食品种常见的霉菌知识.docx

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1、霉菌不是分类学上的名词,而是一些丝状真菌的通称,属真菌的一部分;其对人类具有双重性,有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的生产等,不利方面是它能引起农副产品、食品、原料及器材的腐烂,也感染并引起人类和动、植物的多种疾病,少数种类,如黄曲霉,能产生黄曲霉毒素,黄曲霉毒素是一种致癌物质,危害人、畜的健康和生命。因此,霉菌的检测对于食品的安全性很重要。食品种常见的霉菌1、曲霉菌属曲霉菌是一种典型的丝状菌,占空气中真菌的12%左右,它以土壤或空气为媒介,可引起食物、谷物、豆类和果蔬的霉腐变质,该霉菌在原料贮藏期间几乎不会死亡。因其对干燥抗性强,故常在一些干燥食品中被分离出来,糖类和壳类

2、处理工厂常被此类霉菌污染,而烘焙产品中也常因原料,如糖、花生、油、大米、大豆、绿豆等原料带入曲霉菌污染。肉眼可以通过菌落生长速度,表面质地、颜色、形态和气味等鉴别,其中颜色是曲霉菌分类的依据之一。(1)烟曲霉菌落开始为白色,2-3天后转为蓝绿色,但边缘仍为白色,数日后变为深绿色、烟绿色。初为绒状或絮状,随着时间推移变为粉末状,边缘部分也出现颜色,背面无色或带点褐色。(2)黄曲霉它是温暖地区常见曲霉菌,在20-3OC最易产生强致癌的黄曲霉毒素,花生、玉米,大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品、水产品等均有黄曲霉毒素污染。菌落正面色泽也随其生长由白色变为黄色及黄绿色,呈半绒毛状。抱子成熟后颜

3、色变为褐色。表面平坦或有放射状沟纹,背面无色或略呈褐色。(3)黑曲霉黑曲霉菌落初为白色,常有鲜黄色区域,厚绒状,继而黑色,背面无色或中央部分略带褐色,且能引起曲霉菌病,还能产生黑曲霉毒素。(4)土曲霉土曲霉菌落淡褐色或褐色或土黄色,比较小,呈圆形。(5)杂色曲霉菌形紧密,呈绒毛状、羊毛状或两者兼有,颜色变化范围相当广泛,在不同菌株的菌落上,有时局部会出现淡绿、灰绿、浅黄或粉红等颜色,而菌落背面则近乎无色、黄橙色或玫瑰色;有的菌落上会形成无色至紫红色的液滴。(6)构巢曲霉菌菌落圆形,暗绿色,中央呈粉末状,边缘绒毛状,当产生大量闭囊壳时呈黄褐色,背面紫红色。2、青霉它是一种常见的污染菌,与曲霉一样

4、在自然界中广泛分布,但曲霉生长于中温至高温、电囊梗末端膨大、多为放射状,而青霉以中温性为主、泡囊梗末端不膨大、多为扫帚状,主要蓝有灰绿青霉黄绿青霉、桔青霉、岛青霉等,从土壤或空气中很易分离。青霉的电子耐热性较强,菌体繁殖温度较低,酒石酸、苹果酸、柠檬酸等烘焙产品常用的酸味剂又是它喜爱的碳源,因而常常引起这些制品的霉变,青霉也极易污染稻谷,而使米粒变黄,这类变质米称这为“黄变米”。青霉一般在冬季和春季生长旺盛,容易造成稻谷、水果、蔬菜、肉食及衣履腐败。若是加强通风、降低温度,减少空气相对湿度,可以大大减轻青霉的危害。菌落正面有青绿色、蓝绿色、黄绿色和灰绿色,四周有明显的淡色边缘。3、毛霉毛霉又叫

5、黑霉、长毛霉,在土壤、粪便、禾草及空气等环境中存在,高温、高湿度以及通风不良的条件下生长良好。在工厂湿度高的环境、通风不良的环境与气温差异显著的地方(如湿的地板和天花板),常有此霉菌存在。毛霉分为多种毛霉,通常菌落为絮状,初为白色或灰白色,后变灰至褐灰色,毛霉无假根。毛霉的菌丝多为白色,狗子囊黑色或褐色,狗子囊电子大部分为无色或浅兰色,因种而异,主要有以下几种:(1)高大毛霉,抱子梗直立不分枝,菌丝不分枝,菌丝高达3-12Cnb菌落初为白色,逐渐变为浅淡蓝色。(2)总状毛霉,毛霉中分布中最广的一种,抱子梗总状分枝,菌丝灰白,直立稍短。(3)鲁氏毛霉,狗子梗为假轴状分枝,菌丝在不同的培养基上可略

6、有颜色。4、根霉根霉,为腐生菌,最常见的是匍枝根霉【又称黑根霉、面包霉】和米根霉,多生于面包、馒头和富含淀粉质的食物上,使食物腐烂变质,又能引起甘薯软腐病。黑根霉是目前发酵工业上常使用的微生物菌种,能糖化淀粉、转化蔗糖,产生乳酸、反丁烯二酸及微量酒精。黑根霉需要氧气才可以存活,最适生长温度约为28,超过32不再生长。无定形菌落,初形成时为灰白色或黄白色,成熟后变成灰褐色或黑色。匍匐菌丝弧形,无色,向四周蔓延。泡子囊刚出现时黄白色,成熟后变成黑色。其中的抱子靠气流传播,喜中温,高温偏酸的条件。5、交链狗霉交链泡霉属中温性和好湿性霉菌,易造成腐朽、腐败和过敏。在高湿度的工厂环境(如糕点、鱼肉、水产

7、加工与肉食加工环境)的天花板、墙与地板、配水管的黑色霉菌,几乎为该菌或枝泡霉。菌落呈绒毛状,多为灰黑色至黑色。6、镰刀菌镰刀菌是一类世界性分布的真菌,它不仅可以在土壤中越冬越夏,还可侵染多种植物(粮食作物、经济作物、药用植物及观赏植物),引起植物的根腐、茎腐、茎基腐、花腐和穗腐等多种病害,寄主植物达100余种。本可产生镰刀菌毒素,食用霉变的粮食可导致人患病和死亡,某些菌种可诱发人皮肤和角膜溃疡,恶性肿瘤的发生可能与有的菌种有关。菌核颜色一般有黄色、白色、紫色、红色、绿色等。菌核的形状多为球形,单生或丛生。霉菌的危害食品受到霉菌污染容易引起食品的变质,表现为食品表面长出菌丝体,气味异常,失去食品

8、原有的色香味,导致食品软化和腐烂,失去食用价值,甚至会产生霉菌毒素。目前已知的霉菌毒素有200多种,危害比较严重的有黄曲霉毒素、赫曲霉毒素、发色曲霉毒素等。这些毒素可引起人和动物的急、慢性中毒,并与某些癌症有关,对人体健康和生命安全造成严重威胁。但也不是所有的霉菌都是有害的。例如食品发酵工业制造腐乳、酱油、豆豉等食品就是应用了有益的霉菌,所以不必谈“霉”色变。霉菌污染的原因食品发生霉变,可能是加工用料受到霉菌污染,或是储存、运输控制不当引起的。当然,只有温度和湿度等环境条件适宜时,污染了霉菌的食物才有发生霉变的可能。大多数霉菌在湿度为85%90武温度在25C30C范围内会迅速繁殖生长。研究结果

9、表明,在粮食、豆类、果类及加工制品中,如常用的大米、小米、小麦、黄豆、油料作物的种子、水果、干果、乳制品、发酵食品和动物饲料中,均发现过霉菌毒素。同时食品霉菌毒素中毒往往表现明显的地方性和季节性,如在南方潮湿的地区和梅雨季节比较容易发生。如何检测霉菌?食品中霉菌检测标准是GB4789.15-2016食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数,它可以定量测定食品中霉菌数量,用相应的产品标准判定食品中霉菌是否超标。检测中的注意事项:1取样的代表性2、取样工具的无菌空气中霉菌的抱子含量很高,所以,取样的工具、容器等要经过严格的高压灭菌。3、检样的方法(1)由于霉菌易被携带,所以,检样时操作人员应

10、尽量避免自身携带的可能。(2)样品的均质及充分振摇。因为有些电子是连成串的,故均质和振摇能使其充分散开,同时,在各梯度连续稀释时,也要用灭菌吸管反复吹吸几次,使抱子充分散开。4、培养温度和时间培养温度25-28培养,5天后观察。霉菌检验中常用的培养基:孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。5、检样中常见的问题(1)不同稀释度计数结果不相同;(2)不生长或生长很好连成片无法计数;原因:稀释时未经反复振摇,吹吸,导致孑包子未充分散开,影响了计数的结果。由于培养基不适宜,PH值低等,致使生长较慢。观察时间的掌握。真菌生长较慢,故需5d后才能观察出结果。微生物操作中常见问题的讨论与

11、分析1、划线获得单个菌落的方法划不出单个菌落的原因:(1)平板上有过多的水分;(2)划线时接种环未经反复灼烧;(3)多区划线,三区或四区划线。2、涂布和倾注的区别:涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,可能影响计数的准确性;倾注更为准确,但不利于观察菌落的状态。Beuchat和Matsuda等人分别对这两种方法作了大量比较试验后发现,对霉菌计数来说,涂抹法有以下几方面优越于倾注法:培养出的霉菌菌落数较多;培养所需的时间较短;霉菌死子、菌落形态特征发育完全,便于鉴定。这是因为绝大多数霉菌是好氧的,在培养基表面生长快,发育好,而混在培养基中发育就受影响,而且在培养基倾注时霉菌抱子易受热损伤

12、。3、培养基的选择培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CA0),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、WaIlenIia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸储水1000mL;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白腺5g,

13、KH2PO41g,MgS047H200.5g,氯霉素0.1g,02%二氯硝基苯胺LOnlL,琼脂15g,蒸储水IoOOmL,PH6.5)上则正常生长。抱子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。特别是对干燥食品、高糖食品、淹渍食品等,更有必要同时采用M40Y或DGI8。由于霉菌中很多种类不会产生有毒的霉菌毒素,危害较小,而有的菌株即使污染数量不多,但其产生的霉菌毒素却危害较大,因此仅作霉菌计数并不能全面反映其危害程度,重要的是要知道污染菌的菌相,才能更好地判断被污染

14、食品的安全程度。为此,国外有些研究者设计出各类选择性培养基,可以识别产毒的霉菌。如AFPA培养基(配方:酵母提取汁20g,蛋白陈10g,柠檬酸铁钱O5g,O2%二氯硝基苯胺LomL,琼脂15g,蒸储水IooonlLPH5.6)用于分离黄曲霉毒素产生菌高污染率的食品。产黄曲霉毒素的菌株黄曲霉和寄生曲霉在AFPA上30C培养2、3天就形成背面有亮橙黄色的特征性菌落,非常容易识别。有人利用该培养基分离黄曲霉高污染食品花生、玉米等,取得了满意的结果。因此,针对不同样品,有目的地设计出相应的选择性培养基,以筛选污染菌中的危险菌群,将是一个值得探索的方向。4、培养基配制时应注意的问题:(1)灭菌温度要严格

15、控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量;(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分;(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏;(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。5、平板的保存:大多数平板如VRBA.DC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。6、产品的保存:(1)干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。(2)亚稀酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。(3)抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。(4)兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。7、观察时间的掌握:按S

16、N、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。8、添加剂的添加:(1)温度的掌握。卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。(2)定量。过多会抑制一些目标菌,太少又导致杂菌的过度生长。8、培养温度的掌握:(1)真菌类。25-28C培养(2)细菌类。李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30左右。(3)其他一般在36左右。9、接种方法:常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、

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