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1、 化脓性细菌是一类能够感染人化脓性细菌是一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。体并引起化脓性炎症的细菌。常引起皮肤、皮下软组织、深部组常引起皮肤、皮下软组织、深部组织的化脓性感染,甚至内脏器官的织的化脓性感染,甚至内脏器官的脓肿,也能引起脓毒血症。包括化脓肿,也能引起脓毒血症。包括化脓性球菌与化脓性杆菌。脓性球菌与化脓性杆菌。化脓性球菌 根据革兰染色性的不同可分:革兰氏阳性:葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等 革兰氏阴性:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。临床最常见的化脓性细菌主要是葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌、莫拉菌属。鼻咽腔鼻咽腔 葡萄球菌、甲,丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等 外
2、耳道外耳道葡萄球菌、类白喉杆菌绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌表皮葡萄球菌 口腔口腔甲,丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌螺旋体、放线菌、白念珠菌 肠道肠道大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细菌真菌、乳杆菌,双歧杆菌等 阴道阴道 大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌 非致病性分枝等 皮肤皮肤葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌丙酸杆菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌人体内正常菌群的分布 眼结膜眼结膜白色葡萄球菌、干燥杆菌 尿道尿道白色葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌1.根据色素和生化反应分为:三种葡萄球菌比较主要性状主要性状金葡菌金葡菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐
3、生葡萄球菌腐生葡萄球菌色素色素 金黄色金黄色白色白色白色;柠檬色白色;柠檬色血浆凝固酶血浆凝固酶+-甘露醇发酵甘露醇发酵+-溶血性溶血性+-耐热核酸酶活性耐热核酸酶活性+-SPA+-致病性致病性强强弱或无弱或无无无2.根据有无凝固酶分为:凝固酶阳性葡萄球菌)(包括凝固酶阳性葡萄球菌)(包括金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌、猪葡萄球菌中间型葡萄球菌、猪葡萄球菌)凝固酶阴性葡萄球菌(凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)(包括)(包括表皮葡萄表皮葡萄球菌球菌、腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌)金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌(金属镀膜)球形球形,1,1mm革兰染色阳性革兰染色阳性无芽胞,无鞭毛无芽胞,无鞭毛
4、致病性葡萄球菌有荚膜致病性葡萄球菌有荚膜可变为可变为L L型型 需氧或兼性厌氧,营养要求不高,通常在肉浸液及肉需氧或兼性厌氧,营养要求不高,通常在肉浸液及肉浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。最适浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。最适pH为为7.4,最适温度为最适温度为3537。1.在普通琼脂平板上在普通琼脂平板上经经352448h培养,可培养,可形成圆形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落,形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落,直径为直径为23mm.可产生不同的脂溶性色素,如金黄色、可产生不同的脂溶性色素,如金黄色、白色、柠檬色色素。白色、柠檬色色素。2.在
5、血琼脂平板上在血琼脂平板上,几乎所有的葡萄球菌可产生,几乎所有的葡萄球菌可产生、和和溶血素。溶血素。多数致病性葡萄球菌可产生多数致病性葡萄球菌可产生-溶血溶血。3.在液体培养基在液体培养基(普通肉浸液)中生长迅速呈均匀混(普通肉浸液)中生长迅速呈均匀混浊状。浊状。4.在高盐甘露醇血平板上在高盐甘露醇血平板上分解甘露醇呈淡橙黄色分解甘露醇呈淡橙黄色 5.卵黄高盐琼脂平板卵黄高盐琼脂平板:由于致病性葡萄球菌能产生卵:由于致病性葡萄球菌能产生卵磷脂酶,在此培养基上其菌落周围形成白色沉淀圈。磷脂酶,在此培养基上其菌落周围形成白色沉淀圈。本属菌触酶试验阳性,(可与链球菌区可与链球菌区别)别),对糖的发酵
6、反应不规则,多数能分多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖,产酸不产气解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖,产酸不产气。多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。(1)葡萄球菌A蛋白(SPA):细菌细胞壁上的一种表面蛋白,90%以上的金葡菌菌株有此抗原。SPA可与IgG的Fc段发生非特异性结合,由此具有抗吞噬及参与协同凝集反应的作用。含含A A蛋白蛋白的金葡菌的金葡菌IgGIgG类抗体类抗体结合结合IgGIgG的金的金葡菌葡菌抗抗 原原凝集凝集协同凝集试验协同凝集试验(2)多糖抗原:是半抗原,具有型特异性,有三种:A型多糖抗原;B型多糖抗原;C型多糖抗原。抵抗力抵抗力1、致病物质 血浆凝固酶血浆
7、凝固酶 葡萄球菌溶血素葡萄球菌溶血素 杀白细胞素杀白细胞素 肠毒素肠毒素 表皮剥脱性毒素表皮剥脱性毒素 毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素I 1血浆凝固酶(Coagulase)是能使含有枸椽酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质,致病菌株多能产生,常作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。凝固酶有两种:一种是分泌至菌体外的,称为游离凝固酶(Free coagulase)为蛋白质。作用类似凝血酶原物质,可被人或兔血浆中的协同因子(Cofactor)激活变成凝血酶样物质后,使液态的纤维蛋白原变成固态的纤维蛋白,从而使血浆凝固。另一种凝固酶结合于菌体表面并不释放,称为结合凝固酶(Bound
8、coagulase)或凝聚因子(Chumping factor),在该菌株的表面起纤维蛋白原的特异受体作用,细菌混悬于人或兔血浆中时,纤维蛋白原与菌体受体交联而使细菌凝聚。游离凝固酶采用试管法检测,结合凝固酶则以玻片法测试。凝固酶耐热,粗制品10030分钟或高压灭菌后仍保持部分活性,但易被蛋白分解酶破坏。凝固酶和葡萄球菌的毒力关系密切。凝固酶阳性菌株进入机体后,使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面,阻碍体内吞噬细胞的吞噬,即使被吞噬后,也不易被杀死。同时,凝固酶集聚在菌体四周,亦能保护病菌不受血清中杀菌物质的作用。葡萄球菌引起的感染易于局限化和形成血栓,与凝固酶的生成有关。凝固酶具有免疫原性
9、,刺激机体产生的抗体对凝固酶阳性的细菌感染有一定的保护作用。慢性感染患者血清可有凝固酶抗体的存在。2葡萄球菌溶血素(Staphyolysin)多数致病性葡萄球菌产生溶血等。按抗原性不同,至少有、五种,对人类在致病作用的主要是溶血素。它是一种“攻击因子”,化学成分为蛋白质,分子量约为30,000,不耐热,6530分钟即可破坏。如将-溶血素注入动物皮内,能引起皮肤坏死,如静脉注射,则导致动物迅速死亡。溶血素还能使小血管收缩,导致局部缺血和坏死,并能引起平滑肌痉挛。溶血素是一种外毒素,具有良好的抗原性。经甲醛处理可制成类毒素。3杀白细胞素(Leukocidin)含F和S两种蛋白质,能杀死人和兔的多形
10、核粒细胞和巨噬细胞。此毒素有抗原性,不耐热,产生的抗体能阻止葡萄球菌感染的复发。4肠毒素(Enterotoxin)从临床分离的金黄色葡萄球菌,约1/3产生肠毒素,按抗原性和等电点等不同,葡萄球菌肠毒素分A、B、C1、C2、C3、D、E和F八个血清型,细菌能产生一型或两型以上的肠毒素,肠毒素是单一的多肽链,含有较多的赖氨酸、酷氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸。肠毒素可引起急性胃肠炎即食物中毒。与产毒菌株污染了牛奶、肉类、鱼是虾、蛋类等食品有关,在20以上经810小时即可产生大量的肠毒素。肠毒素是一种可溶性蛋白质,耐热,经100煮沸30分钟不被破坏,也不受胰蛋白酶的影响,故误食污染肠毒素的食物后,在肠道作
11、用于内脂神经受体,传入中枢,刺激呕吐中枢,引起呕吐,并产生急性胃肠炎症状。发病急,病程短,恢复快。一般潜伏期为16小时,出现头晕、呕吐、腹泻,发病12日可自行恢复,预后良好。5表皮溶解毒素(Epidermolytic toxin)也称表皮剥脱毒素(Exfoliatin)引起人类或新生小鼠的表皮剥脱性病变。主要发生于新生儿和婴幼儿,引导起烫伤样皮肤综合征。主要由噬菌体型金葡萄产生的一种蛋白质,分子量24,000,具有抗原性,可被甲醛脱毒成类毒素。6毒性体克综合重量毒素(Toxic shock syndrome toxin1,TTST1)系噬菌体群金黄色葡萄球菌产生。可引起发热,增加对内毒素的敏感
12、性。增强毛细血管通透性,引起必血管紊乱而导致休克。7其他 葡萄球菌尚可产生葡激酶(Staphylokinase),亦称葡萄球菌溶纤维蛋白酶(Staphylococcal fibrinolysin),产生耐热核酸酶(Heat-stable nuclease),透明质酸酶(Hyaluronidase),脂酶(Lipase)等。2、所致疾病 化脓性炎症化脓性炎症 局部皮肤:局部皮肤:疖、痈疖、痈、毛囊炎、伤口化脓等、毛囊炎、伤口化脓等 脏器:脏器:心内膜炎、脑膜炎心内膜炎、脑膜炎 全身:全身:败血症败血症、脓毒血症、脓毒血症 毒素性疾病毒素性疾病 食物中毒食物中毒 烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征
13、毒性休克综合征毒性休克综合征 葡萄球菌性肠炎葡萄球菌性肠炎 1侵袭性疾病主要引起化脓性炎症。葡萄球菌可通过多种途径侵入机体,导致皮肤或器官的多种感染,甚至败血症。(1)皮肤软组织感染主要有疖、痛、毛囊炎、脓痤疮、甲沟炎、麦粒肿、蜂窝组织炎、伤口化脓等。(2)内脏器官感染如肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等,主要由金葡菌引起。(3)全身感染如败血症、脓毒血症等,多由金葡菌引起,新生儿或机体防御可能严重受损时表皮葡萄球菌也可引起严重败血症。2毒性疾病由金葡菌产生的有关外毒素引起(1)食物中毒 进食含肠毒素食物后16小时即可出现症状,如恶心、呕吐、腹痛、腹泻,大多数病人于数小时至1日内恢
14、复。(2)烫伤样皮肤综合征多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人,开始有红斑,12天有皮起皱,继而形成水疱,至表皮脱落。由表皮溶解毒素引起。(3)毒性休克综合征 由TSST1引起,主要表现为高热、低血压、红斑皮疹伴脱屑和休克等,半数以上病人有呕、腹泻、肌痛、结膜及粘膜充血,肝肾功能损害等,偶尔有心脏受累的表现。(4)假膜炎肠炎本质是一种菌群失调性肠炎,病理特点是肠粘膜被一层炎性假膜所覆盖,该假膜由炎性渗出物、肠粘膜坏死块和细菌组成。人群中约1015%有少量金葡菌寄居于肠道,当优势菌如脆弱类杆菌、大肠肝菌等因抗菌药物的应用而被抑制或杀灭后,耐药的金葡菌就乘机繁殖而产生毒素,引起以腹泻为主的临床症
15、状。毛囊炎 毒素性疾病食物中毒烫伤样皮肤综合征(SSSS)毒性休克综合征(TSS)葡萄球菌性肠炎 (伪膜性肠炎)烫伤样皮肤综合征三、免疫性 成人对金葡菌感染有强抵抗力。成人对金葡菌感染有强抵抗力。早期化脓性病灶局限化早期化脓性病灶局限化白细胞浸润和血浆凝固酶的作用白细胞浸润和血浆凝固酶的作用 人类对致病性葡萄球菌有一定的天然免疫力。只人类对致病性葡萄球菌有一定的天然免疫力。只有当皮肤粘膜受创伤后,或机体免疫力降低时,有当皮肤粘膜受创伤后,或机体免疫力降低时,才易引起感染。患病后所获免疫力(才易引起感染。患病后所获免疫力(特异免疫特异免疫性性)不强,难以防止再次感染。)不强,难以防止再次感染。脓
16、汁、咽拭、渗出物、脑脊液 血液 粪便、呕吐物、剩余食物 增菌培养 分离培养 分离培养直接涂片 (血平板)(高盐甘露醇平板)革兰染色 取可疑菌落(形状、色素、溶血)初步报告 鉴定试验及药敏 涂片染色 血浆凝固酶试验 耐热核酸酶试验 药敏试验 其他鉴定试验 报 告微生物检查法微生物检查法1、采集标本:、采集标本:脓汁,脑脊液,血液,剩余食物,呕吐物等3、分离培养、分离培养 将标本接种于血琼脂平板,甘露醇和高盐培养基中进行分离培养,将标本接种于血琼脂平板,甘露醇和高盐培养基中进行分离培养,孵育后挑选可凝菌落进行涂片、染色、镜检。致病性葡萄球菌的主要孵育后挑选可凝菌落进行涂片、染色、镜检。致病性葡萄球菌的主要特点:凝固酶产生阳性,金黄色素,有溶血性,发酵甘露醇。特点:凝固酶产生阳性,金黄色素,有溶血性,发酵甘露醇。食物中毒病人的呕吐物,粪便或剩余食物在作细菌分离鉴定的同食物中毒病人的呕吐物,粪便或剩余食物在作细菌分离鉴定的同时,接种于肉汤培养基中,孵育后取滤液注射于时,接种于肉汤培养基中,孵育后取滤液注射于68周龄的幼猫腹腔,周龄的幼猫腹腔,注射后注射后4小时内发生呕吐、腹泻、体温升高或死亡提