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1、第11章弧菌属弧菌属(Vibrio)1.概念：是一群菌体短小，弯曲成弧形的 革兰氏阴性菌。2.形态：菌体弯曲，属于螺形菌，但人工培养后呈现杆状，类似肠道杆菌。3.与肠杆菌科细菌的区别：v 氧化酶试验氧化酶试验 +v 一端单一鞭毛，运动活泼、呈穿梭状一端单一鞭毛，运动活泼、呈穿梭状v 嗜碱生长嗜碱生长氧化酶试验阳性(深紫色)氧化酶试验阳性(深紫色)单鞭毛电镜图弧菌属(Vibrio)4.分布：广泛存在于自然界中，其中以水体环境最为多见。5.致病：重要的致病性弧菌为霍乱弧菌和副溶血性弧菌。第一节 霍乱弧菌 霍乱弧菌(V.cholerae)是引起霍乱的病原体，霍乱是一种起源于印度的烈性传染病，自从18
2、17年以来，发生过7次世界性的霍乱大流行。前6次均由霍乱弧菌古典生物型引起，第7次大流行由霍乱弧菌El-Tor生物型引起，它们属于O1群霍乱弧菌。但1992年在印度、孟加拉发现的新血清型(O139群)霍乱弧菌(非O-1群菌)所致的霍乱流行,引起各国的高度重视。六次霍乱大流行 亚洲 非洲 欧洲 南美洲 北美洲 大洋洲第1次 1817-23 +-第2次 1826-37 +第3次 1846-62 +-第4次 1864-75 +-第5次 1883-87 +-第6次 1892-1925 +-在第在第5 5次霍乱大流行中次霍乱大流行中(1883(1883年年)，德国细菌，德国细菌学家学家Robert Ko
3、chRobert Koch从霍乱病人排泄物及病死从霍乱病人排泄物及病死者肠道组织中首先发现了霍乱弧菌，霍乱者肠道组织中首先发现了霍乱弧菌，霍乱传染性强，病死率高，属于国际检疫的传传染性强，病死率高，属于国际检疫的传染病染病(海关检查海关检查)，在我国霍乱排行甲类传，在我国霍乱排行甲类传染病第二位，俗称二号病。染病第二位，俗称二号病。1905年年 也在埃及西奈半岛的也在埃及西奈半岛的ElTor 检疫站首次分离到检疫站首次分离到 溶血性霍乱弧菌，命名为：溶血性霍乱弧菌，命名为：ElTor 生物型生物型 El Tor 生物型生物型 溶血溶血 古典生物型古典生物型 不溶血不溶血 O-1群群 古典生物型
4、古典生物型 霍乱弧菌（霍乱弧菌（18171961）前六次大流行的流行菌株前六次大流行的流行菌株 O-1群群 El Tor生物型生物型霍乱弧菌霍乱弧菌 1961 第七次大流行的流行菌株第七次大流行的流行菌株 O2O138群（非群（非O-1群）群）引起散发的胃肠炎引起散发的胃肠炎 O139群：群：1992年年10月开始在印度半岛引起霍乱样病流行月开始在印度半岛引起霍乱样病流行 流行菌株不能被流行菌株不能被O-1群抗血清所凝集群抗血清所凝集 也不被也不被O2O138 群抗血清所凝集群抗血清所凝集 以流行株制备的抗血清也不凝集以流行株制备的抗血清也不凝集O1O138 群霍乱弧菌群霍乱弧菌 及其他弧菌及
5、其他弧菌 故：命名为新的血清群故：命名为新的血清群霍乱弧菌霍乱弧菌O139群群一、生物学性状形态和染色1.大小：0.50.81.53m。2.形态：弯曲成弧形或逗点状。3.结构：有菌毛，特别是菌体一端有单鞭毛，使细菌运动活泼(病人粪便作悬滴标本,可见鱼群样穿梭)，部分菌株(例如O139群)有荚膜4.染色：革兰氏阴性菌。形态学特点为逗点状、运动活泼的革兰氏阴性菌。单鞭毛电镜图霍乱弧菌革兰氏染色 培养特性与生化反应1.需氧菌,营养要求不高,适应性强适应性强,对温度、营养物质、气体环境没有很严格的要求。2.耐碱不耐酸耐碱不耐酸 碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水运送标本运送标本/增菌增菌 碱性琼脂平板碱性琼脂平
6、板透明透明/半透明、无色扁平菌落半透明、无色扁平菌落。TCBS琼脂平板3.生化反应生化反应：氧化酶试验阳性，分解多种糖类，发酵的糖产酸可杀死该菌。抗原结构与分型1.抗原组成：O抗原为特异性抗原，H抗原是弧菌的共同抗原。2.分型：根据O抗原不同，把霍乱弧菌分为155个血清群，其中O1群和O139群引起霍乱，O1群霍乱弧菌又分为3个血清型和2个生物型。O1群霍乱弧菌 血清型 O1多克隆抗体 O1单克隆抗体 流行 (抗原成分)A B C 小川型（AB）-是 稻叶型（AC）-是 彦岛型（ABC）未知 “”凝集，“-”不凝集O1群霍乱弧菌 O1群霍乱弧菌的每个血清型可分为古典生物型和EI-Tor生物型，
7、两种生物型的霍乱弧菌在许多生物学特性、临床表现和流行特点等方面基本相同，它们的区别表现为：特性 古典生物型 EI-Tor生物型 对第群噬菌体敏感性 +-凝集鸡红细胞 -+溶解羊红细胞 -+对50IU的多粘菌素敏感性 +-O139O139群霍乱弧菌群霍乱弧菌 1.1.不同点：不同点：不表达不表达O1O1群霍乱弧菌的群霍乱弧菌的O O抗原，抗原，但编码脂多糖抗原和荚膜多糖抗原。但编码脂多糖抗原和荚膜多糖抗原。2.2.相同点：相同点：O1O1群霍乱弧菌和群霍乱弧菌和O139O139群霍乱群霍乱弧菌都产生霍乱肠毒素，感染的临床表现弧菌都产生霍乱肠毒素，感染的临床表现和流行特点基本相同。和流行特点基本相
8、同。抵抗力抵抗力1.对理化因素抵抗力弱：以1份漂白粉和4份水比例处理患者排泄物或呕吐物1小时，可杀死霍乱弧菌。2.水环境：存活1-3周，与疾病传播有关。自来水加0.5ppm次氯酸,15分钟能杀死霍乱弧菌。3.1000C 1-2min，550C 10min,正常胃酸中 4min二、致病性致病物质霍乱肠毒素、鞭毛、菌毛。霍乱肠毒素1.性质：外毒素，蛋白质，是最为强烈的致泻毒素。2.组成：1个A亚单位和5个B亚单位。B亚单位是结合成分，与小肠粘膜上皮细胞结合；A亚单位是毒性成分。3.机制：A亚单位的A1成分激活腺苷酸环化酶，细胞内cAMP升高，小肠粘膜上皮细胞分泌亢进(电解质和水)，导致腹泻和呕吐。
9、霍乱肠毒素霍乱肠毒素 B 亚单位亚单位 结合部分结合部分 受体受体：小肠上皮细胞：小肠上皮细胞GM1神经节苷脂神经节苷脂 A2亚单位亚单位 与与B亚单位结合亚单位结合 A1亚单位亚单位 毒性部分毒性部分 活化的活化的A1 胞内胞内 腺苷环化酶活化腺苷环化酶活化 ATP cAMP 分泌：分泌：Na+、K+、H2O 导致：严重腹泻、呕吐、脱水。导致：严重腹泻、呕吐、脱水。由？编码？由？编码？霍乱肠毒素机制菌毛菌毛：粘附肠上皮细胞刷壮缘的微绒毛；：粘附肠上皮细胞刷壮缘的微绒毛；鞭毛鞭毛：活泼的鞭毛运动，使细菌穿过粘膜表面：活泼的鞭毛运动，使细菌穿过粘膜表面 并在此生长繁殖。并在此生长繁殖。毒力株毒力
10、株粘液素酶粘液素酶：液化粘液层：液化粘液层,利于细菌穿透利于细菌穿透 霍乱弧菌依靠活泼的鞭毛运动,穿过肠粘膜表面的粘液层,通过菌毛粘附于肠上皮细胞上,迅速繁殖并分泌霍乱肠毒素。霍乱弧菌只有粘附定植小肠粘膜上皮细胞后方可致病。所致疾病1.1.传染源传染源：霍乱病人、无症状感染者、带菌者(EI-Tor生物型)。2.2.传播途径传播途径：肠道传染病，污染的水或食物经口摄入。3.3.致病过程致病过程：稀释胃酸，霍乱弧菌鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素。4.4.症状症状：剧烈吐泻，吐泻物呈“米泔水”样(胆汁分泌减少)。导致水和电解质丢失，循环衰竭及肾功能衰竭。所致疾病所致疾病 人类是霍乱弧菌的唯一易感者人类是霍乱
11、弧菌的唯一易感者 污染水源、食品污染水源、食品 正常胃酸：正常胃酸：1081010 胃胃 引起感染引起感染 胃酸低下：胃酸低下：103105 小肠小肠 粘附粘附 迅速繁殖迅速繁殖 定居定居 1、霍乱弧菌不侵入上皮细、霍乱弧菌不侵入上皮细 胞，更不侵入血液。胞，更不侵入血液。肠毒素肠毒素 2、肠毒素进入肠上皮细胞、肠毒素进入肠上皮细胞 发挥作用，但不入血液。发挥作用，但不入血液。3、局部一般无炎症细胞、局部一般无炎症细胞 上吐下泻、严重脱水、血容量减少上吐下泻、严重脱水、血容量减少 微循环衰竭、酸中毒微循环衰竭、酸中毒 肾功能衰竭、休克肾功能衰竭、休克 死死 亡亡及时治疗：补充液体、电解质，死亡
12、率仅为及时治疗：补充液体、电解质，死亡率仅为1%未经治疗：未经治疗：死亡率可达死亡率可达50%75%疾病的严重程度比较1.最重：O139群霍乱弧菌，严重脱水和高死亡率。2.较重：O1群霍乱弧菌古典生物型。3.较轻：O1群霍乱弧菌EI-Tor生物型。三、免疫性三、免疫性 患病后具有较牢固的免疫力患病后具有较牢固的免疫力 IgGIgG型抗肠毒素抗体型抗肠毒素抗体：中和抗体中和抗体 阻断阻断B B亚单位与受体的结合亚单位与受体的结合 IgMIgM型抗菌体抗体：型抗菌体抗体：激活补体激活补体 SIgASIgA抗体：抗体：是保护机体肠粘膜免受霍乱弧菌及其肠毒素侵袭和致病是保护机体肠粘膜免受霍乱弧菌及其肠
13、毒素侵袭和致病的主要机制。的主要机制。抵抗肠腔多种蛋白酶的分解抵抗肠腔多种蛋白酶的分解与菌毛等粘附因子结合，阻碍细菌粘附于肠粘膜上皮与菌毛等粘附因子结合，阻碍细菌粘附于肠粘膜上皮细胞细胞凝聚细菌，使其失去动力，阻止其侵袭力和产生毒素凝聚细菌，使其失去动力，阻止其侵袭力和产生毒素四、微生物学检查法 快速、准确、及时报告疫情快速、准确、及时报告疫情！流行病学调查 直接镜检：直接镜检：标本？标本？悬滴法观察细菌运动 分离培养分离培养：标本？标本？标本的保存和运输 Cary-Blair保存液 碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水运送、保存、增菌运送、保存、增菌 TCBS琼脂平板琼脂平板分离培养分离培养 黄色菌落黄
14、色菌落 生化反应生化反应 血清学试验血清学试验 鉴定与分型鉴定与分型 快速诊断快速诊断 荧光球试验；荧光球试验；PCR法法 霍乱是一种烈性传染病，对首例病人的确诊对控制本病极为重要!五、防治原则1.1.一般预防一般预防：控制传染源(很难消灭传染源)，切断传染途径。2.2.免疫预防免疫预防：应用菌苗类毒素减毒重组活菌苗 减毒株（CVD103）菌苗加类毒素混合苗 纯化B亚单位+灭活细菌3.3.治疗措施治疗措施：及时补充水份、电解质(对症处理)是抢救霍乱病人的关键 敏感抗生素治疗(注意耐药性)及时隔离病人。第二节 副溶血性弧菌 副溶血性弧菌(V.parahemolyticus)的生物学性状类似霍乱弧菌，但与霍乱弧菌比较，它的一个显著特点是嗜盐性，在NaCl浓度较高(3%-4%左右)的环境中才能生长繁殖，致病性副溶血性弧菌多出现溶血(神奈川现象)，食入烹饪不当的海产品或腌制品(污染副溶血性弧菌)，可导致食物中毒(急性胃肠炎)。致病性致病性:是我国沿海地区最常见的一种食物中毒海产品等食物中毒潜伏期：126小时症状：腹痛、腹泻、呕吐、发热,粪便呈水样，伴有血水、粘血。生物学性状生物学性状:与霍乱弧菌相似嗜盐性 3.5%NaCl最为适合嗜盐菌小结:1.1.所致疾病所致疾病 2.2.霍乱弧菌霍乱弧菌 形态特点形态特点 培养特征培养特征 肠毒素肠毒素
