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1、1. （2017北京高考）5.为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1）,拟将其与质粒（图2）重组,再借助农杆菌导入菊花中.下列操作与实验目的不符的是A.用限制性核酸内切醐EeORl和连接醐构建重组质粒B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上2. （2016江苏高考）18.近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA
2、中20个碱基的识别序列,可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如图）。下列相关叙述错误的是A。Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成Bo向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则Co向导RNA可在逆转录酶催化下合成D.若链剪切位点附近序列为Tccagaatc则相应的识别序列为Uccagaauc3. （2016北京高考）31.（16分）嫁接是我国古代劳动人民早已使用的一项农业生产技术，目前也用于植物体内物质转运的基础研究。研究者将具有正常叶形的番茄（X）作为接穗,嫁接到叶形呈鼠耳形的番茄（M）砧木上，结果见图1。（1）上述嫁接体能够成活,是因为嫁接部位的细胞在恢岌分裂、形成组织后，经形成上下连通的输
3、导组织。（2）研究者对X和M植株的相关基因进行了分析，结果见图2.由图可知，M植株的P基因发生了类似于染色体结构变异中的变异，部分P基因片段与L基因发生融合,形成PL基因（P-L）。以P-L为模板可转录出，在上翻译出蛋白质，M植株鼠耳叶形的出现可能与此有关.（3）嫁接体正常叶形的接穗上长出了鼠耳形的新叶.为探明其原因，研究者进行了相关检测,结果见下表.检测P-LmRNA需要先提取总RNA,再以mRNA为模板出cDNA,然后用PCR技术扩增目的片段.检测P-LDNA需要提取基因组DNA,然后用PCR技术对图2中（选填序号）位点之间的片段扩增。a.rb.IIIc.II-IVd.III-IV（4）综
4、合上述实验，可以推测嫁接体中P-L基因的mRNA。4. （2014北京高考）（16分）A基因位于1号染色体上,影响减数分裂时染色体交换频率，a基因无此功能;B基因位于5号染色体上,使来自同一个花粉母细胞的四个花粉粒分离，b基因无此功能.用植株甲（AaBB）与植株乙（AAbb）作为亲本进行杂交试验，在Fz中获得所需的植株丙（aabb）.（1）花粉母细胞减数分裂时，联会形成的经染色体分离、姐妹染色单体分开,最终复制后的遗传物质被平均分配到四个花粉粒中。（2）A基因是通过将T-DNA插入到A基因中获得的,用PCR法确定T-DNA插入位置时，应从图1中选择的引物组合是。（3）就上述两对等位基因而言，R
5、中有种基因型的植株。&中表现型为花粉粒不分离的植株所占的比例应为.（4）杂交前，乙的1号染色体上整合了荧光蛋白基因C、Ro两代后，丙获得C、R基因（图2）.带有C、R基因的花粉粒能分别呈现出蓝色、红色荧光。丙获得C、R基因是由于它的亲代中的在减数分裂形成配子时发生了染色体交换.丙的花粉母细胞进行减数分裂时，如染色体在C和R基因位点间只发生一次交换，则产生的四个花粉粒呈现出的颜色分别是。本实验选用b基因纯合突变体是因为：利用花粉粒不分离的性状,便于判断染色体在C和R基因位点间，进而计算出交换频率。通过比较丙和的交换频率,可确定A基因的功能。5. （2011北京高考）TDNA可随机插入植物基因组内
6、，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的TDNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T代）。（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除,因为后者产生的会抑制侧芽的生长。（2）为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含的培养基上生长，成熟后自交,收获种子（称为T代）。（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T代播种在含的培养基上，获得所需个体。(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与植株进行杂交,再自交代后统计性
7、状分离比.(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性.(6)根据TDNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取植株的DNA,用限制酶处理后，再用将获得的DNA片段连接成环(如图)，以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。6. (12年天津高考)黄曲霉毒素BI(AFBI)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引起癌变。某些微生物能表达AFBl解毒酶，将该醉添加在饲料中可以降解AFBl,清除其海性。回答下
8、列问题：(I)AFBl属于类致癌因子.(2) AFBl能结合在DNA的G上,使该位点受损伤变为G*,在DNA复制中,G*会与A配对。现有受损伤部位的序列为,经两次复制后，该序列突变为。(3)下图为采用基因工程技术生产AFBl解毒酶的流程图.含AFBl解毒醐基因的菌株总RNAcDNAAFBl解毒前基因酵母工程菌AFBl解毒酶据图回答问题：在甲、乙条件下培养含AFBl解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶；乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶.过程I应选择菌液的细胞提取总RNA,理由是。过程中，与引物结合的模板是检测酵母工程菌是否合成了AFBl解毒酶，应采用方法。(4)选取不含AFB
9、I的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFBl解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表.据表回答问题：本实验的两个自变量分别为本实验中，反映AFBl解毒酶解毒效果的对照组是.经测定，某污染饲料中AFBl含量为IOOgkg,则每千克饲料应添加克AFBl解毒酶,解毒效果最好，同时节约了成本。(5)采用蛋白质工程进一步改造该醐的基本途径是：从提高酶的活性出发,设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的序列。(1)化学(2)-ATT-TAA-(3)甲甲菌液细胞的AFBl解毒醉基因已转录生成mRA,而在乙菌液细胞中该基因未转录AFBl解毒酶基因的CDNA抗原-抗体杂交(4)AFBl
10、的添加量和AFBl解毒酶的添加量B组(或B组+A组)5(5)脱氧核甘酸7. (12年江苏高考)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MSPI、BanlHI、Mbo【、Smal4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CICGG、GlGATCC、IGATC、CCClGGG.请回答下列问题：(1)图1的一条脱氧核甘酸链中相邻两个碱基之间依次由连接.(2)若用限制配SmaI完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度为。(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合
11、子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Smal完全切割,产物中共有种不同长度的DNA片段。(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是.(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3) 4(4) BamHI抗生素B同种限制能切割形成的末端相同，部分目的基因D，质粒反向连接8. (2017江苏高考)33.金属硫蛋白(MT)是类广泛存在的金属结合蛋白
12、，某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题：(D从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过获得用于PCR扩增.(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的位点。设计引物时需要避免引物之间形成,而造成引物自连。(3)图中步骤1代表，步骤2代表退火,步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环.(4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需要设定
13、更高的退火温度。(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有(填序号:升高退火温度降低退火温度重新设计引物).(1)逆转录cDNA(2)限制性核酸内切荫碱基互补配对(3)变性(4)引物与模板GC含量高9. (2016江苏高考)33.下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注.请回答下列问题：(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段,通过酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于态的大肠杆菌。(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中
14、添加,平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中。(3)若BamHI酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为，对于该部位，这两种酶(填都能”、都不能”或“只有一种能”)切开。(4)若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得种大小不同的DNA片段.(I)BCll和Hindnl连接感受(2)四环素引物甲和引物丙(3) 都不能(4)710. (15江苏高考)由苯丙氨酸羟化酶基因突变引起的苯丙氨酸代谢障碍,是一种严重的单基因遗传病，称为苯丙酮尿症(PKU),正常人群中每70人有1人是该致病基因的携带者(显、隐性基因分别用A、a表示).图1是某患者的家族系谱图
15、,其中H1、112、3及胎儿1山(羊水细胞)的DNA经限制酶MSPl消化，产生不同的片段(kb表示千碱基对)，经电泳后用苯丙氨酸羟化酶CDNA探针杂交，结果见图2。请回答下列问题：(1)11、Hl的基因型分别为。(2)依据CDNA探针杂交结果，胎儿Inl的基因型是。Hh长大后,若与正常异性婚配，生一个正常孩子的概率为.(3)若2和3生的第2个孩子表型正常，长大后与正常异性婚配,生下PKU患者的概率是正常人群中男女婚配生下PKU患者的倍。(4)己知人类红绿色盲症是伴X染色体隐性遗传病(致病基因用b表示)，112和3色觉正常,IHi是红绿色盲患者，则Inl两对基因的基因型是。若2和3再生一正常女孩，长大后与正常男性婚配,生一个红绿色盲且为PKU患者的概率为。(1)Aa.aa(2)Aa279/280(3)46.67(4)AaXbY1/336011. (17海淀一摸30)(17分)四膜虫是单细胞真核生物，营养成分不足时，进行接合生殖,过程如图1所示。科研人员用高浓度的DDT处理不耐药的野生型四膜虫,经筛选获得了纯合的耐药四膜虫.为研究四膜虫耐药的机理，进行了相关实验。(1)高浓度DDT处理四膜虫可获得耐药个体，原因是DDT对四膜虫具有作用，使耐药的个体被保留。(2)为研究耐药性的遗传，科研人员将四膜虫分为80组进行实验，每一组两只四膜虫
