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1、微生物的分离纯化微生物的分离纯化高中生物高中生物 高二选修一高二选修一生物技术实践生物技术实践 人教版人教版专题专题2 2 课题课题1 1微生物培养技术微生物培养技术微生物的分离与纯化微生物的分离与纯化实验目的：实验目的：1 1、了、了解微生物分离解微生物分离纯化纯化的原理的原理2 2、体验分离纯化微生物的方法和无菌操作技术、体验分离纯化微生物的方法和无菌操作技术3 3、了解鉴别微生物的方法、了解鉴别微生物的方法实验材料、器具：实验材料、器具： 大肠杆菌菌液、自带材料、大肠杆菌菌液、自带材料、 无菌水、无菌水、 牛肉膏蛋白胨培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、 接种环、接种环、 涂布器、取样器、酒精灯
2、、涂布器、取样器、酒精灯、 酒精棉球（酒精棉球（95%95%）、试管等）、试管等 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基l实验过程：实验过程：（二）分离纯化微生物（接种）（二）分离纯化微生物（接种）（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基l实验过程：实验过程：计算称量溶化灭菌倒平板倒平板技术倒平板技术3.3.锥形瓶瓶口通过火焰锥形瓶瓶口通过火焰2.2.在酒精灯火焰旁操作在酒精灯火焰旁操作4.4.培养皿打开一条缝隙，倒入培养基培养皿打开一条缝隙，倒入培养基5.5.待平板冷却凝固后倒置待平板冷却凝固后倒置注意事项注意事项1.1.操作前用酒精棉球擦拭
3、双手操作前用酒精棉球擦拭双手防止杂菌污染防止杂菌污染实验流程实验流程1324特别提醒：特别提醒：无菌操作无菌操作用火安全用火安全1 1、平板划线法：、平板划线法：2 2、稀释涂布平板法：、稀释涂布平板法：（二）分离纯化微生物（接种）（二）分离纯化微生物（接种） 2173645问题总结实验操作问题探究稀释涂布平板法：稀释涂布平板法：1.1.如何将菌液进行稀释？如何将菌液进行稀释？2.2.如何确定稀释倍数？如何确定稀释倍数？6 6支试管，分别加入支试管，分别加入9ml9ml无菌水无菌水1ml1011ml1021ml1031ml1041ml1051ml106a.a.梯度稀释梯度稀释菌液菌液实验操作6
4、 6支试管，分别加入支试管，分别加入9ml9ml无菌水无菌水1ml1011ml1021ml1031ml1041ml1051ml106a.a.梯度稀释梯度稀释菌液菌液b.b.涂布平板涂布平板实验操作滴滴灼灼冷冷涂涂问题总结特别提醒：特别提醒： 接种完毕，在培养皿上贴上标签，注明接种完毕，在培养皿上贴上标签，注明时间、姓名、班级、菌种种类、时间、姓名、班级、菌种种类、 稀释倍稀释倍数，将培养皿倒置数，将培养皿倒置 将将接种后接种后的培养基放入的培养基放入3737恒温箱恒温箱中培养，中培养，同时放入一个同时放入一个未接种未接种的培养基进行培养的培养基进行培养培养培养拓展：拓展： 请利用本节课的技术探究你感兴趣的问题请利用本节课的技术探究你感兴趣的问题小结：微生物的分离纯化小结：微生物的分离纯化 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（二）微生物的分离与纯化（二）微生物的分离与纯化 1 1、平板划线法、平板划线法 2 2、稀释涂布平板法、稀释涂布平板法计算称量溶化灭菌倒平板
