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1、观察洋葱根尖细胞有丝分裂观察洋葱根尖细胞有丝分裂 1.学会制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片学会制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片一、实验目的：一、实验目的：2.学会识别有丝分裂的不同时期，并比较各时期学会识别有丝分裂的不同时期，并比较各时期的特点的特点二、实验器材二、实验器材洋葱、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、剪洋葱、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、剪刀、镊子、清水、吸水纸、滴管、解离液、刀、镊子、清水、吸水纸、滴管、解离液、0.01g/ml0.01g/ml的龙胆紫溶液的龙胆紫溶液二、实验步骤：n成熟区没有细胞分裂。n伸长区有少量细胞分裂。n分生区有大量细胞分裂。1.选材：切取洋葱根尖切取洋葱根尖23
2、mm根尖根尖解离液解离液解离液解离液=15%的盐酸的盐酸+95%的酒精（的酒精（1：1混合）混合）35分钟分钟问：解离时间过长或者过短分别会有问：解离时间过长或者过短分别会有什么影响？什么影响？答：解离时间过短导致细胞不分散，答：解离时间过短导致细胞不分散，易重叠；时间太长会解离过度使细胞易重叠；时间太长会解离过度使细胞结构破坏。均不利于观察。结构破坏。均不利于观察。问：解离后的细胞是死的还是活的？问：解离后的细胞是死的还是活的？答：已被盐酸杀死，不具备活性。答：已被盐酸杀死，不具备活性。解离液解离液清水清水根尖根尖10分钟分钟漂洗的目的是洗去多余盐酸，防止解离过度和漂洗的目的是洗去多余盐酸，
3、防止解离过度和影响染色。（染色剂是碱性）影响染色。（染色剂是碱性）清水清水龙胆紫染液龙胆紫染液根尖根尖35分钟分钟利用碱性染液可将细胞不同结构染成深浅不一利用碱性染液可将细胞不同结构染成深浅不一的颜色，以便于观察。的颜色，以便于观察。0.01g/mL0.01g/mL的龙胆紫染液的龙胆紫染液也可以用也可以用0.02g/mL0.02g/mL的醋酸洋红代替。的醋酸洋红代替。注意：注意：1.盖盖玻片时尽量不要产生气泡。盖盖玻片时尽量不要产生气泡。2.压片时力度适中，过重易压碎根尖、玻压片时力度适中，过重易压碎根尖、玻片；过轻则不易使细胞分散片；过轻则不易使细胞分散,不能错动。不能错动。用镊子将根尖取出
4、放在载玻片用镊子将根尖取出放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖上，加一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，再加一个载玻片，再加一个载玻片，轻轻的挤压轻轻的挤压两个载玻片，使细胞分散。两个载玻片，使细胞分散。用显微镜观察细胞有丝分裂的各个时期用显微镜观察细胞有丝分裂的各个时期注意：注意：先低倍镜，后高倍镜先低倍镜，后高倍镜 爱护显微镜，特别是物镜保护爱护显微镜，特别是物镜保护 我们的目标是我们的目标是分生区细胞分生区细胞 6.6.观察观察显微镜下的细胞有丝分裂末期后期中期低倍镜间期末期中期后期前期高倍镜问：能否观察到某一个细胞有丝分裂的全部过程？问：能否观察
5、到某一个细胞有丝分裂的全部过程？为什么？为什么？答：不能，解离时细胞已被杀死，不能再进行分裂。答：不能，解离时细胞已被杀死，不能再进行分裂。问：如何通过观察装片来确定一个细胞周期中各个问：如何通过观察装片来确定一个细胞周期中各个分裂时期的长短？分裂时期的长短？答：看装片中观察到的该时期的细胞数目多少。答：看装片中观察到的该时期的细胞数目多少。处于某一时期的细胞越多，该时期的时间越长。处于某一时期的细胞越多，该时期的时间越长。反之越短。反之越短。实验成功的关键：实验成功的关键：1 1、解离充分是实验成功的必要条件。、解离充分是实验成功的必要条件。2 2、染色是实验成功的关键步骤。、染色是实验成功的关键步骤。3 3、制片是实验成功的重要保障。、制片是实验成功的重要保障。注意：注意：三种浓度三种浓度：盐酸是：盐酸是质量分数浓度质量分数浓度（15%15%）、酒精是）、酒精是体积分数体积分数（95%95%）、染液是）、染液是质量浓度质量浓度（0.01g/mL0.01g/mL的的龙胆紫或龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸洋红）。的醋酸洋红）。三个时间三个时间：解离：解离3 35min5min、漂洗、漂洗10min10min、染色染色3 35min5min。
