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1、花粉的发育时期花粉的发育时期花药培养属于器花药培养属于器官培养范畴官培养范畴花粉培养也称为小孢花粉培养也称为小孢子培养。子培养。是从花药中分离出是从花药中分离出花粉粒花粉粒,使之成为分散的或游离使之成为分散的或游离的状态的状态,通过培养使花粉粒脱分通过培养使花粉粒脱分化化,进而发育成完整植株的过程进而发育成完整植株的过程.属于细胞培养的范畴属于细胞培养的范畴技术要点技术要点黑暗培养下烟黑暗培养下烟草的愈伤组织草的愈伤组织 l影响变异的因素：l基因型 l发生途径 l继代次数 l减少变异的措施：l选择变异率低的品种 l选择不容易产生变异的发生途径 l严格控制继代代数（10代以内）原生质体培养基原生
2、质体培养基分离时酶的溶剂为原生质体培养基分离时酶的溶剂为原生质体培养基甘露醇和蔗糖为渗透压调节剂甘露醇和蔗糖为渗透压调节剂在酶液中加入适量的氯化钙和磷酸二氢钾作为原生质体稳定剂，可增强质膜在酶液中加入适量的氯化钙和磷酸二氢钾作为原生质体稳定剂，可增强质膜的稳定性的稳定性酶溶剂用原生质体培养基或特殊配制酶溶剂用原生质体培养基或特殊配制Before protoplasts can be cultured it is necessary to test them for viability.Brassica protoplastsThe optimum plating efficiency(tobacco protoplasts)5104 protoplasts/cm3.Protoplasts fail to divide when plated at one tenth of this concentration
