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1、浮游菌检测标准操作规程1取样前准备工作1.l依据检测区域的取样点数，按照培养基配制、灭菌标准操作程序制备适量的营养琼脂培养基。1.2在超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区。1.3将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于3035C培养48小时。取出逐个检查，确认无菌落数后即可使用。1. 4采样：将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样。2仪龄、设备和培养基2. 2.1所用的仪器、设备和培养基3. 1.2浮游菌采样器2. 1.3培养皿（90mmX15mm）3. 1.4培养基（营养琼脂培养基）4. 1.5恒温培养箱2. 2
2、仪器、设备、培养基的要求2. 2.1浮游菌采样器2. 2.1.1浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。1.2. 2.1.2应严格按仪器说明书的要求进行操作。1.3. 1.3采样器必须按仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性，检验项目有：定时器，转盘转速，流量计。1.4. 1.4每次测试前应先接通电源，启动真空抽气泵，然后调节流量计和定时器。2.2.L5空气采样量根据需要选定，已知采样器的流量（Lmin）,设定采样时间（IIIin）两者相乘即得采样量（L）。2. 2.1.6采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造，采样管严禁渗漏，内壁应光滑，采样管的长度应根据测定点的高度定，
3、尽量减少弯曲。3测试方法2.1 测试用仪器、培养皿表面必须严格消毒。3.1.1采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌。3. 1.2用消毒剂擦净培养皿的外表面。3. 1.3采样前，先用消毒剂消毒采样器的顶盘、转盘以及罩子的内外面，采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。3.1 4采样口及采样管使用前必须高温灭菌，如用消毒剂对采样管的外壁、内壁进行消毒，应将管中的残留液倒掉并晾干。3.L5采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒。3.2采样程序3.2 1仪器经消毒后先不放入培养皿，开动真空泵抽气，使仪器的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min,并调好流量、转
4、盘转速。3. 2.2关闭真空泵，放入培养皿，盖上盖子后调节采样品缝隙高度。4. 2.3置采样器于采样点后，开启采样器、转动定时器，根据采样量设定采样时间。4测试规则4.1测试状态1.1 .1浮游菌测试前微生物限度检查室已经消毒过。1.2 .2测试状态为静态测试，并在报告中注明测试状态。4. 2测试人员4. 2.1测试人员必须穿戴符和被测环境级别的工作服。4. 2.2静态测试时，室内人员不得多于2人。4. 3测试时间4. 3.1对单向流，测试应在净化空调系统正常运行不少于IOmin后开始。5. 3.2对非单向流，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。4.4最少采样点数目及其布置，最
5、小采样量，见下表：面积(m2)洁净度级别ABC验证监测验证监测验证监测10231212210V2042212220V4083212一N40VlOO164412一100-20040一10一3220040080一20一6400160一40一134.4.1工作区测点位置离地0.8m1.5m左右，送风口测点位置离开送风面30cm左右；可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。4.4.2每个采样点一般采样一次。4.4.3对于单向流或送风口，采样器采样管口朝向应正对气流方向；对于非单向流，采样管口向上。4.4.4布置采样点时，至少应离开尘粒较集中的回风口Im以上。4.4.5采样时，测试人员应站在采样口的下
6、风侧。5培养取样结束后将平皿复倒置隔水式恒温水浴培养箱内于3035培养48小时。并以未采样的营养琼脂平皿作对照皿。6菌落计数6.1用肉眼直接计数，然后用5T0倍放大镜检查，是否遗漏。6.2若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时，仍以2个或2个以上的菌落计数。计数：培养结束，将上述培养后的平皿取出，逐个点计菌落数，必要时用放大镜检查，并记录。7结果计算7.1平均菌落数的计算见下式：+mtl平均菌落数m=式中：m为该房间（或区域）的平均菌落数；ml、m2Inn为该房间（或区域）各取样点的菌落数；N为培养皿总数。8结论8.1洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。8.2若某洁净室（区）的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先行消毒，然后重新测试两次，测试结果必须合格。
