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1、（一（一)化学元素化学元素一、细菌细胞的化学组成一、细菌细胞的化学组成 碳、氢、氮、氧、磷、硫等碳、氢、氮、氧、磷、硫等有机物元素：有机物元素：无机离子：无机离子：钾、钠、铁、镁、钙等钾、钠、铁、镁、钙等（二）（二）化学成分化学成分 占细胞总重量占细胞总重量70%-90%主要的固形成分，占主要的固形成分，占40%-80%水水:蛋白质：蛋白质：核酸：核酸：糖类，脂类和维生素糖类，脂类和维生素DNA：3%，RNA：10%二、细菌需要的营养物质及生理功能二、细菌需要的营养物质及生理功能 碳源碳源 氮源氮源 无机盐无机盐 生长因子生长因子 水水三、吸收营养物质的方式三、吸收营养物质的方式 略。略。四、
2、细菌的营养类型四、细菌的营养类型略。略。五五 细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖3、PH：一般最适为一般最适为7.0-7.62、温度：一般最适温度为、温度：一般最适温度为371、营养物质、营养物质4、对气体要求、对气体要求 5、渗透压：嗜盐菌需在高浓度的、渗透压：嗜盐菌需在高浓度的NaCl（3%）生长）生长（一）（一）生长繁殖的条件生长繁殖的条件对对O2要求：专性需氧菌要求：专性需氧菌 微需氧菌微需氧菌 耐氧菌耐氧菌 兼性厌氧菌兼性厌氧菌 专性厌氧菌专性厌氧菌对对CO2要求：要求：5%CO2水水碳源碳源氮源氮源无机盐无机盐生长因子生长因子 细菌的繁殖方式细菌的繁殖方式 二分裂法二分裂法生长方式：生长
3、方式：链球菌链球菌八叠球菌八叠球菌葡萄球菌葡萄球菌 代时：单个细胞完成一次分裂所需要的时间代时：单个细胞完成一次分裂所需要的时间 大多数细菌的代时约大多数细菌的代时约2030min2030min速度速度六、细菌的人工培养六、细菌的人工培养（一）细菌培养的条件（一）细菌培养的条件 充足的营养物质充足的营养物质 合适的酸碱度合适的酸碱度 合适气体合适气体 合适温度合适温度（二）培养基（二）培养基 人工配制的满足细菌及其他微生物生长人工配制的满足细菌及其他微生物生长繁殖和（或）积累代谢产物的营养基质繁殖和（或）积累代谢产物的营养基质根据物理性状类分类根据物理性状类分类 液体培养基：用于增菌。液体培养
4、基：用于增菌。半固体培养基：检测细菌的动力和短期保存菌种。半固体培养基：检测细菌的动力和短期保存菌种。固体培养基：用于分离、纯化和保存菌种，做病固体培养基：用于分离、纯化和保存菌种，做病原学诊断和产生菌苗用于预防。原学诊断和产生菌苗用于预防。主要用于鉴定。1 基础培养基基础培养基5553 选择培养基选择培养基 4 鉴别培养基鉴别培养基2 营养培养基营养培养基5 厌氧培养基厌氧培养基根据营养和用途分类根据营养和用途分类（三）细菌的培养方法及生长现象（三）细菌的培养方法及生长现象 1.1.固体培养法固体培养法菌落：单个细胞在固体培养基表面经过培养形成肉眼可见的微生物集团。菌落照片菌落照片菌落菌落的
5、特征：的特征：（包括大小、形状、颜色、边缘、质地、透明包括大小、形状、颜色、边缘、质地、透明度、光泽、表面、湿润度等）度、光泽、表面、湿润度等）菌苔：菌苔：微生物密集生长所形成的。其作用是可用来保存菌种。菌落菌落R型型菌落（菌落（S型）型）菌苔菌苔表面光滑、湿润、边缘整表面光滑、湿润、边缘整齐（新分离细菌）齐（新分离细菌）表面粗糙、干燥、表面表面粗糙、干燥、表面皱纹或颗粒状、边缘不皱纹或颗粒状、边缘不齐（陈旧菌落）齐（陈旧菌落）S光滑型菌落光滑型菌落R粗糙型菌落粗糙型菌落粘稠、有光泽、似水粘稠、有光泽、似水 珠样，多见有厚荚膜珠样，多见有厚荚膜或丰富粘液层的细菌或丰富粘液层的细菌M粘液型菌落粘
6、液型菌落菌落类型菌落类型 液体培养基中液体培养基中 2.2.液体培养法液体培养法半固体中半固体中 混浊生长混浊生长沿穿刺线生长沿穿刺线生长有鞭毛有鞭毛细菌细菌无鞭毛无鞭毛细菌细菌3.半固体培养法半固体培养法4 4、培养方法、培养方法 取检菌标本或细菌接种于适宜培养基取检菌标本或细菌接种于适宜培养基37培养培养箱箱18-24h大量细菌生长繁殖大量细菌生长繁殖分离培养分离培养纯培养纯培养 分离培养：将培养物划线接种在固体培养基表面，分离培养：将培养物划线接种在固体培养基表面，使原混杂的细菌在固体培养基表面散开，形成分使原混杂的细菌在固体培养基表面散开，形成分离的单个菌落。离的单个菌落。纯培养：从固
7、体培养基中挑出一菌落，移种到另纯培养：从固体培养基中挑出一菌落，移种到另一培养基中，此时生长出来的细菌称纯种，这种一培养基中，此时生长出来的细菌称纯种，这种培养方法为纯培养。培养方法为纯培养。如果某一培养物是由单一微生物细胞繁殖产生的，如果某一培养物是由单一微生物细胞繁殖产生的，就称之为该微生物的纯培养物（就称之为该微生物的纯培养物（pure culture)。接种工具接种工具（四）细菌的生长繁殖规律和生长曲线（四）细菌的生长繁殖规律和生长曲线 生长曲线：细菌在有限的体系中的生长成为群体生长，具有一定生长曲线：细菌在有限的体系中的生长成为群体生长，具有一定的规律性，描述细菌群体在整个培养期间的
8、菌数变化规律的曲线的规律性，描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律的曲线称之为生长曲线。称之为生长曲线。将少量单细胞的纯培养，接种到一恒定容积的液体培养基中，在将少量单细胞的纯培养，接种到一恒定容积的液体培养基中，在适宜条件下培养，定时取样，测菌量。以培养时间为横座标，培适宜条件下培养，定时取样，测菌量。以培养时间为横座标，培养物中活菌数的对数为纵座标，可绘制为生长曲线，根据其将细养物中活菌数的对数为纵座标，可绘制为生长曲线，根据其将细菌的群体生长繁殖分为迟缓期、对数期、稳定期和衰退期菌的群体生长繁殖分为迟缓期、对数期、稳定期和衰退期（1 1）迟缓期（）迟缓期（lag phaselag ph
9、ase）A A 现象：现象：1-4h1-4h，活菌数没增加，活菌数没增加，曲线平行于横轴。曲线平行于横轴。B.B.原因：由于细胞进入新环境原因：由于细胞进入新环境,细胞数目无增长，甚至有所下细胞数目无增长，甚至有所下降有一个适应过程，进行大量降有一个适应过程，进行大量的酶（诱导酶）的生成。的酶（诱导酶）的生成。C.C.细胞特点细胞特点:细胞的新陈代谢非细胞的新陈代谢非常旺盛，个体体积显著增大，常旺盛，个体体积显著增大，但不分裂繁殖，为细胞分裂作但不分裂繁殖，为细胞分裂作准备。准备。D.D.此期长短：此期长短：与菌种遗传特性、菌龄、接种量、培养与菌种遗传特性、菌龄、接种量、培养条件有关。条件有关
10、。E.E.意义：意义：在实际工作中，缩短在实际工作中，缩短lag phase lag phase 的措施：的措施：1 1）加大接种量（群体优势）加大接种量（群体优势-适应性增强）适应性增强）2 2）先用对数期的种子（此时细胞分裂旺盛）先用对数期的种子（此时细胞分裂旺盛）3 3）调整培养基的成分，使种子基含有发酵培养基）调整培养基的成分，使种子基含有发酵培养基的成分的成分 4 4）选用繁殖快的菌种）选用繁殖快的菌种（2 2）对数期）对数期(log phase)(log phase)1.1.现象：现象：8-18h8-18h，又称指数期，又称指数期，生长迅速，生长迅速，细胞数目以几何细胞数目以几何级
11、数增加，其对数与时间呈级数增加，其对数与时间呈直线关系。直线关系。2.2.细胞特点：此时细胞的大小、细胞特点：此时细胞的大小、形态、染色性、形态、染色性、生理特征等生理特征等均趋于一致，代谢活跃，均趋于一致，代谢活跃，对对外界环境因素的作用敏感。外界环境因素的作用敏感。生长速率高，代时稳定。生长速率高，代时稳定。研研究细菌的性状时应选用该期究细菌的性状时应选用该期的细菌。的细菌。(3)(3)稳定期（稳定期（stationary phase):stationary phase):B.B.细胞特点细胞特点:有害物增加，死亡数增加，细有害物增加，死亡数增加，细菌的芽胞、外毒素和抗生素等菌的芽胞、外毒
12、素和抗生素等代谢产物在此期产生，细胞内代谢产物在此期产生，细胞内开始贮藏物质。稳定期细胞数开始贮藏物质。稳定期细胞数目及产物积累达到最高。目及产物积累达到最高。A.A.现象：现象：活菌数目不增不减，生长速率活菌数目不增不减，生长速率趋于趋于0,0,曲线有一下降的趋势。曲线有一下降的趋势。（4 4）衰退期（）衰退期（death phase death phase）A A 现象：现象：细胞死亡速率细胞死亡速率 生长速率。一般生长速率。一般总菌数不变总菌数不变,活菌数曲线下降。活菌数曲线下降。B B 特点：特点：死菌数多于活菌数，菌体变形，死菌数多于活菌数，菌体变形，大小不一，细胞出现自溶大小不一，细胞出现自溶,生理代生理代谢活动停滞。谢活动停滞。对数期对数期迟缓期迟缓期0515202530105.56.08.58.07.57.06.59.0衰退期衰退期总菌数总菌数活菌数活菌数细菌数的对数细菌数的对数小时小时稳定期稳定期
