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1、血清甘油三酯测定标准操作规程1 .检验原理(酶法)甘油三酯经脂蛋白酯酶(LPL)作用,可以水解为甘油和游离脂肪酸,甘油在ATP和甘油激酶(GK)的作用下,生成3-磷酸甘油,再经磷酸甘油氧化酶(GPO)作用氧化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢,过氧化氢与4-氨基安替比咻(4-AA)及和3,5-二氯-2-羟笨磺酸钠(DHBS)在过氧化物酶(PoD)作用下,生成红色酶类化合物,其显色程度与甘油三酯的浓度成正比。甘油三酯+。2上J甘油+游离脂肪酸甘油+ATP二3-磷酸甘油+ADP3-磷酸甘油+O2磷酸二羟丙酮+乩。22 ”22+4-AA+DHBS您.红色醒类物质+4H2O2.试剂主要组成成分产品组成成分浓度
2、RlTriS缓冲液50mmolLTritionX-100lml/LR24-氨基安替比咻0.4mmolL甘油激酶1000U/L脂蛋白酯酶1000U/L磷酸甘油氧化酶4000U/L过氧化物酶1500U/L硫酸镁.七水合17unolL3,5-二氯-2-羟笨磺酸钠1.8mmolLSTD甘油2.26mmolL3.样本要求:新鲜无溶血血清。在2225C保存8小时,28C保48小时,-20C可保存1年。样本应避免反复冻融!4.检验方法;仪器法(详见DF-603DI-600标准操作规程)5参考范围:样本参考范围(mmolL)血清1.76.检验结果的解释:6. 1样本含量超出线性范围时,建议用O.9%(WV)的
3、氯化钠溶液稀释样本,最大稀释不超过5倍。7. 2.单位换算:mgdl=mmolL88.58. 检验方法的局限性8.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊,或以水空白在510nm处吸光度大于0.200时不能使用。8.试剂性能指标8.1 试剂外观:Rl和R2均为无色透明或淡黄色液体,无悬浮物及沉淀。8. 2装量:不低于标识值。8. 3空白吸光度:在51Onm处,光径ICm时,空白吸光度AWO.2008. 4线性区间:试剂的线性区间为1.13-9.04mmolL,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900;b)1.13-2.03mmolL区间内,线性绝
4、对偏差不超过0.20mmolL;2.03-9.04umolL区间内,线性相对偏差不超过10%。8. 5准确度:相对偏差应不大于15%。8. 6分析灵敏度:在51Onm处,光径IenI时,测量已知浓度样品换算成ImmoI/L的甘油三酯时,吸光度变化4A三olL20.0058. 7精密度8.7. 1批内精密度:CV5%8. 7.2批间精密度:R10%8.8 稳定性:(2-8)C下,原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试,应满足1-8.7.1的要求。8.9 PH值:PH值范围是6.00-7.50.8.10校准品8.10.1外观:无色透明液体。8.10.2净含量:不少于标识值8.10.3准确度:标准生化分析仪和试剂后,测定校准品,相对偏差应不大于10%。8.10.4均一性:瓶间均一性:CV5%8.10.5稳定性:(2-8)C下,原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后13个月的试剂进行测试,应满足8.10.1-8.10.4的要求。9.临床意义:廿油三酯是三元醇廿油和三个长链脂肪酸结合而成的酯。部分由肝脏合成,部分由食物中摄取。甘油三酯测定用作糖尿病、肾病、肝梗阻、脂类代谢紊乱以及多种其它内分泌疾病患者的诊断及治疗监测。