微生物的实验室培养(经典版).ppt
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1、到目前为止,到目前为止, 几十项几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖生理学和医学奖,化学奖 都与微生物学有关都与微生物学有关微生物的类群微生物的类群原生生物:原生生物:原核生物原核生物:真菌真菌:病毒病毒:如酵母菌如酵母菌单细胞的动植物单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等如草履虫、单细胞藻类等微生物包含了除微生物包含了除植物界植物界和和动物界动物界以外的所有生物以外的所有生物无细胞结构无细胞结构真核细胞真核细胞细菌、蓝藻细菌、蓝藻原核细胞原核细胞课题1 微生物的实验室培养1.提供营养和条件2.防止污染一一. .培养基:培养基:微生物生存的环境和营养物质微生物生存的环境和营养物质1.1.基本成
2、分:基本成分:思考:微生物“吃”什么?碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐碳源碳源无机碳源:无机碳源:有机碳源:有机碳源:COCO2 2、COCO3 32 2- -、HCOHCO3 3- -牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等自养微生物自养微生物异养微生物异养微生物氮源氮源无机氮源:无机氮源:有机氮源:有机氮源:NHNH4 4、NONO3 3- -牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等等注:含注:含CHONCHON的的有机物有机物是是异异养型微生物的养型微生物的碳源碳源、氮源氮源、能源能源一一. .培养基:培养基:微生物生存的环境和营养物质微生物生存的环境和营养物质1.
3、1.基本成分:基本成分:碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐2.2.特殊营养特殊营养:维生素、碱基等维生素、碱基等(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)3.pH3.pH、氧气的需求:、氧气的需求:4.4.种类种类:固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基有有无无 凝固剂琼脂凝固剂琼脂分离分离 鉴定鉴定工业工业 生产生产化学成分:化学成分:物理性质:物理性质:天然培养基天然培养基 合成培养基合成培养基牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。1000ml1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的
4、配方牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O 定容至定容至1000mlNacl 5g蛋白胨蛋白胨 10g牛肉膏牛肉膏 5g琼脂琼脂20.0g分析营养构成?分析营养构成?5. 5. 配制原则配制原则目的明确:目的明确:营养全面、浓度适宜、比例恰当营养全面、浓度适宜、比例恰当适宜的适宜的pHpH值:值:有机碳源有机碳源异养型:异养型:根据微生物的根据微生物的种类、培养目的种类、培养目的选择原料选择原料自养型:自养型: 不加碳源不加碳源加入缓冲剂加入缓冲剂细菌偏碱,真菌偏酸细菌偏碱,真菌偏酸(COCO2 2碳源)碳源)生产生产科研科研耐高温需保持干燥的耐高温需保持干燥的 物品,物品,160170 12小时小时
5、接种环、接种针等接种环、接种针等 金属用具金属用具7075、30min 80、15min100、56min消毒消毒灭菌灭菌定义定义方法方法较为较为温和温和理化方法,理化方法,杀死杀死部分有害菌体部分有害菌体(不不包括芽孢、孢子)包括芽孢、孢子)强烈强烈的理化方法,的理化方法,杀死杀死所有微生物所有微生物(包括(包括芽孢、孢子芽孢、孢子)煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法化学药剂化学药剂紫外线紫外线灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌酒精、氯气、石炭酸等酒精、氯气、石炭酸等高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌培养基,培养基,100KPa、121、1530min二二. .无菌技术:无菌技术:防止外来杂菌的污
6、染防止外来杂菌的污染1.1.消毒与灭菌:消毒与灭菌:请你判断以下材料或用具是否需要消毒或请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1 1) 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿(2 2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管(3 3) 实验操作者的双手实验操作者的双手2.2.无菌范围:无菌范围:实验操作空间消毒实验操作空间消毒操作者的手、衣着消毒操作者的手、衣着消毒实验用具灭菌实验用具灭菌实验操作过程实验操作过程二二. .无菌技术:无菌技术:防止外来杂菌的污染防止外来杂菌的污染1.1.消毒与灭菌:消毒与灭菌
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