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1、生物安全防护n实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时,通过在实验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施,确保实验室工作人员不受实验对象侵染,确保周围环境不受其污染。 包括任何有潜在的感染可能的物质包括重组DNA研究什么是生物防护什么是生物防护生物安全事故举例生物安全事故举例n1995年香港科技大学大四学生梁同学因吸入别的同学泼撒德酸酐而身亡n1997年香港科技大学某访问学者因未按规定使用通风橱而造成他人肺部伤害,该访问学者永不被香港各大学欢迎n2001年英国博布特莱尔实验室东北方向50公里的布伦特伍德地区发现口蹄疫疫情,后经调查发
2、现该疫情暴发是口蹄疫病毒从实验室泄露导致的。n2003年台北发现一位资深科学家感染SARS冠状病毒,该事故是由于处理包含SARS病毒标本时病毒泄露引起的,该类事件也在大陆和新加坡等地区发现。n2007年,英国南部萨里郡发现口蹄疫事件,该事件也是实验室病毒泄露造成。nDNA凝胶电泳EB染色过的琼脂糖凝胶不经处理,直接丢弃。n工程菌培养液、实验室废液不经处理,直接倒入水池,重组的DNA进入土壤,可以存留40万年对工作人员的危害对环境的危害n理解危害物的生物学性质n危害物在实验室之间的传播n实验仪器以及实验过程中的危险性n目标: 给实验者提供最有效的保护,减少实验过程中暴露的可能性 对所使用药品以及
3、实验环境风险的认定实验室的分类、分级n分类:一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫)和实验脊椎动物生物安全防护实验室。n分级:每类生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度各分为四级。各级实验室的生物安全防护要求依次为:一级最低,四级最高。一般生物安全防护实验室-1n1.一级生物安全防护实验室:n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。 E. coli K-12 strainsn2.二级生物安全防护实验室 :n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。n如:非
4、呼吸道感染,非致病的物质一般生物安全防护实验室-3n3. 三级生物安全防护实验室 n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗。 n艾滋病病毒的研究(血清学实验除外)应在三级生物安全防护实验室中进行。 肺结核病毒,SARS等一般生物安全防护实验室-4n4. 四级生物安全防护实验室 n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物,也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待
5、有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。FORGET ABOUT IT! 一级生物安全防护实验室的基本要求 1. 安全设备和个体防护 1.1 一般无须使用生物安全柜等专用安全设备。 1.2 工作人员在实验时应穿工作服,戴防护眼镜。 1.3 工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。一级生物安全防护实验室的基本要求n2 实验室设计和建造的特殊要求 2.1 每个实验室应设洗手池,宜设置在靠近出口处。 2.2 实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙,不得铺设地毯。 2.3 实验台表面应不透水,耐腐蚀、耐热。 2.4 实验室中的家具应牢固。为易于清洁,各种家具
6、和设备之间应保持生物废弃物容器的台(架)。 2.5 实验室如有可开启的窗户,应设置纱窗。 生物安全柜生物安全柜有效地减少身体和有毒物品的物理接触。高校过滤可以去除微粒 (最小 0.3 uM),效率达到99.97% 。 三种不同分级的安全柜,从而提供不同的保护。使用生物安全柜使用生物安全柜使用之前:确保BSC被认证过关闭 UV ;打开荧光灯工作区表面消毒工作之前5-10分钟开启鼓风机WORKING SAFELY IN A BSCAfter using the cabinet:Leave blower on at least 5 minutes to purge cabinetRemove and
7、 decontaminate equipment and materialsDisinfect cabinet surfacesTurn off blower and fluorescent lamp, turn on UV lampWORKING SAFELY IN A BSCMaintenance:Before and after each use - Work surfaces wiped downWeekly- UV lamp should be wiped cleanMonthly - All vertical surfaces wiped downAnnually- UV lamp
8、 intensity verified - Decontamination with formaldehyde gas (ORM)- Certification (ORM)WORKING SAFELY IN A BSCBacterial:76% from clinical labs8% from research labsExposure:60% acquired from inhalationOther exposures include: digestion, sharps, splashes, direct and indirect contact Laboratory Acquired
9、 Infections (LAI)Viraln16% from clinical labs n70% from research labs32% from animal related activities Laboratory Acquired Infections (LAI)Biohazardous Waste CategoriesCultures and stocks of infectious agents and associated biologicalslaboratory wastebiological production wastediscarded live and at
10、tenuated vaccinesculture dishes and related materialsBiohazardous Waste CategoriesLiquid human and animal wasteliquid or semi-liquid blood and blood products and body fluidscontaminated items that would release blood or items that are caked with blood or other potentially infectious materials; NOT i
11、ncluding urine or materials stained with blood or body fluidsinfectious animal waste (research)Biohazardous Waste CategoriesPathological wastetissuesbody parts other than teethproducts of conceptionfluids removed by trauma or during surgery or autopsy/necropsy or other medical procedure and not chem
12、ically fixed.And More Biohazardous Waste CategoriesnAnimal and plant pathogen wastenRecombinant DNA wastenSharpsBiowaste vs. Trash3 basic questions to differentiate:1.Is it contaminated with viable biological material?2.Can blood or other regulated body or biological fluids be released?3.Is it a sha
13、rps hazard? #1Is it contaminated with viable biological Is it contaminated with viable biological material?material?Examples: Contaminated lab waste Personal protective equipment used for handling potentially infectious materials (including handling infected animals or their products) Wastes from in
14、fectious disease research (carcasses, body fluids)#2Can blood or other (regulated) body fluids or viable Can blood or other (regulated) body fluids or viable biological materials be released?biological materials be released?Some ExamplesSome ExamplesTubes of bloodVacuum flasks containing body fluids
15、 or cell line wasteManaging Liquid Biohazardous WasteStorage:nLabel and secure bulk vessels if not disposed of immediatelyTreatment:nChemical disinfection ORnAutoclaveDisposal: THENnFlush to sewer n10% bleach solution good for general disinfection High organics use 20% Needs to be made weeklyTest co
16、ntact timenEthanolUse 70% solution (most effective)Longer contact time and flammable*Should research and know effectiveness and contact time for the best disinfectant against your agent! Disinfection Managing Non-Sharp Biohazardous Wastenlabeled container nlined with a biohazardous waste bagnequipped with a lid.Managing Non-Sharp Biohazardous WastenSecurely tie bags for transport to treatment/collection site.nWhen moving wastes, use secondary containment; avoid using public halls and elevators.