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1、观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂安庆一中彭萍芳一、使用教材人教版高中生物学必修1分子与细胞第六章第一节二、实验器材洋葱、香葱、大蒜、蚕豆等数码端晶显前镜、蓑玻片、盖玻片、6孔点滴板、剪刀、镜子、滴管质量分数为0.01gmL或0.02gmL的甲紫溶液、质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、无水乙醇、冰醋酸三、实验创新要求/改进要点【传统实验】：1、洋葱根尖的培养在上实验课之前的34d,取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约5cm时，取生长健壮的根尖制成临时装片。9牯匕的南I斗看作流程为:解离一漂洗一染色一制片过程方法
2、时间目的解离上午10时至下午2时（洋葱根尖分生区有较多的细胞处于分裂期，这会因洋葱品种、室温等的差异而有所不同），剪取洋葱根尖23mm,立即放入盛有盐酸和酒精混合液（1:1）的玻璃皿中，在室温下解离。35min用药液使组织中的细胞相互分离开来漂洗待根尖软化后，用镜子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗。约IOmin洗去药液，防止解离过度。染色把根尖放入盛有质量浓度为O.Olg/mL或0.02gmL的甲紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。35min甲紫溶液或醋酸洋红液能使染色体着色。制片用镶子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镣子尖弄碎，盖上盖玻片。然后，用拇指轻轻地按压盖玻使细胞分
3、散开来，有利于观察。片。3、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察4、绘图5、总结分析K课本提供图片：K学生实验实际图片:（高一年级实验实拍图片）K发现问题:第一，由于温度等原因，很多学生根尖培养不成功，生根数量少或较短，造成分生区取材出现问题。第二，由于细胞壁胞间层（果胶）使相邻细胞相连，解离浓度或时间问题导致解离不彻底，难以得到单层细胞，使观察困难。第三，传统双目显微镜，师生交流困难，难以计算分裂指数，使整个实验完整化系统化。【优化实验探究】：第一，实验材料一传统实验仅水培洋葱，由于温度等存在培养不成功情况,探究同期同种环境对比培养洋葱、大蒜、香葱、蚕豆等材料，形成时间一根长、时间-生根数以及后期分裂
4、比等数据，得出最佳实验材料。第二，解离-传统实验出现大量细胞重叠情况，探究解离时间、浓度对比、温水浴解离或解离之前使用卡诺氏液固定，找到细胞重叠原因，得出最佳实验方案。第三，漂洗-传统实验漂洗时间过长，约占一节课的1/4时间，探究搅动式漂洗或6孔点地板换水式漂洗能否缩短漂洗时间改善漂洗效果。第四，染色传统实验使用甲紫染色后制片观察，但整个视野颜色较深，难以清晰的观察到染色体，探究染色之后滴加冰醋酸、清水再次漂洗之后效果是否更好。第五，制片一传统实验制片过程压片极易压坏盖玻片，探究盖上盖玻片+吸水纸再用拇指轻轻按压效果是否更好。【创新探究】：香烟、重金属等培养液水培洋葱等材料，是否会影响其生根、
5、对细胞生命的“开始”-细胞分裂是否有影响？四、实验原理在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。通过高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体的存在状态，就可以判断这些细胞分别处于有丝分裂的哪个时期。染色体容易被碱性染料（如甲紫溶液，旧称龙胆紫溶液）着色。卡诺氏液（无水乙醇：冰醋酸=3:1均匀混合），有极快的渗透力，根尖材料固定15-2Onlin即可，此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止；如果材料不马上用，需转入70%酒精中保存。固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持
6、染色体结构的完整性，还能增强染色体的嗜碱性，达到优良的染色效果。五、实验教学目标1 .制作植物根尖细胞有丝分裂装片。2 .观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期中不同时期的时间长短。3 .绘制植物细胞有丝分裂简图。4 .形成不同材料时间-根长、时间-生根数以及细胞分裂期/分裂间期数据对比图。六、实验教学过程【实验导入】：为什么要做这个实验?实验目的是什么？【学生实验】：第一，植物根尖的培养总结分析R学生培养：观察植物根尖分生组织细胞的有丝分裂水培观察记录表（学生培养）人口分IR实qaKtt员”量ITlCft（平均H）第二大第三兄第四人*&X第一天第二人黑三人第KAM物
7、HH*fflN*ttN*m文玉rp实q分烟VK（IF均）生IR数m*ffl付木:m*mK实验室培养：观察植物根尖分生组织细胞的仃丝分裂水培观察记录表（实验室培养）t*MM七承6K1平均数：rein第尺旗.大品明N大第H大部X弟人m.确川大wi4M*HNM*ff应“电池解废用化学MMfll1*mxaMM废作电池用健亦化学KIwI大曲*lM8iMI应口电池M应亦化学试解机战木跳伶镇枇介Mtffr05化学Ki!【第二，装片的制作组别实验类型实验目的实验步骤第一组传统实马&优化实验1仅改变解离浓度对实验结果造成的影响解离（浓度增加）-漂洗-染色-制片优化实验2改变解离浓度且染色后使用冰醋酸再次漂洗对实
8、验结果的影响解离（浓度增加）-漂洗-染色-漂洗（冰醋酸）-制片第二组传统实当&优化实验1仅增加解离时间对实验结果造成的影响解离（时间增加）-漂洗-染色-制片增加解离时间且染色后优化实验2使用冰醋酸再次漂洗对实验结果的影响解离（时间增加）-漂洗-染色-漂洗（冰醋酸）-制片第三组传统实&优化实验1改变解离浓度、改变漂洗方式且染色后使用冰醋酸再次漂洗对实验结果的影响解离（浓度增加、时间增加）-漂洗-染色-制片优化实验2增加解离时间、改变漂洗方式且染色后使用冰醋酸再次漂洗对实验结果的影响解离（浓度增加时间增加）-漂洗-染色-漂洗（冰醋酸）-制片第四组传统实3佥优化实验1改变解离浓度、改变漂洗方式且染色
9、后使用冰醋酸再次漂洗对实验结果的影响解离（浓度增加）-漂洗（6空点滴板）-染色-漂洗（冰醋酸）一制片优化实验2改变解离浓度、增加解离时间、改变漂洗方式且染色后使用冰醋酸再次漂洗对实验结果的影响解离（浓度增加、时间增加）-漂洗（6空点滴板）-染色-漂洗（冰醋酸）-制片第五组传统实&优化实验1仅解离前增加卡诺式液固定对实验结果的影响卡诺氏液固定-解离-漂洗-染色-制片优化实验2解离前增加卡诺式液固定、改变漂洗方式且染色后使用冰醋酸再次漂洗对实验结果的影响卡诺氏液固定-解离-漂洗（6空点滴板）-染色-漂洗（冰醋酸）-制片七、实验效果评价R优化、创新实验分裂图：实验对比证明，通过调整解离浓度，染色后增加漂洗步骤，可以有利于实验装片的成功，有利于学生通过显微镜真实的看到细胞分裂中染色体的特征。卡诺氏液的使用有利于避免因为时间因素导致分裂期细胞数量较少而影响实验效果。
