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1、实验室生物安全实验室生物安全防护目的n保护操作者n保护环境n保护被操作对象概念n生物安全biosafety： ：是指由现代生物技术的开发和应用可能产生的负面影响，所采取的有效预防和控制措施，目的是保护生物多样性、生态环境和人体健康。n生物安全实验室：是指通过防护屏障和管理措施，达到生物安全要求的生物实验室和动物实验室。概念n生物污染：可分为五类 一是霉菌，它是造成过敏性疾病的最主要原因；二是来自植物的花粉；三是由人体、动物、土壤和植物碎屑携带的细菌和病毒；四是尘螨以及猫、狗和鸟类身上脱落的毛发、皮屑；五是基因污染。加强实验室生物安全重要性和紧迫性n实验室生物安全事故的相关报导n转基因和基因重组
2、技术的普及和大量应用n生物恐怖的危险性增加：美国炭疽生物恐怖事件的发生。n大量实验室参与新发传染病的实验室应急诊断或基础研究，如：SARS病毒。生物安全与科技发展n传染病的巨大危害n生物武器与生物恐怖的潜在威胁n生物技术的负面作用n生物资源及生物多样性面临的威胁n微生物学实验室的安全隐患传染病的巨大危害n传染病包括人、动物、植物传染病，尤其是人类传染病是重要的生物安全问题,传染病仍是全球死亡病因的首位，在我国，传染病仍然严重威胁人民健康和国家安全。生物武器与生物恐怖的潜在威胁n20世纪整个国际社会为禁止生物武器进行了不懈的努力,取得了一些进展。然而进入21世纪，生物武器的潜在威胁却大大增加，一
3、些国家和地区可能仍在继续研制和发展生物武器，另外生物技术的迅速发展大大增加了生物武器的潜在威胁，以美国“炭疽事件”为标志的生物恐怖对国际安全已构成了现实威胁。生物技术的负面作用n人们在开发利用生物技术时，有可能出现意想不到的安全问题。正如目前广受关注的各类转基因活生物体环境释放后对生物多样性所构成的危害。n此外，基因工程药物、疫苗、转基因食品、基因治疗等都可能存在类似问题。n生物技术的误用以及生物技术的非道德应用也可能带来很大的安全隐患，体细胞克隆人的研究便是突出一例。生物资源及生物多样性面临的威胁n从生物安全的角度来讲，外来物种的入侵、生物资源的流失有可能给国家利益造成巨大损害。转基因生物体
4、环境释放对生物多样性带来很大威胁。微生物学实验室的安全隐患n微生物和生物医学实验室是一个特殊的实验室，在其中工作的每一个人以及与其接触的周围环境，都存在很高的患有感染性疾病或影响身体健康的危险。n微生物实验室管理上的疏漏和以外事故不仅可以导致实验室工作人员的感染，也可造成环境污染和大面积人群感染。实验室生物安全法制化建设n生物多样性公约n传染病防治法n中国国家生物安全框架n实验室生物安全通用要求国家标准发布n实验室生物安全管理条例n生物安全实验室建筑技术规范实验室生物安全通用要求n2004年5月28日，实验室生物安全通用要求国家标准颁布，10月1日起正式实施。这个标准对实验室设施设备的配置、个
5、人防护和实验室安全行为作出了明确的规定。它的发布和实施，标志着我国实验室生物安全管理和实验室生物安全认可工作步入了科学、规范和发展的新阶段。实验室生物安全管理条例n由国务院法制办牵头组织制定的病原微生物实验室生物安全管理条例已出台，它将从根本上改变我国缺乏实验室生物安全标准和评价体系、缺乏统一管理规范的现状，从制度上消除实验室生物安全隐患。n有了国家标准和管理条例，制定出严格的生物安全管理与操作细则等并不能保证绝对的安全,更重要的是严格执行，一线实验室必须警钟长鸣，常备不懈。生物安全实验室建筑技术规范n为了规范生物安全实验室的设计、施工和检测，根据建设部建标2003102号文，发布了生物安全实
6、验室建筑技术规范。n该规范指导生物安全实验室设计、建造、系统和设备安装、装饰、净化、电气和自控要求、检测验收等整个过程。实验动物研究中的生物安全问题n实验动物的房舍设施n实验室生物安全管理n生物安全柜n生物安全实验室分级n生物安全实验室的防护措施n生物安全实验室与普通房舍的区别实验室生物安全管理n确保制定和实行生物安全管理计划和一个安全操作手册是实验室领导的责任。n实验室领导应确保提供常规的实验室安全方面的培训。n实验室人员应被告知有特殊危险，而且需阅读安全或操作手册并遵守标准的操作规程。实验室生物安全管理n管理制度和安全操作规程n熟知生物安全的实验室主管n掌握生物安全操作的人员n实验室防护设
7、备和器材n实验室设计和建造的要求n生物安全级别评估n监测、监督制度n事件和事故的应急措施n危险性生物废料的处理n危险性生物材料的运输生物安全员和安全委员会n每个实验室都应该有一个操作手册及一个安全实施规划，这个责任通常落在实验室负责人身上，但他也可以把一些任务分派给安全委员会或其他专职人员。n必须强调实验室安全也是所有管理人员和员工的责任,员工个人负责他们自己及同事的安全，实验室人员应安全地完成本职工作，并且不因非安全、非健康环境及行为而使自己和别人置身于伤害或疾病的危险之中,实验室人员在遇到非安全、非健康的行为或环境时，应立即向主管汇报。生物安全实验室基本要素1、熟知生物安全的实验室管理者2
8、、受过生物安全培训的实验室操作人员： 有防范潜在生物危害的意识 熟悉生物安全规程，掌握生物安全技能3、实验室自己的生物安全指南4、生物安全级别评估5、实验室文件化的规程及方法（包括常规的和特殊的）生物安全实验室基本要素6、生物安全设备（一级防护）7、实验室结构和布局（二级防护）8、生物安全柜（BSC）：BSL2/3/49、个人防护设备：手套、隔离衣、眼罩和面罩10、机械移液器11、防泄漏的离心机盖和转头等仪器 在进行一项微生物的危险评估时，最有效的手段之一就是微生物的危险组的划分微生物危害程度分级n危害等级危害等级I （低个体危害，低群体危害） ：不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒
9、和寄生虫等生物因子n危害等级危害等级 (中等个体危害，有限群体危害) ：能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限微生物危害程度分级n危害等级危害等级 III （高个体危害，低群体危害）：能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体n危害等级危害等级 (高个体危害，高群体危害)：能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传播的病原体
10、病原生物的危害等级分布种类危害等级危害等级危害等级危害等级 III危害等级危害等级危害等级危害等级I病毒185114219细菌311901真菌635寄生虫1232实验室生物安全水平分级n根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分为4级，I级防护水平最低，IV级防护水平最高n以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平n以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示动物实验室的相应生物安全防护水平生物安全实验室的分级生物安全实验室的分级实验室分级实验室分级危害等级危害等级处
11、理对象处理对象BSL-1I级级对人体和环境危害较低，不会引发健康成人疾病 BSL-2级级对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的致病因子 BSL-3III级级主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有预防治疗措施 BSL-4级级对人体有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明的微生物。尚无预防治疗措施 动物实验操作和安全设备汇总动物实验操作和安全设备汇总危险度等级防 护 水平实验室操作和安全设施I级ABSL-1限制出入，穿戴防护服和手套II级ABSL-2ABSL-1的操作加：危险警告标志。可产生气溶胶的操作应使用级或级BSC。废弃物和饲养笼具在清洗前先清除污染。III级
12、ABSL-3ABSL-2的操作加：进入控制。所有操作均在BSC内进行，并穿着特殊防护服。IV级ABSL-4ABSL-3的操作加：严格限制出入。进入前更衣。配备级BSC或正压防护服。离开时淋浴。所有废弃物在清除出设施前需先清除污染。BSL-1 实验室平面示意图洗手池BSL1 实验室设施和施设备（一）实验室设施和施设备（一）n无需特殊选址，普通建筑物即可，但应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计。n每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。n在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置。n实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯
13、。BSL1 实验室设施和施设备（二）实验室设施和施设备（二）n实验台面应防水，耐腐蚀、耐热。n实验室中的厨柜和实验台应牢固。厨柜、实验台彼此之间应保持一定距离，以便于清洁。n实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。n实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光。n应有适当的消毒设备。BSL-2 实验室平面示意图 2级生物安全柜高压锅洗眼器洗眼器洗手池带自动关闭锁指示标志34/小时，通风换气次数BSL2 实验室设施和施设备（一）实验室设施和施设备（一）n满足BSL-1的要求。n实验室门应带锁并可自动关闭。实验室的门应有可视窗。n应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工作区域外还应当有供长期
14、使用的存储空间。n在实验室内应使用专门的工作服；应戴乳胶手套。n在实验室的工作区域外应有存放个人衣物的条件。BSL2 实验室设施和施设备（二）实验室设施和施设备（二）n在实验室所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。n应在实验室内配备生物安全柜。n应设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。n应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。n有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。n实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。BSL-3 实验室平面示意图 主实验室（-40Pa)-30Pa洗消间半污染区(-20Pa)内更衣室（-10Pa)
15、内更衣室（-10Pa)缓冲间淋浴间淋浴间女外更衣室男外更衣室安全通道外走廊BSL3实验室布局实验室布局n应在建筑物中自成隔离区（有出入控制）或为独立建筑物n由清洁区、半污染区和污染区组成。污染区和半污染区之间应设缓冲间。必要时，半污染区和清洁区之间应设缓冲间。n在半污染区应设供紧急撤离使用的安全门。n污染区与半污染区之间、半污染区和清洁区之间应设置传递窗，传递窗双门不能同时处于开启状态，传递窗内应设物理消毒装置。BSL-3 实验室围护结构实验室围护结构n实验室围护结构内表面应光滑、耐腐蚀、防水，以易于消毒清洁；所有缝隙应可靠密封，防震、防火。n围护结构外围墙体应有适当的抗震和防火能力。n天花板
16、、地板、墙间的交角均为圆弧形且可靠密封。n地面应防渗漏、无接缝、光洁、防滑。n实验室内所有的门应可自动关闭；实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。n外围结构不应有窗户；内设窗户应防破碎、防漏气及安全。n所有出入口处应采用防止节肢动物和啮齿动物进入的设计。BSL-3 实验室的送风系统n应安装独立的送排风系统以控制实验室气流方向和压力梯度。应确保在使用实验室时气流由清洁区流向污染区，同时确保实验室空气只能通过高效过滤后经专用排风管道排出。n送风口和排风口的布置应该是对面分布，上送下排，应使污染区和半污染区内的气流死角和涡流降至最小程度。n送排风系统应为直排式，不得采用回风系统。n由生物安全柜排出的经内部高效过滤的空气可通过系统的排风管直接排出。应确保生物安全柜与排风系统的压力平衡。n实验室的送风应经初、中、高三级过滤，保证污染区的静态洁净度达到7级到8级。 BSL-3 实验室的排风系统n实验室的排风应经高效过滤后向空中排放。外部排风口应远离送风口并设置在主导风的下风向，应至少高出所在建筑2m，应有防雨、防鼠、防虫设计，但不应影响气体直接向上空排放。n高效空气过滤器应安装在送风管道的末端和
