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1、肌微管素1(MTM1)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液肌微管素I(MTMl)ELlSA试剂盒忒验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ElJSA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B,和醉结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。肌微管素I(Mtmi)ELISA试剂盒自备材料1 .蒸储水。2 .加样器：5ukIOuk505、100u
2、l200、500uk100OuL3 .振荡器及磁力搅拌器等。安全性1 .避免直接接触终止液和底物A、Bo一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2 .实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3 .不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1 .试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2 .实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3 .不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4 .使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5 .使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份
3、及样品。6 .洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7 .底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8 .加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9 .按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-操作过程中避免任何细胞剌激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，10OC）Xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-EDTA,柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。100OXg离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液一IoooXg离心10分钟去
4、除颗粒和聚合物。4、保存一一如果样品不立即使用，应将其分成小部分70保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过漉。不要在37C或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液（50）的稀释：蒸储水50倍稀释。操作步骤1 .使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2 .根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复
5、孔的尽量做复孔。3 .加入稀释好后的标准品50Ul于反应孔、加入待测样品50Ul于反应孔内。立即加入50Ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37C温育1小时。4 .甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5 .每孔加入80Ul的亲和链酶素HRP,轻轻振荡混匀，37温育30分钟。6 .甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7 .每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀，37C温育10分钟。避免光照。8 .取出酶标板，迅速加
6、入50Ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9 .在45Onm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。试剂盒性能1 .灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990o2 .特异性：不与其它细胞因子反应。3 .重复性：板内、板间变异系数均小于10%。肌微管素I（Mtmi）ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长45Onm的醒标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y）,相应的BFGF标准品浓度为横坐标（X）,做得相应的曲线，样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出
7、相应的浓度。3、检测值范围：0-800pgml4敏感度：1.0pg/ml6-K-PG小鼠6酮前列腺素规格：48T/96T5-HT小鼠5羟色胺规格：48T/96T5-NT小鼠5核昔酸酶规格：48T/96TColIV小鼠IV型胶原规格：48T/96TPI11NP小鼠In型前胶原肽规格：48T/96TCoim小鼠m型胶原规格：48T/96TCol小鼠II型胶原规格：48T/96TOH小鼠25羟基维生素D3规格：48T/96TPlCP小鼠I型前胶原竣基端肽规格：48T/96TClCP小鼠I型前胶原C末端肽规格：48T/96TNTX小鼠I型胶原N末端肽规格：48T/96TColI小鼠I型胶原规格：48T
8、/96T17-KS小鼠17-酮类固醇规格：48T/96T17-0HP小鼠17羟孕酮规格：48T/96T17-0HCS小鼠17羟皮质类固醇规格：48T/96T16-0HE-1小鼠16a羟基雌酮1规格：48T/96T15-L0/L0X小鼠15脂加氧酶规格：48T/96T1,3-Dglu小鼠1,3-BD葡葡糖甘酶规格：48T/96TPSA豌豆凝集素规格：48T/96THIS豚鼠组胺规格：48T/96TTGF-1豚鼠转化生长因子Bl规格：48T/96TMHC/GPLA豚鼠主要组织相容性复合体规格：48T/96TTNF-a豚鼠肿瘤坏死因子a规格：48T/96TCH50豚鼠血清总补体规格：48T/96TNO豚鼠血清一氧化氮规格：48T/96TGH豚鼠生长激素规格：48T/96TeNOS豚鼠内皮型一氧化氮合成酶规格：48T/96TET-1豚鼠内皮素1规格：48T/96TET-1豚鼠内皮素1规格：48T/96TIgG豚鼠免疫球蛋白G规格：48T/96TIgE豚鼠免疫球蛋白E规格：48T/96TIgA豚鼠免疫球蛋白A规格：48T/96TOVASlgG豚鼠卵清蛋白特异性IgG规格：48T/96TOVASlgE豚鼠卵清蛋白特异性IgE规格：48T/96TCGRP豚鼠降钙素基因相关肽规格：48T/96T
