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1、 观察根尖分生组织观察根尖分生组织 细胞的有丝分裂细胞的有丝分裂 一、实验原理：一、实验原理：1 1、植物根尖、茎尖等分生区细胞能进、植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝分裂；行有丝分裂；2 2、在有丝分裂过程中，染色体发生规、在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动态变化；律性动态变化；3 3、染色体可被碱性染料着色，便于观、染色体可被碱性染料着色，便于观察；察；4 4、根据显微镜下观察到的染色体特点、根据显微镜下观察到的染色体特点可识别有丝分裂不同时期。可识别有丝分裂不同时期。观察观察根尖根尖的纵切面的纵切面分生区分生区根冠根冠伸长区伸长区成熟区成熟区分生组织分生组织保护组织保护组织根据细胞的
2、形态特根据细胞的形态特点分为几部分？点分为几部分？二二.材料用具材料用具 1.1.洋葱（葱，蒜）洋葱（葱，蒜）2.2.显微镜，载玻片，盖玻片，剪刀，镊子，显微镜，载玻片，盖玻片，剪刀，镊子，滴管，玻璃皿滴管，玻璃皿 3.15 3.15盐酸盐酸9595酒精混和（酒精混和（1:11:1）作为解）作为解离液，离液，0.01g/ml0.01g/ml或或0.02g/ml0.02g/ml龙胆紫染液龙胆紫染液4.4.洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。三三.方法步骤方法步骤(一一).).洋葱根尖的培养洋葱根尖的培养 实验课前的实验课前的34d,34d,取洋葱一个，放在广取洋葱一个，放
3、在广口瓶或烧杯上，瓶内装满清水，放置在口瓶或烧杯上，瓶内装满清水，放置在光照处。注意每天换水光照处。注意每天换水1212次，使洋葱次，使洋葱的底部总是接触到水。待根长到的底部总是接触到水。待根长到5cm5cm时，时，取生长健壮的根尖制片临时装片观察。取生长健壮的根尖制片临时装片观察。解离：解离：取根尖取根尖23mm23mm（最好在每天的（最好在每天的10141014点取根，因此时间是洋葱根尖点取根，因此时间是洋葱根尖有丝分裂高峰期），立即放入盛有质量有丝分裂高峰期），立即放入盛有质量分数为分数为15%15%的氯化氢溶液和体积分数的氯化氢溶液和体积分数为为95%95%的酒精溶液的混合液（的酒精溶
4、液的混合液（1 1：1 1）的玻璃皿中，在室温下解离的玻璃皿中，在室温下解离35min35min 何为解离？目的？何为解离？目的？是使得细胞相互分离开来是使得细胞相互分离开来(二二).).装片的制作装片的制作 另外解离时间不宜过短，否则根另外解离时间不宜过短，否则根尖未充分解离，压片时细胞分不尖未充分解离，压片时细胞分不开，细胞重叠；但又不能太长，开，细胞重叠；但又不能太长，否则使根尖过分酥软，无法进行否则使根尖过分酥软，无法进行漂洗和染色，且染色体成分被破漂洗和染色，且染色体成分被破坏。这一步是实验成功与否的关坏。这一步是实验成功与否的关键，也可手拿镊子，轻轻按正在键，也可手拿镊子，轻轻按正
5、在解离的根尖，感觉解离的根尖，感觉酥软酥软即可。即可。漂洗漂洗 用镊子去除根尖后放入盛有清水用镊子去除根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗的玻璃皿中漂洗1010分钟分钟 （思考：目的？）思考：目的？）需要注意：需要注意：动作轻，不要把根尖弄碎动作轻，不要把根尖弄碎 漂洗的目的是去除根中多漂洗的目的是去除根中多余的解离液，特别是盐酸，余的解离液，特别是盐酸，因为染色时用的是碱性染因为染色时用的是碱性染料龙胆紫，酸与碱发生反料龙胆紫，酸与碱发生反应会影响染色效果应会影响染色效果 染色染色 再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴有一滴龙胆紫的在载玻片上，染色滴有一滴龙胆紫的在载玻
6、片上，染色3-5min3-5min 染完之后用吸水纸将多余的染液除染完之后用吸水纸将多余的染液除去，再加一滴请水。去，再加一滴请水。过长过短都不好，过长过短都不好，为什么？（深，浅）为什么？（深，浅）目的是使染色体着色。目的是使染色体着色。染色时间过长过短都不好，为什么？染色时间过长过短都不好，为什么？染色时间亦不能过长，否则会使染色时间亦不能过长，否则会使染色体与周围的其他结构均被着色，染色体与周围的其他结构均被着色，这样就无法形成颜色上的反差，不这样就无法形成颜色上的反差，不便于观察。便于观察。染色时间亦不能过短，否则会使染色时间亦不能过短，否则会使染色体不能很好着色。染色体不能很好着色。
7、实验步骤 制片 注意：注意：盖盖玻片时要从一侧接触，慢慢放下，注盖盖玻片时要从一侧接触，慢慢放下，注意不要产生气泡；意不要产生气泡；压片时不要太用力，只要细胞散开既可。压片时不要太用力，只要细胞散开既可。观察观察显微镜的使用显微镜的使用低倍镜观察低倍镜观察 慢慢移动装片找到分生区细胞慢慢移动装片找到分生区细胞 特征特征：较小，呈正方形，排列紧密，有的：较小，呈正方形，排列紧密，有的正在分裂正在分裂换高倍镜观察换高倍镜观察 用细准焦螺旋和反光镜调节视野清晰用细准焦螺旋和反光镜调节视野清晰找到有丝分裂前，中，后，末期的细胞，找到有丝分裂前，中，后，末期的细胞，并用铅笔绘图。并用铅笔绘图。分裂间期分
8、裂间期DNADNA复制和有关蛋白质的合成复制和有关蛋白质的合成分裂期分裂期:前期前期 中期中期 后期后期 末期末期 注意：染色体的行为变化注意：染色体的行为变化根根冠冠分生分生区区伸长伸长区区观察观察注意：注意：在一个视野中处于分裂期的细胞在一个视野中处于分裂期的细胞是少数的，绝大多数的细胞处于？是少数的，绝大多数的细胞处于？期，为什么？期，为什么？一个视野中很难找全各个时期的一个视野中很难找全各个时期的细胞，可以慢慢移动装片，从临近细胞，可以慢慢移动装片，从临近的视野中找。的视野中找。根尖培养根尖培养解离解离剪取根尖的长度剪取根尖的长度2 23mm3mm 立即放入盛有适量解离液的玻璃皿立即放
9、入盛有适量解离液的玻璃皿中中 室温解离室温解离3-53-5分钟最佳（酥软，不分钟最佳（酥软，不能太硬也不能太软）能太硬也不能太软）用镊子轻轻取出根尖用镊子轻轻取出根尖漂洗漂洗用镊子取出根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分钟需要注意：动作轻，不要把根尖弄碎染色染色再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴有一滴龙胆紫的载波片中，染色有一滴龙胆紫的载波片中，染色3-3-5min5min需要注意需要注意:夹取根尖时一定要注意不要夹根夹取根尖时一定要注意不要夹根尖头部，可以夹取根尖的后部。尖头部，可以夹取根尖的后部。染色的时间控制染色的时间控制制片制片 盖盖玻片时要从一盖盖玻片
10、时要从一侧接触，慢慢放下，侧接触，慢慢放下，注意不要产生气泡；注意不要产生气泡；压片时不要太用力，压片时不要太用力，只要细胞散开既可。只要细胞散开既可。利用漂利用漂洗的时洗的时间观察间观察固定装固定装片片三、三、方法步骤方法步骤1.1.培养根尖培养根尖.2.2.装片制作装片制作:（1 1）解离）解离:（2 2）漂洗：）漂洗：（3 3）染色：）染色：（4 4）制片：）制片：3.3.观察观察:（1 1）低倍镜观察：）低倍镜观察：（2 2）高倍镜观察：）高倍镜观察：练习练习:1.1.细胞周期中，要辨认染色体形细胞周期中，要辨认染色体形态和数目，应选择（态和数目，应选择（）A A、间期、间期 B B、
11、前期、前期C C、中期、中期 D D、后期、后期C C2.2.同学观察洋葱根尖细胞有丝分裂装片同学观察洋葱根尖细胞有丝分裂装片时发现被观察的材料边缘为浅蓝色时发现被观察的材料边缘为浅蓝色,中中间为白色间为白色,下列有关对这一现象的分析下列有关对这一现象的分析,正确的是正确的是()A A染色时间过长染色时间过长 B B染色时间过短染色时间过短 C C解离不充分解离不充分 D D漂洗不彻底漂洗不彻底 B3 3、在观察有丝分裂的实验中，一般用根、在观察有丝分裂的实验中，一般用根尖而不能用洋葱鳞片叶表皮的原因是尖而不能用洋葱鳞片叶表皮的原因是（）（）A A洋葱表皮细胞因有紫色液泡而使分洋葱表皮细胞因有
12、紫色液泡而使分裂看不清裂看不清 B B洋葱表皮细胞太小洋葱表皮细胞太小 C C洋葱表皮细胞一般不发生分裂洋葱表皮细胞一般不发生分裂DD根尖细胞较大且呈正方形根尖细胞较大且呈正方形C4.4.某同学在观察植物细胞有丝分裂装片某同学在观察植物细胞有丝分裂装片时，在根尖分生区只看到各个分裂时期时，在根尖分生区只看到各个分裂时期的静态的细胞，而看不到细胞内染色体的静态的细胞，而看不到细胞内染色体动态变化，原因是动态变化，原因是 A A压片用力过大使细胞死亡压片用力过大使细胞死亡 B B细胞分裂速度缓慢，肉眼很难看出细胞分裂速度缓慢，肉眼很难看出其变化过程其变化过程 C C细胞已被杀死，本来就不可能看到细胞已被杀死，本来就不可能看到动态变化动态变化 D D所观察的细胞不适合，应选择分裂所观察的细胞不适合，应选择分裂后期的细胞进行定点观察后期的细胞进行定点观察C5.5.在下列实验中，必须始终用活细在下列实验中，必须始终用活细胞做材料的实验是胞做材料的实验是()A A在光学显微镜下观察植物细胞在光学显微镜下观察植物细胞分裂的过程分裂的过程 B B观察植物细胞的质壁分离和复观察植物细胞的质壁分离和复原原 C C叶绿体色素的提取和分离叶绿体色素的提取和分离 D D观察人体口腔上皮细胞的实验观察人体口腔上皮细胞的实验(用碘染色用碘染色)B
