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1、ICS13.060CCSzIODB23黑龙江省地方标准DB23.T38112024土壤原生动物监测技术规范2024-08-30发布黑龙江省市场监督管理局发布DBivr8112024目次前言II引吉I1.1.1愆阳I2规范性引用文件I3术语和定义I4样品采集I4.1 野外采样器具I4.2 米样点位布设与观测I4.3 采样时间24.4 采集样品24.5 样品标识和记录25样品保存26原生动物物种鉴定26.1 非淹没培养皿法活体培养26.2 活体观察、鉴定26.3 活体计数36.4 物种鉴定依据37旗量保证和痂房控制47.1 样品来集、保存质量控制47.2 样品流朴,交接质曳控制47.3 物种赛定侦
2、法控制47.4 数据记录14附录A（资料性）枭样地基本情况记录表5附录B（资料性）土壤样品采样环境调次数据表6附录C（资料性）原生动物物种信息统计去7附录D（资料性）原生动物物种鉴定书目81)B2ASI1.-224本文件按照GB门1.1.-2O2OT标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则3的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的费任，木文件由黑龙江省生态环境厅提出并归口。本文件起草单位：黑龙江省生态环境监测中心、哈尔滋加范大学、黑龙江省哈尔滨生态环境赛测中心、东北农业大学.本文件主要起草人：蒋本超、王丽、苏晓蕙、潘旭明、王岩、王晓燕、刘禹解、
3、张颖、唐靖、闫振睇、王国梁、时天诟、李经伟、冯程程、常俊胱、侯春羽、韩梅,赵然、吴宝光、王迪、闫爱博、于宗艮、李文斐、张晓蕾.IB2VJSIi-2C24为贯彻中华人民共和国环境保护法3$中华人民共和国土墙污染防治法和国务院关于印发2030年前碳达塔行动方案的妞知3等法律法规、部门规章，实施国家黑土地保护工程,稳定土埒功能,保护十填生物多样性，制定本文件.I1.1.士康原生动物监测技术规范1本文件规定了土堞原生动物监测技术的术谓定义、样反采集样AA保存、原生动物物种推定、ffi保证和版Ia控制要求的内容.本文件适用于除寄生原生动物外土城原生动物的监测，2知如:性引用文件卜列文件中的内容通过文中的
4、规范性引用而构成本文件必不可少的条软.我中.注口期的引用文件.仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件,共量新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T36197堞质&土填聚样技术指南HJ4166土塘环境监测技术煨范HJ710.10生物多样性观泅技术导则大中型土填动物NY/T395农田土填环境质地监测技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于木文件.3.1原生动物是最原始、最荷单、最低等的不细物动物。4样品果集4.1 IHbXWBA4.1.1 器材类工具；应符合Hrr166的要求，包括但不限F样品袋、GPS定位仪、数码相机，4.1.2 工具类：应符合Hrr166、NY395的要求，
5、包括但不限于趺铲、网状取土拈.4.1.3 文具类：应符合Hrr166、HJ710.10的要求,包括但不限于基本情况记录我与采样环境避IS数据表.4.1.4 安全防护用品：应符合HJ166的要求.4.1.5 采样隼辆：应符合HJfr166的要求4.2 采祥点位布0与稠M4.2.1 监测点位的布设应符合HJrr166的规定,实际监测中，布点数他还瞿根据采样目的、样地环境状况等因索隔定,一般每个样方至少布设5个点.D本文件中用生动拘的定义东川次生动拘学IW.IB2J11SI1.20244.2.2 采集样本前，应先对现场环境情况进行观测、记录和拍照；记录天气情况、土填基本植被等信总（参见附录A和附录B
6、）.4.3 采样时间监测时间的确定包括但不限于：a）采样频率根据工作需要确定监测H期间1.应基本相同：b）同一监测点位的监测11期间隔应相同：O赛冽时间选择在一天内的同一时段.4.4 XftWA4.4.1 样品采集过程应符合GBrT36197和NYZr395的要求.4.4.2 利用铁铲或圆状取土钻按照采样点分布采集表层土壤，采样深度0Cm-20cm.面积直径5cm-7cm.每个果样点采集2kg十堆混合样品,样品，Kht不燃时可适当刷加果样点数,样品采佻过程中，应去除砾石（2mm）、植物根系簪，好个枭样点采集的土壤深度、虫苗应一致。样品应充分混匀后装入样品袋，做好标注.4.4.3 及时清洗所有接
7、触过样丛的采样器具,防止污染.4.5 样品标恢和记录4.5.1 样品袋外例应标识采样点信息、采样时间以及采样人姓名,确保标识正确.4.5.2 采样表应记录采样时间、采样地名称等（叁见附录A）.5WAM采集的样品应置于25C,湿度低于40%下风干、保存.6.1 非淹没培养法活体增养取30g风干的上填样品，过于烧杯中，加入100m1.蒸镭水,煮沸IOmin-15min,除置沉淀，取抵浮液过渡得到土壤浸出液.另取5K风干土样，用纱缶包好放入培养皿中，加入土壤浸出液约60m1.浸出液淹没样品2/3处为宜，对土塔中的原生动物进行培养，在25C培养箱内培养1.d-7d（视原生动物生长情况可延长培养天数）,
8、得到活体培养液。6.2 活体观察、SC6.2.1 原生动物活体观察流程士壤晚生动物活体观察流程可按照以下步骤开展：a）用玻璃毛细管吸取6.1中13只目标原生动物活体滴到载玻片上,活体培养液尽量少：b）制作原生动物活体装片：c）花低倍显微镜卜卷找原生动物活体并观察运动方式：d）在中倍显微钺下观察原生动物活体大小、形态：c）在高倍显微悔下观察原生动物活体细胞内那结构：O于显微镜下进行原生动物活体拍照记录.6.2.2 形态学观察观察原生动物活体运动方式.大小、形态、纤毛及纤毛器（长度、分布和用列特征等）.伸缩泡（部位/数ht以及形成过程、排空间放时间、是否有收集词等）、内质情况（是否存在特殊的油球、
9、空泡、结品体、食物泡tH分布特征等八色肉体的存在及体色等特征,将原生动物物种信息填写至附求C中，林个样品应观察不少于3代制作的晚生动物活体装片.6.3 活体计数每隔24h对6.1中制备的活体培养液进行原生动物计数.步躲如下：a）饵次计数前,将培养中的活体培养液摇匀；b）将活体培养液等分为上、中、下三层，年层按照五点取样法（也可适当增加点数），每点取液体1m1.于载玻片上：c在显微镜下观察并计数.格获得的原生动物活体数值蚊大依填写至附录C.引个风干土壤样品中原生动物数H按以下公式计。：N=（NOXV,）Ms式中：n、nn下上、中、下每层中第i个取样点所观察的原生动物活体的数值，单位为个；V。上、
10、中、下每层所取的活体培羿液总体枳的数值,单位为至开（B1.）：No行花开活体培养液中咏生动物活体的数（ft圆位为个:61中加入的土填浸出液体枳的数值,单位为亳升（In1.）;HS=用于制备活体培养液的风干土壤样品重量的数值，单位为克（g）：N一每克风干土填样品中原生动物活体的数值，单位为个.6.4 物种鉴定依擀6.4. 1对原生动物物种信息进行统计并填写物种相关信息（忿见附录C）。6.4.2 晚生动物物种嘤定书目见附录k6.4.3 无法通过鉴定书目鉴定的物种，应由上级专家饕定.6.4.4 物种器定的注点事项如下；a）活体培养液的制备过程及原生动物活体计数过程应设置平行样，平行样的测定结果用平均
11、数表示：b）原生动物活体拍照资料应附上详细文字描述，包括物种形态学特征等信息：c）原生动物新种由上级专家鉴定：d）应当保存弁更新相关的分类学文献.7质量保证和质量控制7.1 样品采集、保存质量控制7.1.1 样品采集见“44采集样品”。7.1.2 样品保存见“5样品保存”。7.2 样品流转交接质量控制样品流转、样品交接执行H.J/T166的要求.7.3 物种鉴定质量控制物种稔定及注意”项见“6.4物种鉴定依据”.74数据记录数据记录表应有调查人、记录人、鉴定人、基核人、审核人签字.ma(JWMi)果样W本情况记录衰采样地基本情况记录去样式见表Aj。A.1.采样窥冰情况记录点果样地名称r样地朴方
12、#样地长度：样地宽度:样地面枳:取样深度：经纬度：EN_择地用号:架集日期I时W采样人.择JMfi号I制表人.择品果集日的:土康类型ww口陈石口其他()样品采建采样JSJt采样方法备注调宜人：记录人：审核人：复核人:MB（Wtt）土稀晶采律环M底数裳土塘样品采样环境调作数据表样式见表B.I.b.iwaxw7mftM口期：时间：,:省市县村样地所&区域：样地名称：经纬度：EN海拔高度.样地#样方R上博类型：起始时间：终止时间：诩查人，天气情况当前过去24小时过去7天有无大雨罪雨（大雨）口是口古Xff1.C其他小雨（中雨）阵用多云,_%M环境特征周国土地利用优势类型森林Q牧场中熊口农业口居民区赵业
13、口工业其他当地农川侵蚀憎况口无口中等口严小朱怦地周边植被优势类蟹口乔木口灌木口草口梦磋优势物种i三IS记荥人IMf及接人I附录C(JWMi)廉生毗由啾值计*原生动物物种信息统计去样式见表C1.*C.1朦生动的螂怖!总统计表序号纲目科的曲】0,1个/8样Ia1.样品2样&3样品4样品5123!56789101112131415结电士填名称_一样地编号一采集时间一土壤类型定容体枳鉴定人员鉴定人:审核人:卫核人:WHV1.AS1.1.20”附量D(MMtt)生动弊IE定理目D.1沈篇芬.原生动物学M)北京:科学出版社，1999.D.2宋微波.原生动物学G论M.有岛：青岛海洋大学出版社，1999.D.3尹文英.中1土填动物M.北京：科学出版社，2000.D.4尹文英,中国土填动物检索图饕M,北京：科学出版社，1998.D.5尹文英.中国亚热带土塔动物M.北京，科学出版社,1992.
