thedifferencewasnotstatisticallysignificant(P0.05).TheexpressionsofSERTatprotein(0.980.51)andmRN(0.580.23)inC-IBSgroupweresignifican11yhighcrthanthoseinD-1BSgroup(0.710.40),(0.410.25),-IBSgro
8、up(0.670.35),(0.370.23)andcontrolgroup(0.790.47),(0.420.28)，thedifferenceswerestatisticallysignificant(P0.05).ConclusionThereissignificantcorrelationbetweentheexpressionsofSERTatmRNAandproteinlevelandthesomaticandpsychologicalsymptomsofIBSpatients.11showsthatthelowerlevelofSERTexpressions,themoreemo
9、tionalperformanceofsomatization.anxietyandsoon.KeywordsSERT；Irritablebowelsyndrome：Transportproteinst；Somaticsymptoms；Psychologicalsymptoms肠易激综合征(irritablebowe1syndrome,IBS)是一种常见的慢性胃肠功能紊乱性疾病，至今为止病因和发病机制尚未明确，依据症状不同分为便秘型(ConstipationirritableboweIsyndrome,C-IBS、腹泻型(diarrheairritablebowelsyndromeD-1BS)
10、和腹泻便秘交替型(alternatingdiarrheaandconstipationirritablebowelsyndromeA-IBS)1o近年探讨发觉，5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)及5-羟色胺转运体(SerOIo-nintransporter,SERT)在肠道动力紊乱、内脏感觉异样等机制中发挥着重要作用2,IBS患者中有40$60%都伴焦虑、抑郁等心理障碍3。本探讨正是为了探讨SERT异样与患者躯体和心理症状之间的关系，以期对IBS治疗和药物的开发供应理论依据。1资料与方法1.1一般资料选取2010年1月2012年12月佛山市第一人民医院IBS患者15
11、4例为病例组，其中男59例，女95例，平均年龄(41.911.9)岁，依据临床症状分为便秘主导型(C-IBS)组、腹泻主导型(D-IBS)组和腹泻便秘交替型(A-IBS)组3个亚组。其中CTBS组65例，平均年龄(40.18.7)岁；D-IBS组47例，平均年龄(42.29.3)岁：A-IBS组42例，平均年龄(39.89.4)岁。比照组为同时间的健康志愿者154名,平均年龄(41.19.7)岁。本探讨试验前已经获得医院伦理委员会通过，全部探讨对象都预先知情，并且签署了知情同意书。全部探讨对象都经过具体查问病史，进行全面体格检查和求验室检查，解除器质性疾病、精神病及药物滥用者，病例组必需符合罗
12、马川分型诊断标准。两组一般资料比较，差异均无统计学意义(P0.05),具有可比性。1.2D-IBS组、C-IBS组和A-IBS组入选标准每周排便3次：块状或硬便；稀烂便或水样便：排便费劲：排便急迫感。D-IBS组：符合上述症状、项之1项或以上，而无、项：或有、项之2项或以上，可伴、项之中1项，但无项。C-IBS组：符合上述症状、项之1项或以上，而无、项：或有、项之2项或以上，可伴、之中1项。A-IBS组：上述症状交替出现。1.3方法1.3.1心理症状调查采纳症状自评量表(SC1.-90)4,探讨对象均独立完成。SC1.-90量表共有90个项目，采纳10个因子分别反映10个方面的心理症状状况，即
13、躯体化、强迫症状、人际关系敏感、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、偏执和精神病性，未能归入上述因子将之归为因子10其他。SC1.-90的每一个项目均采纳5级评分制，依据探讨对象H觉有无该项症状及程度来得分：没有为0分；很轻为1分：中度为2分：偏重为3分：严峻为4分。轻、中、重由被试者自己体会，不必做硬性规定。评定的时间，是现在或者是最近1个星期的实际感觉。得分越高，代表与相关因素关系越亲密。1.3.2试验部分1.3.2.1标本采集分别在乙状结肠、宜肠与乙状结肠交界处和宜肠处，用结肠债钳取3块肠黏膜组织，标本约0.3cm.2cm0.3cm,保存在液氮中5。1.3.2.2PCR检测用TRIzol方法来提取肠
14、黏膜组织总的RNA,并反转录成cDA,反应引物由上海英骏生物技术公司负责合成。PCR反应总体系为101.,模板CDNAl1.,ddH203.61.,SYBRMastermix51.,10mmol/1.上下游引物各0.21.：反应的条件设定为95C5min,94CIos,59CIOs,72,C10s,循环40次,温度的改变速率设为20C/S；之后以95,C10s,6515s,以O.l,Cs速率渐渐使温度升至95C10s。持续监测并记录荧光信号的改变，对熔解曲线进行分析，以GAPDH为内参照，作相对定量的分析，用2-Ct来表示样本SERT基因相对于内参照表达量Ct=Ct目的基因-Ct内参照）6o1
15、. 3.2.3Western的印迹分析法提取结肠黏膜标本的组织蛋白，行SDS-PAGE,转膜，以5%脱脂奶粉封闭，并加入ab36127羊抗SERT（1：1000）,然后于4C条件下摇床过夜，TBST漂洗，加辣根酶标记抗山羊IgG（1：5000）后温育Ih,以TBST漂洗，DAB显色，当出现目标条带后马上终止反应。最终用图像分析仪测量各样品显色的灰度，利用灰度值进行分析。1. 4统计学方法采纳统计软件SPSS19.0对数据进行分析，计量资料以均数标准差（XS）表示，两独立样本的计量资料采纳t检验；多组间比较采纳方差分析，两两比较采纳1.SD-t检验。相关性关系采纳Pearson法分析。以P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1各型IBS患者SERTInRNA、蛋白表达量状况SERT蛋臼表达量：病例组（0.810.45）和比照组（0.790.47）比较，差异无统计学意义（P0.05）。SERTmRN转录表达量：病例组(O.460.25)和比照组(0.420.28)比较，差异无统计学意义(P0.05)oC-IBS组SERT蛋白表达量(0.980.51)及mRN表达量(0.580.23)均显著高于D-IBS组(0.710.40),(0.410,25)、A-IBS组(0.670.35),(0.370.23)和比照组(0.
