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1、保健食品中总黄酮、总皂玳、粗多糖的测定附录A（规范性的附录）保健食品中总黄酮的测定A1试剂A.1.1聚酰胺粉A.1.2芦丁标准溶液：称取5.Og芦丁，加甲醇溶解并定容至100In1.,即得50ugm1.A.1.3乙醉分析纯。A.1.4甲醇分析纯。A.2分析步骤A.2.1试样处理：称取肯定量的试样，加乙醉定容至25m1.,摇匀后，超声提取20min,放置，吸取上清液1.Om1.,于蒸发皿中，加Ig聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用20m1.苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25m1.。此液于波长360nm测定汲取值。同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回来方程，计算试样
2、中的总黄酮含量。A.2.2芦丁标准曲线：吸取芦丁标准溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.Om1.于IOn1.1.比色管中,加甲醛至刻度，摇匀，于波长360nm比色。求回来方程，计算试样中总黄酮含量。A. 3计算和结果表示：AXViX100X-V1.M1000式中：X：试样中总黄酮的含量，rng100g;:由标准曲线算得被测液中总黄酮量，gM：试样质量，g片：测定用试样体积，m1.V2:试样定容总体枳，m1.计算结果保留：位有效数字。此方法选H保健食品检验与评价技术规范（2003年版）附录B（规范性的附录）保健食品中总皂忒的测定B.1试剂B.1.1Amberiite-XAD-2大孔树脂
3、,Sigma化学公司、B-1.2正丁醇分析纯。8. 1.3乙醇分析纯。B. 1.4中性氧化铝层析用，100-200目。5高氯酸分析纯。C. 1.6冰乙酸分析纯。8.1.7 香草醛溶液称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100mJ8.1.8 人参皂KRe购自中国药品生物制品检定所。8.1.9 人参皂戒Re标准溶液：精确称取人参皂或Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10Om1.,即每亳升人参皂忒Re2.OmgoB.2仪器8. 2.1比色剂9. 2.2层析柱B.3试验步骤8.3.1 试样处理8.3.1.1 固体试样：称取1.OOOg左右的试样（依据试样含人参量定），置于100In1.容量瓶中
4、，加少量水，超声30min,再用水定容至100m1.,摇匀，放置,吸取上清液1.0In1.进行柱层析。8.3.1.2 液体试样：含乙醇的补酒类保健食品，吸取1.Om1.试样（假如浓度高、或颜色深，需稀释肯定体积后再取1.Om1.）进行柱层析。8.3.2 柱层析：用IOm1.注射器做层析管，内装3cmAmber1.iie-XAD-2大孔树脂,上加ICm中性氧化铝。先用25m1.70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25m1.水洗柱,弃去洗脱液，精确加入1.Om1.已处理好的试样溶液（见B.3.1）,用25m1.水洗柱,弃去洗脱液，用25m1.70%乙醇洗脱人参皂忒，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60水浴挥
5、干。以此作显色用。8.3.3 显色：在上述已挥干的蒸发皿中精确加入02m1.5%香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加08m1.高氯酸，匀称后移入5m1.带塞刻度离心管中,60C水浴加热水Idn,取出,冰浴冷却后,精确加入冰乙酸5.Om1.,摇匀后，以ICn1.比色池与560nm波特长与标准管一起进行比色测定。8.3.4 标准管：吸取人参皂忒Re标准溶液（2.0mgm1.）1001.放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60C）,或热风吹干（勿使过热），以下操作从“B.3.2柱层析”起，与试样相同。测定吸光度值。计算：A,V1001X-XCXXXA:tn10001000式中：X：试样中总皂忒
6、量（以人参皂贰Re计），g100g:1:被测液的吸光度值：Az:标准液的吸光度值；C：标准管人参皂式Re的量，UgV：试样稀释体积，mbm：试样质量，g计第结果保留二位有效数字。此方法选自保健食品检验与评价技术规范（2003年版）附录C粗多糖的测定C.1试剂C.1.1浓硫酸C.1.2无水乙醉C.1.35%本分溶液C.2分析步骤c.2.1试样处理:取本品50.Om1.,加热浓缩至约10.Om1.,放冷，加入40m1.无水乙醉，3000转/分别心5min,弃去上清液，残渣用80%乙醇洗涤，离心(重第此过程2次)，用水溶解残渣，定容20m1.。此液即为样品处理液。C.2.2标准曲线：取葡聚糖标准溶液:0、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50m1.,用水定容为1.0m1.,加入0.5m1.苯酚溶液，1Om1.浓硫酸，混匀，放置至室温，于1.=ICn1,波长=485nm测定吸光度，绘制标准曲线。C.2.3样品测定取样品处理液05m1.于具塞比色管中，以下同标准曲线操作。测定吸光度。c.3计算和结果表示：X(mgn1.)=(C20020100.5)/20X1000式中：X：试样中粗多糖含量，nig/m1.：C：从标准曲线上查出的含量(g)
