谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px试剂盒说明书.docx
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1、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒说明书微法100T/96S注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。澜定意义:GSH-PX是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-PX不仅能够特异地催化还原型谷胱廿肽与ROS反应,生成氧化型谷胱廿肽GSSG,从而保护生物膜免受ROS的损害,维持细胞的正常功能;而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。渊定原理:GSH-Px催化有机过氧化物氧化GSH,产生GSSG;谷胱甘肽还原酶(GR)催化NADPH还原GSSG,再生GSH,同时NADPH氧化生成NAD产;NA
2、DPH在34Onm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。自备仪器和用品:低温离心机、水浴锅、可调节移液器、酶标仪、96孔板、和蒸储水。试剂组成和配置:试剂一:液体12OmLXl瓶,室温保存。试剂二:粉剂Xl瓶,4tC保存。试剂三:液体10Ll支,2(C保存。试剂四:液体200Lxl瓶,4保存。粗胸液提取:1 .组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:570的比例(建议称取约Slg组织,加入ImL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4C离心IOmin,取上清置冰上待测。2 .细菌、真菌:按照细胞数量(IO4个):试剂一体积(mL)为500
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