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1、ICS67.050CCSB04B54西臧自治区地方标准DB54/TXXXX-XXXX青棵及其制品中花青素含量的测定分光光度法点击此处添加标准名称的英文译名（征求意见稿）在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施西藏自治区市场监督管理局发布本文件按照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由西藏自治区农牧业标准化技术委员会提出并归口。本文件起草单位：西藏自治区农牧科学院农业质量标准与检测研究所、西藏自治区
2、农畜产品工程技术研究中心。本文件主要起草人：青棵及其制品中花青素含量的测定分光光度法1范围本文件规定了青棵及其制品中花青素含量分光光度测定方法的试样制备、分析步骤、结果计算和精密度。本文件适用于青棵及其制品中花青素含量的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法原理样品中花青素类化合物经盐酸-乙醇混合溶液提取后，在酸性条件下呈红色，于波长530nm下有最大吸收。在一定浓度范围内，其吸
3、光度与提取液中花青素类化合物的含量成正比，与标准曲线比较，可定量测定花青素类化合物的含量。4试剂与材料除另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。d1试剂4.1.1盐酸（CAS号：7647-01-0,质量浓度36%38%）。4.1.2无水乙醇（CAS号：64-17-5）。4.1.3盐酸-乙醇溶液：取8.5mL盐酸，750mL无水乙醇，并用水定容至IooomL,现配现用。A0标准品氯化花葵素，CAS号：29956-99-8）：纯度296%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。41标准溶液配置4.3.1标准储备溶液：准确称取氯化天竺葵素标准品20mg,用盐酸.乙醇溶液定
4、容至25mL,配置成800mgL的标准储备液，于J8C避光保存，备用。4.3.2标准工作溶液：吸取-定量的标准储备溶液，用盐酸-乙醇溶液稀释成浓度为0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mgLLOmg/L、2.0mg/L、4.0mgL.10.0mgL30.0mg/L的标准工作溶液。5仪器和设备EI分析天平：感量0.001goKj）涡旋振荡器。R1紫外/可见分光光度计。KA超声波萃取仪。弓A低温冰箱：温度为-18以下。耳A离心机：转速为6000r/min50r/min。6试样制备取干燥的待测样品适量，用组织捣碎机将其粉碎成粉末状并充分混匀，用密封袋密封后放置于干燥皿中备用。7分析步骤71提取称取
5、试样5.0g（0.01g）,于50mL塑料离心管中，加入22mL盐酸-乙醉溶液，涡旋混匀后超声30min,60001701m离心51而1）后过游，将上清液转移到50mL容量瓶中，残渣中再次加入22mL盐酸.乙醇溶液，重复超声、离心、过滤步骤，将上清液合并转移到至前一容量瓶中，并用盐酸乙醇溶液定容至50mLo取适量样品提取液，用盐酸乙醉溶液稀释5倍后，待测。79标准曲线测定取系列标准溶液于比色皿中，以盐酸乙醇混合溶液为空白，在530nm波长下测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。71样品溶液测定将样品待测液置于比色皿中，以盐酸乙静溶液为空白，在530nm波长下测定吸光度。8结果计算试样中花青素的含量以W分别按公式（1）计算。W=c-X5（1）m式中：W试样中花青素的含量，单位为亳克每千克（mgkg）；C从标准工作曲线得到的试样溶液中花青素的质量浓度，单位为亳克每升（mgL）；V样液提取时定容体积，单位为亳升（mL）；tn试样的质量，单位为克（g）；5稀释倍数。计算结果以重狂性条件下获得的2次平行测定结果的算术平均值表示，结果保留小数点后两位。9精密度91在重现性条件下，获得2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的5%。O5在再现性条件下，获得2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。
