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1、教学设计【教学目标】1 .能描述大肠杆菌的特征，说出细菌培养和分离的方法及灭菌的过程;2 .说明大肠杆菌分离和培养的条件和操作要求的原理。3 .通过大肠杆菌分离培养，学会划线分离的原理和方法；4 .在分析实验结果的过程中，形成科学严谨的实验思维。【重难点】1.大肠杆菌的划线分离，大肠杆菌的无菌操作和灭菌技术；5 .无菌操作技术及实验室安全事项的解读。【教学过程】【考情展示】历年高考选修一内容展示第一部分：微生物的利用【课前诊断】1 .下列关于划线分离法和涂布分离法叙述正确的是（）A.两种方法均可以获得单菌落且以培养皿中有20个以内的单菌落最为合适B.两种方法中都用到玻璃刮刀C.筛选某种微生物最
2、简便的方法是划线分离法D.划线分离法可用于消除污染杂菌，涂布分离法不可以2 .某些土壤细菌可将尿素分解成CO?和NH3,供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，正确的是（）A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO?作为碳源的B.倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C.培养基中KHJOi等的作用之一是作为缓冲剂保持PH稳定D.若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板3 .为从土壤中分离以尿素为氮源的微生物，所配置的固体培养基中不能含有的成分是（）A.尿素B.氯化钠C.葡萄糖D.琼脂4 .自然界里
3、有多种微生物，将其进行合理的筛选、培养和应用，能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题。(1)对培养基进行灭菌时，多采取法，若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，在固体培养基表面连续进行了5次划线，则需要对接种环灼烧一次。平板划线在做第二次及其后的划线操作时，要从上次划线的开始划线,最后一次划的线不能与第一次划的线O(2)将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中培养，以减少培养基中的水分挥发。其中，培养未接种的固体培养基是为了O(3)甲、乙两组同学用稀释涂布平板法测定某种微生物的数量，在同一稀释倍数下每隔一段时间记录数据(统计时间内微生物总数小于环境容纳量)，得
4、到以下结果：培养时间(小时)24487296甲组菌落均值(个)18253632乙组菌落均值(个)20283832计数时最好取培养小时记录的菌落数作为实验结果，一方面是由于培养时间较短，会遗漏菌落数目，另一方面是由于培养时间过长，O【课堂检测】1、回答与微生物培养及应用有关的问题：(1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从时开始计时。对于不耐热的液体培养基,一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中，采用方式可较快地进行过滤灭菌。(2)与酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白陈、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是。(3)为筛选胞外-淀粉酶分泌
5、型菌种，一般从(A.果园树下B.肉类加工厂周围C.米酒厂周闱D.枯树周围)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养，一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种，需挑选若干个比值大的菌落，分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取用于检测酶活性。(1) 2、请回答从土壤中分高产服酶细菌和服酶固定化实验的有关问题：(2) 1.B固体培养养基：取适量蛋白陈、酵母提取物、NaCL加入一定量的蒸储水溶解，再加一灭菌备用。(2)尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液用灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤，因为G6玻璃砂漏斗,故用于过滤除菌。
6、然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。(3)取适量含产服能细菌的IOT/10T两种土稀释液，分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上,培养48h,推测固体培养基上菌落数最少的是(A.IO/稀释液+尿素固体培养基B.10稀释液+LB固体培养基C.10稀释液+尿素固体培养基D.KT*稀释液+LB固体培养基)在尿素固体培养基上产生服酶细菌菌落周围出现,其原因是细菌产生的胭酶催化尿素分解产生所致。(4)制备固定化胭酶时，用石英砂吸附服酶，装柱。再用蒸储水洗涤固定化酶柱，其作用是【课后巩固】1 .厨余废水中脂肪含量高，为了筛选出能快速分解脂肪的微生物。研究人员进行了“厨余废水取样
7、一选择培养T梯度稀释-鉴别培养系列操作。请回答：（I）选择培养的目的是增加分解脂肪微生物的数量，保证能分离到所需的微生物，需制备以为唯一碳源的液体培养基，使用液体培养基的优点是O（2）采用稀释倍数适宜的培养液进行方法接种，目的是在固体培养基上形成菌落。培养时需将培养皿倒过来放置，防止，以免造成污染。（3）在鉴别培养过程中，向培养基内加入中性红溶液，中性红溶液是一种脂肪水解指示剂，在弱酸性下呈红色,弱碱性下呈黄色。选取的菌落，即为目标菌，判断的理由是O2 .苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得
8、只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是（）A.图示中不同浓度碳源的培养基不会影响细菌的数量B.图示培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源C.若图中为对照实验，则其中不应加入苯酚作为碳源D.使用平板划线法可以在上获得单菌落3 .国家标准规定每亳升鲜奶产品中大肠杆菌数不得超过1x102个，鲜奶中大肠杆菌的数目可用滤膜法来测定，流程为：用滤膜过滤Iml待测牛奶T牛奶中的细菌留在滤膜上T将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB培养基）上培养T统计菌落数目。（1）制备培养基：培养基中能够同时提供氮源和碳源的是（填“蛋白陈”“乳糖”或“NaCl”）,从培养基功能上划分，EMB培养基属于（2）为检测该培养基灭菌是否彻底，对于该培养基应采用的检测方法是，（3）培养与统计：在适宜的条件下培养一段时间后，应选择颜色为黑色（伊红美蓝和大肠杆菌反应产生黑色）的菌落数进行统计，结果如下:培养时间12h24h平板对照组123对照组123大肠杆菌菌落数/个01321211450132121145其他细的菌落数/个112253222244112253222244（4）培养12h和24h的大肠杆菌菌落特征有何差异？o根据表中的数据不能判断该鲜奶样品中的大肠杆菌数是否超标，请说明理由：【课后反思】
