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1、微生物大小测定微生物大小测定实验二实验二 酵母菌大小的测定和细胞计数酵母菌大小的测定和细胞计数一、实验目的一、实验目的1、学会测微尺的使用方法。2、建立对微生物大小的概念。二、实验材料二、实验材料1、显微镜、物镜测微尺、目镜测微尺、载玻片等。2、麦芽汁培养基、酵母菌。3、吸管、吸水纸等。三、实验原理三、实验原理1酵母菌大小的测定原理酵母菌大小的测定原理 所有微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微尺来所有微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微尺来测量，测量，先用先用绝对长度的物镜测微尺来校正不表示绝绝对长度的物镜测微尺来校正不表示绝对长度的目镜测微尺，计算后者每格所代表的实际对长度的目镜测微尺，计算
2、后者每格所代表的实际长度，长度，然后然后放上待测的标本，用目镜测微尺测定标放上待测的标本，用目镜测微尺测定标本上微生物细胞占目镜测微尺的格数，就可计算该本上微生物细胞占目镜测微尺的格数，就可计算该微生物的大小。微生物的大小。酵母菌的直径约酵母菌的直径约8-10m。2.目镜测微尺的标定目镜测微尺的标定(1)取下接目镜，旋下目镜上的目透镜，将取下接目镜，旋下目镜上的目透镜，将目镜测微目镜测微尺放入尺放入接目镜的接目镜的中隔板上中隔板上，使，使有刻度有刻度的一面的一面朝下朝下，再旋上目透镜，并装入镜筒内。再旋上目透镜，并装入镜筒内。(2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，使有将物镜测微尺置于显微镜的
3、载物台上，使有刻度刻度的一面朝上的一面朝上，同观察标本一样，使具有刻度的小圆，同观察标本一样，使具有刻度的小圆圈位于视野中央。圈位于视野中央。(3)先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微尺先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微尺的刻度后，的刻度后，转动目镜转动目镜，使目镜测微尺的刻度与物镜，使目镜测微尺的刻度与物镜测微尺的刻度相平行，并使两尺的测微尺的刻度相平行，并使两尺的左边左边第一条线相第一条线相重合，再向右寻找两尺的重合，再向右寻找两尺的另外一条重合线另外一条重合线。 (4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。微尺的格数。
4、n2、测定工具、测定工具镜台测微尺镜台测微尺目镜测微尺目镜测微尺5mm划分为划分为50格，格，目镜测微尺目镜测微尺每格等于每格等于100m0.01mm平分平分100格，格，镜台测微尺镜台测微尺的刻度每格长的刻度每格长10m3 3、目镜测微尺、目镜测微尺的校正的校正n注意：校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的接物镜、接目镜、镜筒长度等）进行，而且只能在这特定的情况下才可重复使用。4、菌体大小的测定n取下镜台测微尺，将细菌染色标本置于载物台上，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。五、思考题及实验作业五、思考题及实验作业1. 若更换不同放大倍数的目镜和物镜时，必须用物镜测微尺标定目镜测微尺，这是为什么?2. 测定酵母细胞大小的结果。 (1)接目镜倍数是 ；低倍镜倍数 ；高倍镜倍数 。 (2)低倍镜下，接目镜测微尺 格=物镜测微尺 格。 目镜测微尺每格= m。 (3)高倍镜下，接目镜测微尺 格=镜台测微尺 格。 目镜测微尺每格= m。
