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1、细胞学的发展历史DR.GEORGE PAPANICOLAOU (1883-1962)DR.GEORGE PAPANICOLAOU (1883-1962)20世纪末细胞病理学的创新理论创新：巴氏分级TBS诊断形式。1.美国著名细胞病理学家、细胞病理试剂发明家；2.是包括美国细胞病理家协会在内的 7 家医学协会 常任理事；3.美国密西根州威尼州立医学院免疫/微生物学 博士、化学/生物化学硕士；4.发表细胞病理学论文75篇；5.是Thinprep(TCT)Autocyte(LCT)LiqiuPrep(LPT)的发明人。液基细胞涂片之父姆斯.盖尔博士 细胞混悬细胞混悬1 1、提高标本质量、提高标本质量
2、2 2、提高检出率、提高检出率3 3、提高工作效率、提高工作效率4 4、使标本更具有统一性、一致、使标本更具有统一性、一致性性白细胞干扰（传统涂片）宫颈涂片常见细胞（液基涂片）100%的标本被收集无空气干燥人为假像直接保存标本收集过程容易一份取样配置不满意标本率低需要观察的细胞(5万)少于传统涂片(30万-50万)可重复检验 和附属实验(HPV,衣原体,淋病)形态学差异形态学差异CP vs.LB Preparations 形态学差异形态学差异 传统制片传统制片 液基制片液基制片20%标本移至玻片标本移至玻片100%标本被收集至保存液中标本被收集至保存液中制片技术不稳定、不能重复制片制片技术不稳
3、定、不能重复制片技术稳定可靠、可以重复技术稳定可靠、可以重复易受血、粘液、炎性物遮盖易受血、粘液、炎性物遮盖去除血、粘液、及大量炎性遮盖物去除血、粘液、及大量炎性遮盖物细胞分布不均匀细胞分布不均匀,易重叠易重叠细胞分布均匀集中细胞分布均匀集中,不易重叠不易重叠镜下观察费时费力镜下观察费时费力诊镜下观察省时省力诊镜下观察省时省力成本较低成本较低成本较高成本较高 Total Cases CP(n=19,923)LBP(n=81,120)Vassilakos et al.,J Reprod Med,2000重视制片质量是开展液基细胞学检查的基础必须确保涂片的鳞状细胞数量及子宫颈管上皮细胞数量必须确保
4、涂片中细胞具有较均匀的分布必须确保涂片的染色质量最终确保细胞形态结构清晰在推广液基细胞涂片中必须重视制片质量在推广液基细胞涂片中必须重视TBS传播 20世纪末子宫颈细胞病理学的 1988年 TBS问世 1991年 第一次修订 1994年 TBS第一版正式发行 1995年 中国开始使用TBS 2001年 第二次修订 2004年 TBS第二版正式发行 正确的标签和识别信息（由临床医生提供）：病人的姓名、年龄、送检单位、医生签名。相关的临床数据（由临床医生提供）：月经周期、避孕药、怀孕、产后4个月内、子宫内节育环、不正常流血、子宫切除、其它手术、HPV检测结果、其它。鳞状上皮细胞数量要求达到最低细胞
5、数量标准 子宫颈管移行区细胞一般要求达到最低细胞数量标准 TBS宫颈细胞学中的标尺中层鳞状细胞核：12.5倍为炎性反应。大2.53倍为ASCUS；大3倍以上为LSIL。宫颈腺上皮细胞核：大35倍，可能为反应性、非典型腺细胞或腺原位癌。嗜中性白细胞:滴虫为该细胞的12倍。最低鳞状上皮细胞数量标准 传统细胞涂片中保存清晰的鳞状上皮细胞的最低细胞数量标准为800012000个 液基涂片中保存清晰的鳞状上皮细胞的最低细胞数量标准为5000个 液基涂片中鳞状上皮细胞5000 20000称为“尚可（borderline）或鳞状细胞数量偏低”一张高质量的液基涂片鳞状上皮细胞数量为40000个以上，并且平铺不
6、重叠（）核面积大约为正常中层鳞状细胞核面积的2.53倍（大约35m2）。核浆比轻度增高（N/C）。核轻度深染，染色质分布或核型不规则。核异常伴随胞浆的强嗜橘黄色改变（“非典型角化不全”或角化不良）。非典型鳞状细胞、意义不明确（ASCUS）在传统涂片和液基细胞学中表现相似；在传统涂片中，细胞可能更大、更扁。（）细胞常单个出现，或呈少于10个细胞的小片；偶尔在传统涂片上，细胞可以“成串”排列在粘液中。细胞大小等同于化生细胞，其核大约较正常细胞大1.5至2.5倍。核浆比接近HSIL的。在判断标本是符合ASC-H还是HSIL时，若出现核的异常如核深染、染色质不规则，核形异常且呈灶性不规则，都更倾向于H
7、SIL的判读。细胞常单个出现，或呈少于10个细胞的小片；偶尔在常规涂片上，细胞可以“成串”排列在粘液中。细胞大小等同于化生细胞，其核大约较正常细胞大1.5至2.5倍。核浆比例接近HSIL的。在判断标本是符合ASC-H还是HSIL时，若出现核的异常如核深染、染色质不规则、核形异常且灶性不规则，都更倾向于HSIL的判读。低级别鳞状上皮内病变（Low-grade Squamous Intraepithelial Lesion,LSIL）细胞单个或成片排列。胞浆“成熟”或为表层型胞浆的细胞。细胞大，胞浆多而成熟，边界清楚。核增大，面积大于正常中层细胞的3倍，核浆比例轻度增加。核不同程度深染，伴有大小、
8、数量和形状的变化。双核和多核常见。核染色质均匀分布但常呈粗颗粒状，有时染色质呈煤球样或浓缩不透明。一般无核仁，即使有也不明显。核膜轻度不规则，但可光滑。细胞浆的边界清楚。核周空腔（挖空细胞化）是由边界清楚的核周透亮区及浓染的边缘胞浆组成，它是低级别鳞状上皮内病变的一个特征，但不是判读低级别鳞状上皮内病变所必须的；有时，胞浆浓稠并嗜橘黄色（角化）。核周胞浆空腔化或强嗜橘黄色的细胞，必须也同时具有核的异型性才能诊断低级别鳞状上皮内病变；只有核周空晕，而无核的异型性时不足以判读低级别鳞状上皮内病变 不满意标本涂片（传统涂片）宫颈涂片常见细胞（液基涂片）反应性细胞改变（传统涂片）阴道内正常菌群：阴道内
9、正常菌群：Dderlein杆菌杆菌（乳酸杆菌）非典型鳞状细胞意义不明确（液基涂片）ASCUS或ASC-H（传统涂片）细胞多角形，浓稠的化生性胞浆，核增大，核轮廓光滑非典型鳞状细胞不除外高级别上皮内病变（液基涂片）ASC-H（传统涂片）。50岁绝经后妇女ASCH(传统涂片和液基涂片)。主图（传统涂片）可见柱状和多角形细胞，胞浆浓稠，核浆比例高。核染色质为颗粒状，有小的染色质小体或核仁。左下角插入图片为另一例标本的细胞（液基涂片），与上例表现相似，只是胞浆少、不那么浓稠。可能的判读意见包括反应性宫颈管细胞，ASC-H或HSIL。核仁的出现不是HSIL的典型表现。HPV检测为阴性。低级别上皮内病变伴
10、有HPV感染（液基涂片）NILM或ASCUS或ASC-H（传统涂片）。27岁妇女，月经周期第8天，有细胞学异常病史。细胞多角形，浓稠的化生性胞浆，核增大，核轮廓光滑，怀疑为交界的SIL（LSIL和HSIL之间）。高级别上皮内病变（液基涂片）低级别上皮内病变（传统涂片）低级别上皮内病变（传统涂片）角化性鳞状细胞癌（液基涂片）低级别鳞状上皮内病变（液基涂片）。32岁妇女，月经周期第15天，常规宫颈细胞学筛查。所有的细胞增大，核染色质呈“煤球样”，胞浆边界清楚，多核。角化性鳞状细胞癌（液基涂片）非角化性鳞状细胞癌（传统涂片）非角化性鳞状细胞癌（液基涂片）非典型子宫颈管上皮细胞（传统涂片）非典型子宫颈
11、管上皮细胞（传统涂片）非典型腺上皮细胞，倾向于肿瘤（液基涂片）非典型子宫内膜细胞（液基涂片）非典型子宫内膜细胞（液基涂片）子宫颈管原位腺癌（液基涂片）。宫颈管腺癌（液基涂片）2001年Bethesda系统既没有提倡也没有劝阻宫颈细胞学辅助检查的应用；然而，工作论坛小组成员认识到有必要制定一些指导原则，以规范对人类乳头瘤病毒（HPV）检查和在未来可能增添的其他检查结果的报告 影响足够的细胞数量炎性细胞干扰因素临床妇科医生取样技术。制片技术。影响鲜艳的细胞清晰度、色彩的因素细胞处理液（固定液）。染色液质量。染色技术。宫颈脱落细胞的染色一定要应用巴氏染色法进行染色。我院经过多年的摸索，结合我院的实际情况，对巴氏染色法进行了简化，现给大家进行介绍：1、Harris苏木素液1、5 2、自来水浸洗2-3分钟 3、0.5%盐酸溶液浸洗1-2次 4、依次置入95%乙醇三次 5、EA36液2、5 6、自来水浸洗
